結核性與惡性胸腔積液中IL—6、IL—8、IL—18的表達水平及其意義

武忠長

[摘要] 目的 探討白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細胞介素-8（interleukin-8， IL-8）、白細胞介素-18（interleukin-18，IL-18）在結核性與惡性胸腔積液中的表達水平及其臨床意義。 方法 采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測本院2014年10月～2015年10月收治的56例結核性胸膜炎患者、42例惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6、IL-8、IL-18的表達水平。 結果 結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達水平為（1131.2±21.4）pg/mL，IL-18表達水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達水平為（367.3±22.4）pg/mL。結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達水平比較差異無統計學意義（P>0.05）。 結論 結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達水平顯著高于惡性腫瘤患者，可作為臨床鑒別診斷的參考指標。

[關鍵詞] 結核；胸腔積液；IL-6；IL-18；IL-8

[中圖分類號] R521.7 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2016）07-0094-03

[Abstract] Objective To determine the levels and diagnose value of IL-6， IL-8， IL-18 in tuberculosis and malignant pleural effusion. Methods Enzyme-linked immtmosorbent assay（ELISA） was used to evaluate the levels of IL-6， IL-8， IL-18 in 56 cases of tuberculosis pleural effusion， 42 cases of malignant pleural effusion who were hospitalized from Oct 2014 to Oct 2015. Results The levels of IL-6， IL-8， IL-18 in tuberculosis pleural effusion patients were （510.3±42.1 pg/mL， 1131.2±21.4 pg/mL and 795.6±30.2 pg/mL）. Whereas the levels of IL-6， IL-8， IL-18 in malignant pleural effusion patients were （212.4±40.9 pg/mL， 1084.8±11.0 pg/mL， 367.3±22.4 pg/mL）. The levels of IL-6 and IL-18 in tuberculosis pleural effusion were significantly higher than that in malignant pleural effusion（P<0.05）， while the level of IL-8 in two groups showed no significantly difference（P>0.05）. Conclusion The levels of IL-6， IL-18 in tuberculosis and malignant pleural effusion are different， which could be used as a reference indicator.

[Key words] Tuberculosis； Pleural effusion； IL-6； IL-18； IL-8

胸腔積液是臨床常見病理現象，由全身疾病或胸膜疾病引起液體過多滲出或漏出于胸膜腔中而產生。流行病學調查顯示，全球每年有超過30億人患胸腔積液疾病[1]。其中結核性與惡性胸腔積液是臨床常見的滲出性胸腔積液，分別占胸膜疾病的49.6%和29.6%[2]。胸腔積液是肺結核病變的常見表現形式，結核病患者出現胸腔積液的比例大約為14.3%～19.3%[3]。肺癌是引起惡性胸腔積液最常見的腫瘤之一，約有25%的肺癌患者有胸腔積液，其次為乳腺癌[4，5]。結核性與惡性胸腔積液的治療方法、預后迥異，因此對于兩種不同的胸腔積液的鑒別診斷對臨床醫生十分重要。研究發現，結核性、惡性胸腔積液中含有大量蛋白質、炎癥細胞以及多種細胞因子等[6，7]。隨著分子免疫學的逐步進展，近年來胸腔積液的免疫學檢查逐漸受到重視，尤其是細胞因子在胸腔積液中的作用研究。本實驗通過檢測結核性與惡性胸腔積液中的IL-6、IL-8、IL-18的表達水平，初步探討其在結核性、惡性胸腔積液中的變化以及臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 結核性胸腔積液組 以回顧性研究方式選擇本院2014年10月～2015年10月呼吸內科收治的胸腔積液患者56例，男29例，女27例，年齡17～70歲，平均（37.6±9.3）歲。納入標準：①所有患者均有結核中毒癥狀；②胸膜活檢均有典型結核性肉芽腫改變；③胸腔積液經常規生化檢查確定為滲出性；④經正規抗結核治療2～4周后癥狀消失并且胸腔積液吸收快。

1.1.2 惡性胸腔積液組 選擇本院2014年10月～2015年10月呼吸內科、胸外科等收治的胸腔積液患者42例，男23例，女19例，年齡25～78歲，平均（42.4±8.9）歲。所有患者均經組織病理學證實且未經治療，其中肺癌胸膜轉移30例，惡性胸膜間皮瘤5例，肝癌胸膜轉移3例，乳腺癌胸膜轉移2例，淋巴瘤2例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有患者于治療前經胸腔穿刺術抽取新鮮胸腔積液5 mL后置于肝素處理過的試管中，經2000 r/min離心10 min，取上清液保存于-80℃冰箱中待用。

1.2.2 檢測方法 采用ELISA雙抗體夾心法檢測，操作步驟嚴格按照說明書進行。人IL-6、IL-8、IL-18定量ELISA試劑盒均購自美國Biolegend公司，應用美國Bio-Rad酶標儀在450 nm波長處讀取吸光度值。

1.3 觀察指標

根據標準品濃度與450 nm吸光度值獲得標準曲線，讀取所測樣品吸光度值對應濃度即為待測樣品濃度。

1.4 統計學處理

計量資料以（x±s）表示，所有數據使用SPSS16.0軟件進行分析，組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 結核性與惡性胸腔積液中IL-6、IL-8、IL-18的表達水平

ELISA檢測結果如表1所示，結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達水平為（1131.2±21.4）pg/mL，IL-18表達水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達水平為（367.3±22.4）pg/mL。結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達水平比較差異無統計學意義（P>0.05）。

2.2 IL-6、IL-18對結核性與惡性胸腔積液的臨床意義

ROC曲線顯示（封三圖3），以結核性胸腔積液組為陽性，惡性胸腔積液組為陰性，IL-6、IL-18的曲線下面積分別為75.3、98.3（表2），聯合檢測IL-6、IL-18能提高結核性胸腔積液的診斷效能至96.85%。靈敏度=真陽性人數/（真陽性人數+假陰性人數）×100%；特異度=真陰性人數/（真陰性人數+假陽性人數）×100%。

3 討論

目前臨床對于結核性、癌性胸腔積液的診斷主要依賴于細胞學檢查、結核菌檢測、胸膜活檢病理診斷等，但敏感度、靈敏度等難以滿足臨床需要。研究表明，不同原因導致的胸膜疾病均可激活免疫細胞病聚集于局部病變部位、刺激免疫細胞產生多種細胞因子，細胞因子的免疫調節作用與胸膜病變的病理過程密切相關。IL-6由T淋巴細胞、單核巨噬細胞產生，具有調節免疫應答、造血等作用，與炎癥、自身免疫性疾病、惡性腫瘤密切相關[8，9]。IL-8可由單核細胞、肺泡巨噬細胞等產生，是炎癥反應重要介質之一。據報道，IL-8與呼吸系統疾病發病機制有關，并且能促進腫瘤血管生長[10，11]。IL-18是由1995年Okamura首次發現的Th1型細胞因子，具有多種生物學活性。結核菌的感染控制主要依賴于Th1型免疫應答，IL-18在機體抗結核免疫中具有重要作用[12，13]。盡管細胞因子的基因多態性較為少見，但越來越多的研究表明血漿中細胞因子含量以及啟動子、編碼區的突變與結核的易感性相關[14，15]。因此，探討IL-6、IL-8、IL-18在結核性與惡性胸腔積液中的不同表達水平對兩者臨床鑒別診斷具有重要意義。

本實驗結果顯示，結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達水平為（1131.2±21.4 pg/mL），IL-18表達水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達水平為（367.3±22.4）pg/mL。結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達水平差異無統計學意義（P>0.05）。ROC曲線顯示，以結核性胸腔積液組為陽性，惡性胸腔積液組為陰性，IL-6、IL-18的曲線下面積分別為75.3、98.3，聯合檢測IL-6、IL-18能提高結核性胸腔積液的診斷效能至96.85%。由此可見，IL-6、IL-18兩項指標聯合檢測能明顯提高敏感度和特異度，對于結核性和惡性胸腔積液的鑒別診斷具有重要價值。

綜上所述，本研究結果提示，結核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達水平顯著高于惡性腫瘤患者，聯合檢測IL-6、IL-18可作為臨床鑒別診斷的有效參考指標。

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（收稿日期：2015-12-18）