辣木的化學成分研究

劉長倩　高巍　楊柳　胡江苗

摘要[目的]研究辣木Moringa oleifera Lam.的化學成分。[方法]采用硅膠柱色譜、Sephadex LH20凝膠柱色譜、反相硅膠色譜等柱層析方法進行分離純化，根據理化性質和譜學數據進行結構鑒定。[結果]從辣木莖葉95%乙醇提取物中分離得到11個單體化合物，分別鑒定為多萜醇（1）、植醇（2）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（3）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基辛基）酯（4）、杜葉醇（5）、N-苯乙基乙酰酸（6）、順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（7）、4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate（8）、甘油亞麻酸酯（9）、β-谷甾醇（10）、胡蘿卜苷（11）。[結論]化合物2、5、7為首次從辣木中分離得到。

關鍵詞 辣木；分離純化；結構鑒定；化學成分

中圖分類號 S792 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2016）05-142-03

Abstract[Objective]To study the chemical constituents of Moringa oleifera Lam..[Method]The chemical constituents were isolated and purified by silica gel column chromatography， SephadexLH20 gel column chromatography， reversed phase silica gelchromatography. The structure was identified according to physical and chemical properties and spectral data.[Result]Chemical investigation of the stems and leaves of M. oleiferaled to the isolation of eleven compounds， including polyprenol（1）， Phytol（2）， Bis（2ethylheptyl）phthalate（3）， Bis （2ethyloctyl） phthalate（4）， vomifoliol（5）， N（2phenylethyl）acetamide（6），3，4cis3，4dihydroxyβionone（7），4[4′OacetylαLrhamnosyloxy]benzyl]isothiocyanate（8），1Linolenoylglycerol（9），βsitosterol（10），daucosterol（11）.[Conclusion]The compounds 2， 5， 7are firstly isolated from M. oleifera.

Key words Moringa oleifera Lam.； Isolation and purification； Structure identification； Chemical constituents

辣木（Moringa oleifera Lam.）又名洋椿樹、鼓槌樹，為辣木科（Moringaceae）辣木屬（Moringa Adans.）植物，起源于印度西北部的喜馬拉雅山南麓，該科僅有1個屬，共14個種，其中已經栽培了M.oleifera、M.ovalifolia、M.peregrina和M.stenopetala等4個品種[1]。我國于20世紀60年代初開始在臺灣、海南、廣東、云南南部等廣大熱帶、亞熱帶地區引種辣木[2]。辣木為藥食兩用的植物，其樹葉、果莢不僅含有鈣、鉀和氨基酸等營養物質，且在印度和非洲國家常用于退熱、消炎、降壓、強心和抗菌等[3]。目前，國內外學者主要集中于辣木營養學方面的研究[4-6]，近年來關于辣木的藥用保健功能日益受到人們的重視[7]，而辣木的活性物質構成卻有待進一步研究，為了進一步探知該植物的生物活性成分，筆者利用溶劑萃取、柱色譜、LH20凝膠、重結晶等方法對辣木乙酸乙酯部分進行化學成分分離，并通過波譜和理化性質等方法對化合物結構進行鑒定，以期為辣木的開發利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料。辣木于2014年購自云南，經中國科學院昆明植物研究所胡江苗副研究員鑒定為辣木（Moringa oleifera Lam.）的干燥莖葉。柱色譜硅膠（200～300目）、薄層色譜硅膠、硅膠GF254；反相填充材料Rp8；Sephadex LH20凝膠。

1.1.2 主要儀器。Brucker Avance Ⅲ 600型核磁共振儀，Waters AutoSpec Premier P776三扇型雙聚焦磁質譜儀，Agllient 1100高效液相色譜儀，ZF20D暗箱式紫外分析儀。

1.1.3 主要試劑。所用試劑為色譜純和分析純，市售。

1.2 方法

1.2.1 樣品的提取。將辣木干燥莖葉9.5 kg粉碎后分別用70%丙酮、85%丙酮浸提各一次，再用95%乙醇回流提取3次，每次3 h，合并提取液2 L，過濾后加入等體積水飽和乙酸乙酯進行萃取，減壓濃縮回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯相1 kg；剩余液體再加入等體積水飽和正丁醇進行萃取，減壓濃縮回收正丁醇，得到正丁醇相130 g。

1.2.2 樣品的分離與鑒定。取乙酸乙酯相1 kg采用正相硅膠柱色譜分離。丙酮充分溶解后均勻吸附于1.3 kg（200～300目）規格正相硅膠中，經硅膠柱色譜（8 kg），以石油醚-丙酮（50∶1→0∶1）梯度洗脫，每2 L為一份收集，配合TLC檢識，合并相同部位，濃縮回收溶劑得到13個部分（Fr.1～Fr.13）。Fr.5經正相硅膠柱色譜，用不同濃度的石油醚-丙酮（40∶1、25∶1、15∶1、5∶1）洗脫，每100 mL為一份收集，配合TLC檢識，合并相同部位，得到4個部分（Fr.5.1～Fr.5.4），Fr.5.4進行正相硅膠柱色譜分離，以石油醚-丙酮（30∶1）洗脫，每100 mL為一份收集，得到化合物1、2。Fr.6經正相硅膠柱色譜，用不同濃度的石油醚-丙酮（30∶1、20∶1、1∶1）洗脫，每500 mL為一份收集，經TLC檢識，合并斑點相似的部分，濃縮回收溶劑得到5個部分（Fr.6.1～Fr.6.5），Fr.6.1經重結晶所得物質通過TLC檢識與β谷甾醇標準品對比，得化合物10；Fr.6.4經正相硅膠柱色譜，三氯甲烷-甲醇（15∶1→0∶1）梯度洗脫，再用Sephadex LH20（1.8 cm×150 cm）凝膠柱色譜，采用三氯甲烷-甲醇（1∶1）系統洗脫，得到化合物3。Fr.8經過中低壓-MCI柱分離，以不同濃度的甲醇-水（30∶70、50∶50、70∶30、90∶10、100∶0）洗脫，得到7個部分（Fr.8.1～Fr.8.7），Fr.8.1經過Sephadex LH20（1.8 cm×150 cm）凝膠柱色譜和正相硅膠柱色譜分離，得到化合物4、11；Fr.8.2以Rp8反相柱色譜，甲醇-水（30∶100→100∶0）梯度洗脫，分離得到5、6、7、8、9。

2 結果與分析

2.1 化合物1

白色粉末，分離得到4.2 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.44（1H，t，J= 6.8 Hz，H2）、5.13（11H，d，J=6.4 Hz，CH）、4.09（2H，d，J= 7.1 Hz，H1）、2.09（40H，m，CH2）、1.75（3H，s，H20）、1.68（21H，m，CH3）、1.61（12H，CH3）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為139.7（C3）、136.0、135.3、135.2、135.2、135.1、135.0、134.8、131.2、125.0、125.0、124.9、124.9、124.5、124.5、124.4、124.2、124.2、124.1、58.9（CH2OH）、39.7、32.2、32.2、32.1、31.9、29.7、26.7、26.6、26.6、26.4、26.3、26.3、25.7、23.4、23.4、23.3、17.6、16.0、16.0。以上波譜數據與文獻[8]基本一致，故鑒定化合物1為多萜醇（Polyprenol）。

2.2 化合物2

無色油狀物，分離得到3.3 mg；1HNMR（600 MHz，CD3COCD3）δ分別為5.34（1H，t，J= 6.5 Hz，H2）、4.05（2H，t，J=6.2 Hz，H1）、3.36（1H，t，J=5.4 Hz，OH1）、2.04（2H，m，H4）、1.61（3H，s，H17）、1.52（1H，m，H15）、1.42（5H，m，H5，6a，7，11）、1.28（8H，m，H6b，8a，9，10a，12a，13）、1.15（2H，m，H14）、1.08（3H，m，H8b，10b，12b）、0.86（6H，d，J=6.6 Hz，H16，20）、0.85（6H，d，J=6.6 Hz，H18，19）；13CNMR（150 MHz，CD3COCD3）δ分別為137.5（C3）、126.0（C2）、59.1（C1）、40.5（C4）、40.1（C14）、38.1（C8）、38.1（C12）、38.0（C10）、37.3（C6）、33.5（C11）、33.4（C7）、28.6（C15）、25.9（C5）、25.5（C13）、25.1（C9）、23.0（C20）、22.9（C16）、20.1（C19）、20.0（C18）。以上波譜數據與文獻[9]基本一致，故鑒定化合物2為植醇（Phytol）。

2.3 化合物3

黃色油狀物，分離得到3.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.71（2H，dd，J=5.5，3.4 Hz，H3，6）、7.53（2H，dd，J=5.5，3.3 Hz，H4，5）、4.21（4H，m，H1′，1″）、1.70（2H，m，H2′，2″）、1.56（4H，m，H6′，6″）、1.42（8H，m，H3′，3″，8′，8″）、1.31（8H，m，H4′，4″，5′，5″）、0.93（6H，t，J=7.5 Hz，H9′，9″）、0.90（6H，t，J=7.5 Hz，H7′，7″）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為167.8（C=O）、132.4（C1，2）、130.9（C3，6）、128.8（C4，5）、68.2（C1′，1″）、38.7（C2′，2″）、30.4（C3′，3″）、29.7（C4′，4″）、28.9（C5′，5″）、23.7（C6′，6″）、23.0（C8，8″）、14.0（C7′，7″）、11.0（C9′，9″）。以上波譜數據與文獻[10]基本一致，故鑒定化合物3為鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（Bis（2ethylheptyl）phthalate）。

2.4 化合物4

黃色油狀物，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.71（2H，dd，J=5.5，3.4 Hz，H3，6）、7.53（2H，dd，J=5.5，3.3 Hz，H4，5）、4.21（4H，m，H1′，1″）、1.70（2H，m，H2′，2″）、1.56（4H，m，H6′，6″）、1.42（8H，m，H3′，3″，8′，8″）、1.31（8H，m，H4′，4″，5′，5″）、0.93（6H，t，J=7.5 Hz，H9′，9″）、0.90（6H，t，J=7.5 Hz，H7′，7″）；13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ分別為167.8（C1′）、132.4（C1，6）、130.9（C2，5）、128.8（C4，5）、68.2（C3′，3″）、38.7（C4′，4″）、30.5（C5′，5″）、30.3（C6′，6″）、29.7（C7′，7″）、28.9（C8′，8″）、23.7（C9′，9″）、23.0（C11′，11″）、14.0（C10′，10″）、11.0（C12′，12″）。以上波譜數據與文獻[11]基本一致，故鑒定化合物4為鄰苯二甲酸-雙（2乙基辛基）酯（Bis（2ethyloctyl）phthalate）。

2.5 化合物5

白色固體，分離得到3.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.90（1H，d，J=10.5 Hz，H1′）、5.83（1H，dd，J=5.3 Hz，H2′）、5.80（1H，s，H2）、4.41（1H，dq，H3′）、2.45（1H，d，J= 17 Hz，H6α）、2.43（1H，d，J=17 Hz，H6β）、1.89（3H，s，CH3）、1.30（3H，d，J=6.3 Hz，H4′）、1.09（1H，s，Meα）、1.01（3H，s，Meβ）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為197.8（C1）、162.5（C3）、135.6（C2′）、128.9（C1′）、79.0（C4）、68.0（C3′）、49.6（C6）、41.2（C5）、24.0（C4′）、23.7[MeβC（5）]、22.8[MeαC（5）]、18.8[MeC（3）]。以上波譜數據與文獻[12]基本一致，故鑒定化合物5為杜葉醇（vomifoliol）。

2.6 化合物6

白色粉末，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.35（2H，t，J= 7.5 Hz，H3″，H5″）、7.28（1H，t，J=11.6 Hz，H4″）、7.23（2H，d，J=7.3 Hz，H2″，H6″）、3.52（2H，t，J=6.7 Hz，H1′）、2.82（2H，dt，J=6.9 Hz，H2′）、1.94（3H，s，H2）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為170.1（C1）、138.3（C1″）、128.8（C3″，5″）、128.7（C2″，6″）、126.6（C4″）、40.6（C2）、35.6（C1′）。以上波譜數據與文獻[13]基本一致，故鑒定化合物6為N-苯乙基乙酰酸（N（2phenylethyl）acetamide）。

2.7 化合物7

白色粉末，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.17（1H，d，J=16.0，H7）、6.15（1H，d，J=16.0，H8）、3.98（1H，brd，J=16.0，H4）、3.91（1H，ddd，J=16.0，H3）、2.33（3H，s，J=16.0，H10）、1.90（3H，d，J= 16.0，H13）、1.77（1H，d，J=16.0，Meα）、1.66（1H，ddd，J= 16.0，Meβ）、1.12（3H，s，J=16.0，H12）、1.09（3H，s，J=16.0，H11）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為198.2（C9）、141.9（C7）、140.3（C6）、133.6（C8）、131.0（C5）、71.2（C4）、66.4（C3）、41.0（C2）、29.8（C12）、27.5（C11）、19.8（C13）。以上波譜數據與文獻[14]基本一致，故鑒定化合物7為順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（3，4cis3，4dihydroxyβionone）。

2.8 化合物8

無色油狀，分離得到4.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為7.23（2H，d，J=8.3 Hz，H3，5）、7.03（2H，dd，J=8.4 Hz，H2，6）、5.55（1H，s，H1′）、4.97（2H，s，H7）、4.85（1H，t，J=9.6 Hz，H4′）、4.15（1H，s，H2′）、4.10（1H，m，H3′）、3.88（1H，qd，J=6.8 Hz，H5′）、2.15（3H，s，CH3C=O）、1.19（3H，t，J=6.2 Hz，H6′）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為172.4（C=O）、155.4（C1）、132.5（C4）、131.1（N=C=S）、128.9（C3，C5）、116.3（C2，C6）、91.7（C1′）、75.6（C4′）、70.6（C2′）、70.2（C3′）、44.5（C7）、21.1（C=O）、17.5（C6′）。以上波譜數據與文獻[15]基本一致，故鑒定化合物8為4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate。

2.9 化合物9

無色油狀，分離得到2.0 mg；1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為5.38（6H，m，J=16.4 Hz，H9′，10′，12′，13′，15′，16′）、4.21（2H，m，J=8.1、4.1 Hz，H1）、3.94（1H，m，H2）、3.61（2H，m，J=11.4，5.8 Hz，H3）、2.79（4H，m，J=21.7 Hz，H11′，14′）、2.36（2H，t，J=7.6 Hz，H2′）、2.07（4H，m，H8′，17′）、1.63（2H，m，J=6.8 Hz，H3′）、1.31（8H，m，J=2.5 Hz，H4′，5′，6′，7′）、0.98（3H，t，J=9.2、5.8 Hz，H18′）；13CNMR（600 MHz，CDCl3）δ分別為174.3（C1′）、129.5（C9′，10′，12′，13′，15′，16′）、70.2（C2）、65.1（C3）、63.3（C2）、29.5（C2′、C3′、C4′、C5′、C6′、C7′、C8′、C11′、C14′）、20.5（C17′）、14.3（C18′）。以上波譜數據與文獻[16]基本一致，故鑒定化合物9為甘油亞麻酸酯（1Linolenoylglycerol）。

2.10 化合物10

白色針晶，分離得到15.0 mg。用1%硫酸-乙醇顯色顯紫色，與β-谷甾醇標準品顯色行為及比移值（Rf）值一致，對照氫譜數據一致，故鑒定化合物10為β-谷甾醇。

2.11 化合物11

白色粉末，分離得到12.0 mg。與胡蘿卜苷標準品共薄層層析，顯色行為及比移值（Rf）一致，對照氫譜數據一致，故鑒定化合物11為胡蘿卜苷。

3 結論

該試驗利用溶劑萃取、柱色譜、LH20凝膠、重結晶等方法對辣木乙酸乙酯部分進行化學成分分離，并通過波譜和理化性質等方法對化合物結構進行鑒定。結果表明，從辣木莖葉95%乙醇提取物中分離得到11個單體化合物，分別鑒定為多萜醇（1）、植醇（2）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基庚基）酯（3）、鄰苯二甲酸-雙（2-乙基辛基）酯（4）、杜葉醇（5）、N苯乙基乙酰酸（6）、順-3，4-二羥基-β-紫羅蘭酮（7）、4[（4′OacetylαLrhamnosyloxy）benzyl]isothiocyanate（8）、甘油亞麻酸酯（9）、β谷甾醇（10）、胡蘿卜苷（11），且化合物2、5、7為首次從辣木中分離得到。

參考文獻

[1]劉昌芬，李國華.辣木的研究現狀及其開發前景[J].云南熱作科技，2002，25（3）：20-24.

[2]劉子記，孫繼華，劉昭華，等.特色植物辣木的應用價值及發展前景分析[J].熱帶作物學報，2014，35（9）：1871-1878.

[3]林玲，何舒瀾.辣木的研究進展[J].海峽藥學，2013，25（11）：60-62.

[4]劉昌芬，李國華.辣木的營養價值[J].熱帶農業科技，2004，27（1）：4-7.

[5]RAJANGGAM J，AZAHAKIA MANAVALAN R S. The situation of Moringa production and utilization in South India[J].India technology，2000，4：189.

[6]ANWAR F，LATIF S，ASHRAF M，et al.Moringa oleifera：A food plant with multiple medicinal uses[J].Phytother Res，2007，21（1）：17-25.

[7]馮光恒，徐興才，江功武，等.辣木綜合利用研究綜述[J].安徽農業科學，2015（18）：8-10，13.

[8]DEL FIERRO R S，MAQUILANG Q M，SANJORJO R A S，et al.Secondary metabolites from Cinnamomum cebuense[J].J Med Plants Res，2012，6（11）：2146-2149.

[9]蘇華，朱校斌，袁兆慧，等.瘤狀軟骨凹頂藻化學成分研究[J].海洋科學，2009（5）：33-35.

[10]鄭曉珂，董三麗，馮衛生.淺裂鱗毛蕨地上部分化學成分研究[J].天然產物研究與開發，2006，17（4）：434-436.

[11]SALEEM M，NAZIR M，AKHTAR N，et al.New phthalates from Phyllanthus muellerianus（Euphorbiaceae）[J].Journal of Asian natural products research，2009，11（11）：974-977.

[12]SIDDIQUI B S，NADEEM KARDAR M，TARIQ ALI S，et al.Two new and a known compound from Lawsonia inermis[J].Helvetica chimica acta，2003，86：2164-2169.

[13]劉新利，李瑤瑤，許曉坤，等.黏球菌189B05的次級代謝產物研究[J].中國藥學雜志，2012，47（23）：1883-1885.

[14]陸瑤，李志宏，馬林，等.栽培尼泊爾菊三七化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2014，39（19）：3777-3781.

[15] FAIZI S，SIDDIQUI B S，SALEEM R，et al.Isolation and structure elucidation of new nitrile and mustard oil glycosidesfrom Moringa oleifera and their effect on blood pressure[J].J Nat Pro，1994，57（9）：1256.

[16]CHOI Y H，KIM J S，SEO J H，et al.Chemical constituents of Brassica campestris ssp pekinensis[J].Kor J Pharmacogn，2004，35（3）：255-258.