堿性復紅染色法與金胺-羅丹明染色法在結核分枝桿菌痰涂片檢測中的應用效果對比

張海燕，景一嫻

（重慶市公共衛生醫療救治中心醫學檢驗科，重慶 400030）

結核病的發生與結核分枝桿菌感染密切相關。此病是一種慢性傳染性疾病。盡早對此病患者的病情進行準確的診斷并及時對其進行有針對性的治療對改善其預后具有十分重要的意義。進行結核分枝桿菌痰標本分離培養的耗時較長，利用固體改良羅氏培養基進行分離培養至少需要20 d，最長可需要60 d[1]。目前臨床上通常會采用痰涂片法進行結核分枝桿菌檢測，該檢測方法具有操作相對簡單、費用較低等優點[2]。近年來，隨著痰涂片染色技術的不斷發展，熒光痰涂片染色技術在結核分枝桿菌痰涂片檢測中得到了廣泛的應用。有研究指出，金胺-羅丹明染色法（又叫金胺O 熒光染色法）在結核分枝桿菌痰涂片檢測中的應用效果較好。本文對2020 年5 月至2021 年4 月期間在我中心接受結核分枝桿菌痰涂片檢測的2480 例患者進行研究，旨在比較堿性復紅染色法與金胺- 羅丹明染色法在結核分枝桿菌痰涂片檢測中的應用效果。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2020 年5 月至2021 年4 月期間在我中心接受結核分枝桿菌痰涂片檢測的2480 例結核病患者作為本次研究的對象。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器 本研究中使用的檢測儀器和試劑包括堿性復紅染色試劑盒、金胺- 羅丹明染色試劑盒、熒光顯微鏡、結核熒光染色閱片機、生物安全柜等。

1.2.2 檢測方法 為2480 例患者均分別采用堿性復紅染色法和金胺- 羅丹明染色法進行結核分枝桿菌痰涂片檢測，方法是：采集患者的痰標本，將每份痰標本分別制成兩張涂片。分別采用堿性復紅染色法和金胺- 羅丹明染色法對兩張涂片進行染色，然后對其進行鏡檢。在進行堿性復紅染色時，需要對涂片進行5 min 的加熱。在完成染色后，將涂片置于1000 倍顯微鏡下進行觀察。在進行金胺- 羅丹明染色時，需要對涂片進行15 ～20 min 的冷染。在完成染色后，將涂片置于400 倍顯微鏡下進行觀察。

1.3 觀察指標

比較2480 例患者進行上述兩種檢測時的陽性檢出率、檢測結果的陽性分級情況、讀片時間及用兩種檢測診斷其病情的靈敏度、特異度。

1.4 統計學處理

對本文中的所有數據均采用SPSS 20.0 統計學軟件進行分析，計量資料用均數± 標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2480 例患者進行兩種檢測時陽性檢出率的比較

這些患者進行堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的陽性檢出率為11.01%（273/2480），其進行金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的陽性檢出率為18.06%（448/2480）。這些患者進行金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的陽性檢出率高于其進行堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的陽性檢出率，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 這些患者進行兩種檢測時陽性檢出率的比較

2.2 用兩種檢測方法診斷這些患者病情靈敏度及特異度的比較

用金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷這些患者病情的特異度、靈敏度均高于用堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情的特異度、靈敏度，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2、表3、表4。

表2 這些患者堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測的結果與結核分枝桿菌痰培養檢測的結果（例）

表3 這些患者金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測的結果與結核分枝桿菌痰培養檢測的結果（例）

表4 用兩種檢測方法診斷這些患者病情靈敏度及特異度的比較（%）

2.3 這些患者進行兩種檢測時檢測結果陽性分級的比較

這些患者進行金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測與進行堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時檢測結果的陽性分級相比，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表5。

表5 這些患者進行兩種檢測時檢測結果陽性分級的比較[ 例（%）]

2.4 這些患者進行兩種檢測時讀片時間的比較

這些患者進行堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的讀片時間為（4.30±0.52）min，其進行金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的讀片時間為（2.08±0.28）min，二者相比差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

對于結核病患者，目前臨床上主要是采用結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情[3-4]。堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測是目前臨床上常用的結核分枝桿菌痰涂片檢測方法[5-6]。相關的研究表明，用金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷結核病患者病情的特異度、靈敏度和準確率均較高[7]。徐鳳美[8]的研究表明，與采用堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測相比，用金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷結核病患者病情的特異度、靈敏度均較高。這與本研究的結果相符。本研究的結果顯示，用金胺-羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷2480 例結核病患者病情的特異度、靈敏度均高于用堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情的特異度、靈敏度，差異有統計學意義（P＜0.05）。有研究指出，在進行結核分枝桿菌痰涂片檢測的過程中采用堿性復紅染色法對痰涂片進行染色存在操作繁瑣、讀片時間長等缺點。近年來，隨著痰涂片染色技術的不斷發展，熒光痰涂片染色技術在結核分枝桿菌痰涂片檢測中得到了廣泛的應用。有研究指出，金胺- 羅丹明染色法在結核分枝桿菌痰涂片檢測中的應用效果較好，具有鏡檢視野佳、讀片時間短等優點[9-10]。這與本研究的結果相符。本研究的結果顯示，2480 例患者進行金胺- 羅丹明染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的讀片時間短于其進行堿性復紅染色結核分枝桿菌痰涂片檢測時的讀片時間，差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，與堿性復紅染色法相比，金胺-羅丹明染色法在結核分枝桿菌痰涂片檢測中的應用效果較好。此法值得在臨床上推廣應用。