抗核抗體、抗—ds—DNA、抗—sm、抗核小體聯(lián)合檢測對SLE的診斷價值

許鴻昌

[摘要] 目的 評價分析聯(lián)合檢測抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）及抗-sm、抗核小體對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的診斷價值。 方法 選取2011年2月～2013年12月在我院門診和住院的119例自身免疫疾病患者作為研究對象，其中67例患者為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，作為SLE組，另52例患者為非系統(tǒng)性紅斑狼瘡，作為非SLE組；同時另選取50例健康體檢者作為對照組。三組研究對象均分別進行ANA、抗ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測，對其檢測結果進行分析。 結果 ANA、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體抗體在SLE組中的敏感性分別為83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，明顯高于非SLE組；敏感性由83.5% 提高到94.0%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體的聯(lián)合檢測在SLE診斷中有良好的互補作用，可明顯提高敏感性，避免漏檢；對SLE的早期診斷、療效檢測有顯著的臨床應用價值。

[關鍵詞] 抗核抗體（ANA）；抗雙鏈DNA抗體（抗ds-DNA）；抗-sm；抗核小體抗體；系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）

[中圖分類號] R593.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2016）07-0091-03

[Abstract] Objective To evaluate and analyze the diagnostic value of antinuclear antibody（ANA）， anti-ds DNA， anti-sm， and anti-nucleosome combined detection in SLE. Methods 119 patients with autoimmune disease treated in our hospital from February 2011 to December 2013 were selected， of which 67 patients with SLE were divided into the SLE group， another 52 non-SLE patients were divided into the non-SLE group. 50 healthy volunteers were also enrolled as the control group. ANA， anti-ds DNA， anto-sm and anti-nucleosome detection were conducted on patients of three groups and the results were analyzed. Results The sensibility of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody in the SLE group were 83.5%， 43.2%， 52.2%， and 47.7%， significantly higher than those in the non-SLE group（P<0.05）. The detection sensitivity was enhanced from 83.5% to 94.0% with significant difference （P<0.05）. Conclusion Combined detection of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody shows favorable supplementary effect in diagnosis of SLE， which can significantly enhance the sensitivity of detection and avoid probability of missed detection， indicating remarkable clinical application value in early diagnosis and efficacy assessment of SLE.

[Key words] Antinuclear antibodies； Anti-ds-DNA； Anti-sm； Anti-nucleosome antibody； Systemic lupus erythematosus

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是風濕免疫科較為常見的一種疾病，也叫全身性紅斑狼瘡或紅斑性狼瘡，是一種慢性自身免疫性炎癥結締組織疾病，以多系統(tǒng)器官病變累及多臟器，且血清中常伴有多種自身抗體，由于抗體作用靶抗原的不同，患者血清中出現(xiàn)自身抗體如抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小體抗體（AnuA）等，在SLE患者血清中可單獨、或多個同時出現(xiàn)。這些抗體對SLE的診斷有很好的特異性，但敏感性各不相同，若單一檢測會對SLE有漏檢。有文獻[1，2]報道用幾種特異性抗體聯(lián)合檢測可提高SLE患者自身抗體的陽性率，但選擇的抗體各有不同。本研究分析了67例SLE患者抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小體抗體的檢測結果，旨在探討聯(lián)合檢測對系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2011年2月～2013年12月我院住院和門診患者及健康體檢者。SLE組包括67例系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者，男12例，女55例，年齡19～76歲，平均（50.5±15.8）歲。SLE診斷均符合2009 SLICC修改的ACR系統(tǒng)性紅斑狼瘡分類標準[3]。非SLE組：確診的52例自身免疫性疾病，包括9例干燥綜合征、6例多發(fā)性硬化癥、15例類風濕性關節(jié)炎、2例強直性脊柱炎、5例系統(tǒng)性血管炎、12例混合性結締組織病和3例皮肌炎，年齡17～75歲，平均（50.9±14.9）歲。診斷均符合各自相關診斷標準[4]。正常健康對照組50例，男12例，女38例；年齡19～78歲，平均（51.3±15.4）歲。

1.2 試劑

抗核抗體（間接免疫熒光）、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體（免疫印跡法）檢測試劑，均由歐盟（杭州）醫(yī)學實驗室有限公司提供。

1.3 儀器

Lak-601型熒光顯微鏡，EUROBLotMasterII全自動免疫分析儀，Canosan掃描儀。

1.4 實驗方法

1.4.1 標本采集 清晨空腹采集靜脈血3 mL，靜置30 min后，3000 r/min速率離心10 min分離血清，對血清標本分別標號，保存于-20℃待檢。

1.4.2 測試 對血清標號，抗核抗體采用間接免疫熒光法檢測（抗核抗體ANA熒光強度≥1∶100為陽性，熒光強度≤1∶100為陰性）。抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體采用免疫印跡法檢測，操作采用歐盟提供的EUROBLotMasterII全自動免疫分析儀，為避免人眼判讀誤差，采用Canosan掃描儀判讀結果，以顯色大于一個+為陽性。

1.4.3 敏感性及特異性 敏感性=真陽性/病例組=真陽性/（真陽性+假陰性）=SLE組試驗陽性/（SLE試驗陽性+試驗陰性）；特異性=真陰性/健康對照組=真陰性/（真陰性+假陽性）=（非SLE組+健康對照組）試驗陰性/（試驗陰性+試驗假陽性）。

1.5 統(tǒng)計學分析

計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義，根據計算所得χ2值查χ2界值表，各組敏感率χ2檢驗中P<0.01，差異有高度統(tǒng)計學意義，而各組特異性χ2檢驗中P>0.05則差異無統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體對疾病的檢測意義

67例SLE患者抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體抗體的敏感性分別為83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，按照行列表χ2檢驗，將SLE患者組與非SLE組和健康對照組做統(tǒng)計學分析，χ2=10.60，P<0.01，差異有高度統(tǒng)計學意義，特異性分別為90.2%、98.0%、97.1%、98.0%，按照行列表χ2檢驗，將SLE患者組與非SLE組和健康對照組的特異性做統(tǒng)計學分析，χ2=2.77，P>0.05。見表1。

2.2 抗核抗體聯(lián)合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測敏感性比較

抗核抗體檢測SLE的敏感性為83.5%，聯(lián)合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測，特異性無明顯改變，敏感性明顯高于單一檢測，達94%，按照行列表χ2檢驗，將單獨檢測抗核抗體與各聯(lián)合檢測的敏感性做統(tǒng)計學分析，χ2=13.10，P<0.01，差異有高度統(tǒng)計學意義，后者的敏感性更高，見表2。

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus （SLE）是風濕免疫科較為常見的一種疾病，也稱全身性紅斑狼瘡或紅斑性狼瘡；發(fā)病原因至今尚未明確，為臨床上有較高發(fā)病率的風濕免疫科疾病，是一種慢性自身免疫性炎癥結締組織疾病，以多系統(tǒng)器官病變累及多臟器，并且血清中常伴有多種自身抗體出現(xiàn)的自身免疫性炎癥性疾病，該病患者多為年輕女性，年齡在20～40歲之間，老年人群及兒童也可發(fā)病。患者多伴有皮疹、紅斑、關節(jié)痛、關節(jié)炎等癥狀，不僅會給患者的健康造成影響，而且會對患者的心理健康造成一定程度上影響。由于臨床癥狀多不典型，多通過實驗室檢測自身抗體來幫助診斷。目前診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡實驗室指標主要有抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體等。

抗核抗體靶抗原分布于整個細胞，包括細胞核、細胞骨架、細胞漿、細胞分裂期，是指細胞內所有的抗原成分抗體的總稱。抗核抗體檢測在診斷SLE有較高的敏感性（90.2%）。在干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、類風濕關節(jié)炎、混合性結締組織病等多種自身免疫病中均可出現(xiàn)陽性反應，少數正常人也有弱陽性反應。表1顯示特異性較差，本研究中混合性結締組織病4例、類風濕性關節(jié)炎3例、干燥綜合征2例、健康對照組1例、均有陽性反應，不能作為單獨診斷SLE的標準，抗核抗體只能作為自身免疫性疾病的過篩實驗[5，6]。抗核小體抗體（anti-nucleosome antibody，AnuA），是真核細胞的亞單位，在SLE中輔助T淋巴細胞識別自身抗原，產生特異性自身抗體，是多種自身抗體產生的根源。有報道，AnuA和抗-ds-DNA與SLE的疾病活動性相關，特別是與狼瘡腎損傷有密切相關，可以作為病情觀察的指標[7]，本研究AnuA抗體在67例SLE中敏感性為47.7%，特異性為98.0%，與文獻[7，8]報道結果基本一致。

抗-sm抗體對SLE有輔助診斷意義，但與疾病的活動無關，有報道抗-sm抗體是SLE的標志性抗體之一[9]。對SLE較高的特異性，活動期或非活動期抗-sm均可呈現(xiàn)陽性反應，有報道抗-sm抗體陽性是發(fā)生狼瘡性腎炎的特異性指標之一[10]。本研究抗-sm陽性率為52.2%，但在健康組沒有一例陽性反應特異性為100%，與疾病對照組特異性97.1%，是診斷SLE的理想指標。

抗-ds-DNA對靶抗原的識別位點是雙螺旋脫氧核糖核酸骨架上，對SLE具有高度的特異性[11]，并與臨床表現(xiàn)密切相關。是目前公認診斷SLE的標志性抗體之一[12]。且有報道：抗-ds-DNA抗體滴度與SLE的活動性呈正相關[13]，定期監(jiān)測抗-ds-DNA抗體，有助于觀察SLE患者腎損傷的程度，可作為狼瘡腎病情的觀察指標[14]。

抗核抗體、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體檢測在自身免疫性疾病中有重要的價值，本文試驗顯示抗核抗體（ANA）可見于多種自身免疫病，在SLE患者血清中，ANA在SLE中的敏感性為83.5%，抗-ds-DNA中的敏感性為43.2%，抗-sm抗體在SLE中的敏感性為52.2%、抗核小體在SLE中的敏感性為47.7%。在SLE診斷中敏感性ANA≥抗-sm≥抗核小體≥抗-ds-DNA抗體，特異性抗-ds-DNA≥抗核小體抗體≥抗-sm≥ANA。有時ANA陰性而抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體則會有陽性出現(xiàn)，而與抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小體聯(lián)合檢測，單獨檢測則會出現(xiàn)漏檢和誤檢，同時還可對SLE患者進行有效的病情監(jiān)測，以減少并發(fā)癥[15]。若ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體聯(lián)合檢測，敏感性可達94.0%。聯(lián)合檢測特異性比較，無明顯差異（P>0.05），而單一抗體檢測敏感性比較，有顯著差異（P<0.01）。

綜上所述，SLE患者血清中可同時出現(xiàn)多種自身抗體，在患者血清中可單獨或同時出現(xiàn)，若只檢測一種則會出現(xiàn)漏診或誤診，若聯(lián)合檢測ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小體抗體，可明顯提高SLE診斷的敏感性，降低漏檢率，且上述檢測方法聯(lián)合檢測可發(fā)揮良好的互補作用，對提高SLE的早期診斷、療效監(jiān)測有良好的應用價值。

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（收稿日期：2015-12-17）