血清C1q檢測(cè)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性判斷及狼瘡腎炎診斷中的價(jià)值

王恝歆，趙志丹，鐘白云，謝婷彥，張秋煥，馮斯斯，鄧輝

（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院 檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410008）

血清C1q檢測(cè)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性判斷及狼瘡腎炎診斷中的價(jià)值

王恝歆，趙志丹，鐘白云，謝婷彥，張秋煥，馮斯斯，鄧輝

（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院 檢驗(yàn)科，湖南 長(zhǎng)沙 410008）

目的探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者血清C1q水平變化對(duì)SLE疾病活動(dòng)性判斷及狼瘡腎炎（LN）的診斷意義。方法150例研究對(duì)象，根據(jù)臨床資料，分為SLE組（60例）、其他風(fēng)濕疾病組（30例）、其他腎臟疾病組（30例）及正常對(duì)照組（30例）4組，其中SLE組包括33例LN患者和27例非LN患者。采用免疫透射比濁法測(cè)定各組血清C1q水平，并與其他SLE活動(dòng)性指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果①SLE組的血清C1q水平低于其他風(fēng)濕性疾病組、其他腎臟疾病組及正常對(duì)照組（F=41.428，P=0.000），其中LN組的血清C1q水平低于非LN組（t=-4.262，P=0.000），SLE病情活動(dòng)期患者C1q水平低于病情穩(wěn)定期患者（t=-5.159，P=0.000）。②在SLE組中C1q診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%。工作特征曲線的曲線下面積為0.717。③相關(guān)分析表明，SLE患者血清C1q水平與C3、C4呈正相關(guān)，與SLE疾病活動(dòng)指數(shù)積分呈負(fù)相關(guān)（r=0.593、0.448和-0.589，P=0.000）。結(jié)論血清C1q不僅有助于SLE及LN的診斷，且對(duì)SLE的病情評(píng)估及療效判斷具有重要參考價(jià)值。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡；狼瘡腎炎；補(bǔ)體C1q；免疫透射比濁法

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種自身免疫介導(dǎo)的彌漫性結(jié)締組織病，臨床表現(xiàn)復(fù)雜，病情反復(fù)，其病程中產(chǎn)生多種自身抗體并激活補(bǔ)體，導(dǎo)致多器官及系統(tǒng)的損傷。狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）是SLE最常見的并發(fā)癥及最常見的死亡原因之一［1］，是影響SLE預(yù)后的重要因素。LN的早期診斷及病理類型、是否及早治療、是否及時(shí)控制病情活動(dòng)等直接影響LN的預(yù)后。腎穿刺是確診LN病理類型的金標(biāo)準(zhǔn)，但作為有創(chuàng)性檢查，操作具有風(fēng)險(xiǎn)。目前，臨床常用的血清標(biāo)志物在SLE特異性腎臟受累中無明確意義。C1q是補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑起始成分C1的一個(gè)亞基，在補(bǔ)體經(jīng)典途徑中發(fā)揮識(shí)別及活化作用［2］。近年來國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，血清C1q水平的改變與SLE腎臟損害及病情活動(dòng)密切相關(guān)［3-4］。本研究觀察SLE及LN患者的血清C1q水平變化，分析C1q與SLE、LN和SLE病情活動(dòng)的相關(guān)性，旨在探討C1q在LN診斷及SLE病情活動(dòng)監(jiān)測(cè)及指導(dǎo)治療中的作用。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象

本研究納入研究對(duì)象150例，分為SLE組、其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對(duì)照組4組。SLE組為2015年2月-2015年5月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院風(fēng)濕科住院的患者，其中女性50例，男性10例；年齡（35±15）歲。SLE的診斷符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)1997年修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。SLE患者按照SLE疾病活動(dòng)指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）進(jìn)行病情評(píng)估，以SLEDAI積分≥10分［6］作為判定疾病活動(dòng)的標(biāo)準(zhǔn)，其中SLE病情穩(wěn)定患者25例，病情活動(dòng)患者35例。SLE患者符合以下之一并排除其他原因診斷為L(zhǎng)N：①24 h尿蛋白定量＞0.5 g/L；②尿有細(xì)胞管型或顆粒管型；③腎穿刺活檢證實(shí)［7］。其中LN患者33例，非LN患者27例。其他風(fēng)濕疾病組為本院風(fēng)濕科住院的患者，女性23例，男性7例；年齡（39±14）歲。其中硬皮病4例，原發(fā)干燥綜合征3例，強(qiáng)直性脊柱炎4例，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎9例，混合性結(jié)締組織病2例，白塞病2例，韋格納肉芽腫3例，未分化結(jié)締組織病3例，均符合各疾病相關(guān)的國(guó)際診斷或分類標(biāo)準(zhǔn)。其他腎臟疾病組為本院腎臟內(nèi)科住院的患者，女性22例，男性8例；年齡（36±12）歲，包括慢性腎小球腎炎10例，原發(fā)性腎病綜合征6例，糖尿病腎病7例，IgA腎病5例，紫癜性腎炎2例，均排除狼瘡性腎損害。正常對(duì)照組30例，女性25例，男性5例；年齡（36±11）歲，均來自本院體檢健康人員。各組性別、年齡構(gòu)成比比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 1.667，P=0.644；F=0.620，P=0.603）。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

抽取待測(cè)者清晨空腹靜脈血2～3 ml，3 500 r/min離心5 min，收集血清，置于-20℃冰箱快速冷凍備用。采用免疫透射比濁法檢測(cè)血清C1q濃度，實(shí)驗(yàn)儀器為Beckman AU680全自動(dòng)生化分析儀，C1q測(cè)定試劑盒購(gòu)自上海北加生化試劑有限公司，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作；采用免疫速率散射比濁法檢測(cè)血清C3、C4和C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP），試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Beckman Coulter有限公司；同時(shí)抽取待測(cè)者外周靜脈血2～3 ml，經(jīng)枸櫞酸鈉抗凝后及時(shí)進(jìn)行改良魏氏法紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）檢測(cè)。血清C1q濃度正常范圍在181.80～285.25 mg/L，以181.80 mg/L為正常下限，測(cè)定結(jié)果低于該值為本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的陽(yáng)性結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組間均數(shù)比較用方差分析、t檢驗(yàn)及配對(duì)t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)關(guān)系用Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組人群血清C1q水平

SLE組、其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對(duì)照組的血清C1q水平比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=41.428，P=0.000）。再通過LSD檢驗(yàn)法進(jìn)行兩兩比較，其中SLE組和其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對(duì)照組血清C1q水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000），SLE患者的血清C1q水平低于其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對(duì)照組。見表1。

2.2各組人群血清C1q陽(yáng)性率

SLE組、其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對(duì)照組的C1q陽(yáng)性檢出率分別為55%（33/60）、6.7%（2/30）、3.3%（1/30）和0.0%（0/30），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=53.052，P=0.000）。再通過兩兩比較，SLE組與其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組、正常對(duì)照組的C1q陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=19.660、22.713和26.053，P=0.000），SLE組的C1q陽(yáng)性檢出率高于其他風(fēng)濕疾病組、其他腎臟疾病組及正常對(duì)照組。見表2。

2.3血清C1q水平與LN的診斷

在SLE組中，LN患者與非LN患者的血清C1q水平分別為（168.78±33.37）和（201.40±44.96）mg/L，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-4.262，P=0.000），LN患者的血清C1q水平低于非LN的SLE患者。LN組與非LN組患者的C1q陽(yáng)性檢出率分別為66.7%（22/33）和40.7%（11/27），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.033，P=0.045），LN組的C1q陽(yáng)性檢出率高于非LN組。C1q診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%。工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.717，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.067，其95%置信區(qū)間為（0.584，0.849）。見附圖。

2.4血清C1q水平與SLE疾病活動(dòng)性

在SLE組中，活動(dòng)期與穩(wěn)定期患者血清C1q、C3、C4水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-5.159、-4.421和-3.883，P=0.000），活動(dòng)期患者血清C1q、C3、C4水平均低于穩(wěn)定期患者。活動(dòng)期與穩(wěn)定期患者血清CRP、ESR水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.006和2.062，P=0.004和0.044），活動(dòng)期患者較穩(wěn)定期患者升高。相關(guān)性分析顯示，SLE患者血清C1q與C3、C4呈正相關(guān)（r=0.593和0.448，P=0.000），與SLEDAI積分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.589，P= 0.000），而與CRP、ESR無相關(guān)性。見表3。

表1　各組血清C1q水平比較

表2　各組血清C1q陽(yáng)性率比較

附圖　ROC曲線

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活動(dòng)指標(biāo)比較 （±s）

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活動(dòng)指標(biāo)比較 （±s）

組別ESR/（mm/h）病情活動(dòng)組（n=35）　163.15±30.62　431.17±172.56　87.85±65.17　6.62±4.00　34.51±14.62病情穩(wěn)定組（n=25）　211.88±39.51　688.89±256.37　161.17±76.68　3.84±3.17　25.36±17.19 t值　-5.159　-4.421　-3.883　3.006　2.062 P值　0.000　0.000　0.000　0.004　0.044 C1q/（mg/L）C3/（mg/L）C4/（mg/L）CRP/（mg/L）

2.5活動(dòng)期SLE患者治療前后血清C1q水平變化

本研究隨訪10例入院時(shí)病情處于活動(dòng)期的SLE患者（SLEDAI積分≥10），治療1個(gè)月后病情均明顯緩解，患者的血清C1q、C3、C4水平及SLEDAI積分較1個(gè)月前比較，經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。見表4。

表4　活動(dòng)期SLE患者治療1個(gè)月后各項(xiàng)指標(biāo)比較（n=10，±s）

表4　活動(dòng)期SLE患者治療1個(gè)月后各項(xiàng)指標(biāo)比較（n=10，±s）

組別SLEDAI積分治療前　147.59±19.23 371.40±153.46　63.35±40.65　15.60±2.46治療后　190.37±13.87　613.80±75.33　152.79±48.43 10.70±2.20 t值　-6.738　-6.643　-6.278　11.308 P值　0.000　0.000　0.000　0.000 C1q濃度/ （mg/L）C3濃度/ （mg/L）C4濃度/ （mg/L）

3　討論

SLE是一種累及多系統(tǒng)、多器官、臨床表現(xiàn)復(fù)雜、病程遷延反復(fù)的自身免疫性疾病，多種自身抗體、循環(huán)免疫復(fù)合物的產(chǎn)生及補(bǔ)體系統(tǒng)的異常是其主要特征。LN是SLE累及腎臟所導(dǎo)致的免疫復(fù)合物介導(dǎo)性腎炎，是SLE最主要的并發(fā)癥和死亡原因之一［8］。5%～20%的LN患者在10年內(nèi)可進(jìn)展為終末期腎臟病（end-stage renal disease，ESRD）［9］。腎臟的受累情況直接影響SLE患者的預(yù)后。因此，早期診斷出SLE患者是否合并有腎臟病變，了解其是否處于活動(dòng)期及其活動(dòng)程度，對(duì)于SLE患者的治療指導(dǎo)和預(yù)后判斷具有重要意義。

C1q是分子量為460 kD的糖蛋白，共由6個(gè)亞單位組成的，每個(gè)亞單位中包含有N端的膠原樣序列及C端的球狀結(jié)構(gòu)［10］。C1q作為補(bǔ)體經(jīng)典途徑起始成分C1的亞基，能夠結(jié)合多種配體，具有激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑、清除病原體、免疫復(fù)合物、凋亡細(xì)胞及調(diào)理炎癥反應(yīng)等多種功能［11］。早期大量臨床觀察和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均證實(shí)補(bǔ)體C1q的遺傳性缺陷是SLE的最強(qiáng)易感因素之一［12-13］。近來研究表明，C1q在SLE，尤其是LN的發(fā)病過程中起重要作用［2，14-15］。SLE患者中由于大量補(bǔ)體的異常激活，導(dǎo)致C1q的抗原決定簇膠原樣區(qū)暴露，從而形成相應(yīng)的IgG型自身抗體即C1qAb［16］。當(dāng)血清中C1qAb與C1q的膠原樣區(qū)結(jié)合，形成C1q-C1q抗體復(fù)合物，促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致組織損傷。同時(shí)C1q的消耗性減少影響補(bǔ)體系統(tǒng)的正常激活，使免疫復(fù)合物及凋亡小體不能有效地轉(zhuǎn)運(yùn)清除，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生更多的抗體，出現(xiàn)疾病活動(dòng)［17］。另外C1q不僅可以與C1q抗體作用，其還可作為主要的靶抗原與一系列的抗-DNA抗體交叉作用，形成免疫復(fù)合物沉積于腎臟，加重SLE患者的腎臟損害［18］。

雖然前期研究已肯定C1q與SLE疾病密切相關(guān)，但將C1q作為檢測(cè)指標(biāo)輔助臨床SLE、LN診斷與疾病活動(dòng)評(píng)估的研究國(guó)內(nèi)報(bào)道較少。本研究檢測(cè)各組疾病患者血清C1q水平，比較發(fā)現(xiàn)，SLE患者的血清C1q濃度低于其他風(fēng)濕疾病患者、其他腎臟疾病患者和正常人群，與TAN［3］、周濱等［4］的文獻(xiàn)報(bào)道一致。同時(shí)SLE組中LN患者的血清C1q水平低于非LN患者，進(jìn)一步分析，C1q在SLE患者中診斷LN 的ROC曲線下面積為0.717，其單項(xiàng)診斷LN的敏感性為66.7%，特異性為59.3%，表明血清C1q水平與SLE患者的腎臟損害有相關(guān)性，其可作為診斷LN較好的血清指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，病情活動(dòng)期患者C1q水平低于病情穩(wěn)定期患者。血清C1q與C3、C4及SLEDAI積分的相關(guān)系數(shù)（r=0.593、0.448和-0.589，P＜0.01。進(jìn)一步證實(shí)C1q與SLE疾病活動(dòng)相關(guān)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血清C1q水平可有效反應(yīng)SLE患者疾病的活動(dòng)狀況。另外本研究還隨訪10例住院SLE患者，其在入院時(shí)處于病情活動(dòng)期，伴有發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛、腎損害等相關(guān)臨床癥狀，隨著治療的有效進(jìn)展，1個(gè)月后病情得到明顯緩解，復(fù)查血清C1q均值高于治療前水平，同時(shí)患者SLEDAI評(píng)分、C3、C4水平等指標(biāo)在治療前后也出現(xiàn)變化，與患者臨床癥狀好轉(zhuǎn)相符合。其可能原因是當(dāng)體內(nèi)炎癥免疫反應(yīng)趨于緩解時(shí)，免疫復(fù)合物形成減少，C1q濃度回升。

綜上所述，血清C1q水平與SLE患者及其腎臟損害相關(guān)，對(duì)SLE患者進(jìn)行血清C1q濃度測(cè)定，有助于SLE及LN的診斷。同時(shí)在SLE患者中，病情活動(dòng)期患者血清C1q濃度降低，隨著治療的有效進(jìn)行，病情緩解，血清C1q水平回升，所以監(jiān)測(cè)血清C1q水平的變化，可以為SLE患者病情活動(dòng)及療效評(píng)估提供可靠依據(jù)。

［1］李圣楠，黃慈波.系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷治療進(jìn)展［J］.臨床藥物治療雜志，2010，8（1）：6-10.

［2］POTLUKOVA E，KRALIKOVA P.Complement component C1q and anti-C1q antibodies in theory and in clinical practice［J］. Scandinavian Journal of Immunology，2008，67（5）：423-430.

［3］TAN Y，SONG D，WU L H，et al.Serum levels and renal deposition of C1q complement component and its antibodies reflect disease activity of lupus nephritis［J］.BMC Nephrol，2013，14：63.

［4］周濱，張奉春，董怡.補(bǔ)體C1q及抗C1q抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡腎炎相關(guān)性的研究［J］.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2005，12：725-728.

［5］HOCHBERG M C.Updating the American college of rheumatologyrevised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus［J］.Arthritis Rheum，1997，40（9）：1725.

［6］GLADMAN D D，IBANEZ D，UROWITZ M B.Systemic lupus erythematosus disease activity index 2000［J］.J Rheumatol，2002，29（2）：288-291.

［7］劉軍強(qiáng).系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎臨床與病理分析［J］.醫(yī)藥論壇雜志，2011，32（13）：114-115.

［8］LIU C C，KAO A H，MANZI S，et al.Biomarkers in systemic lupus erythematosus：challenges and prospects for the future［J］. Ther Adv Musculoskelet Dis，2013，5（4）：210-233.

［9］姜惠民.狼瘡性腎炎的治療新進(jìn)展［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2014，12（9）：31.

［10］KISHOREA U，REID K B M.C1q：structure，function，and receptors［J］.Immunopharmacology，2000，49（12）：159-170.

［11］劉閣，逄越，劉欣，等.C1q蛋白家族的結(jié)構(gòu)、分布、分類和功能［J］.遺傳，2013，9：1072-1080.

［12］陳竹，汪國(guó)生.補(bǔ)體異常與系統(tǒng)性紅斑狼瘡 ［J］.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2005，9（9）：567-569.

［13］LEFFLER J，BENGTSSON A A，BLOM A M.The complement systeminsystemiclupuserythematosus：anupdate［J］.Ann Rheum Dis，2014，73（9）：1601-1606.

［14］WALPORT M J，DAVIES K A，BOTTO M.C1q and systemic lupus erythematosus［J］.Immunobiology，1998，199（2）：265-285.

［15］ZHANG C Q，REN L，GAO F，et al.Anti-C1q antibodies are associatedwithsystemic lupuserythematosusdiseaseactivity and lupus nephritis in northeast of China［J］.Clin Rhenumatol，2011，30（7）：967-973.

［16］MONOVA D，MONOV S，ROSENOVA K，et al.Autoantibodies against Clq：view on association between systemic lupus erythematosus disease manifestation and Clq autoantibodies［J］.Ann Rheum Dis，2002，61（6）：563-564.

［17］羅靜，郭琿，王彩虹，等.抗C1q抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)及狼瘡腎炎的關(guān)系 ［J］.中國(guó)臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2011，5（2）：102-108.

［18］FRANCHIN G，SON M，KIM S J，et al.Anti-DNA antibodies cross-react with C1q［J］.J Autoimmun，2013，44：34-39.

（童穎丹 編輯）

Significance of detecting serum C1q level in diagnosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis

Jia-xin Wang，Zhi-dan Zhao，Bai-yun Zhong，Ting-yan Xie，Qiu-huan Zhang，Si-si Feng，Hui Deng
（Department of Clinical Laboratory，Xiangya Hospital，Central South University，Changsha，Hunan 410008，China）

Objective To explore the serum level of complement 1q（C1q）in systemic lupus erythematosus patients and to analyze its significance in diagnosis and prognosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis（LN）.Methods According to the clinical data，150 cases of subjects were divided into four groups.There were 60 cases in SLE group，30 cases in other rheumatic disease group，30 cases in other kidney disease group and 30 cases in normal control group.The SLE group contained 33 cases of LN patients and 27 cases of non-LN patients.The serum level of C1q was measured by immune transmission turbidimetry.The correlations between the serum level of C1q and other disease activity parameters such as SLEDAI scores，C3 and C4 levels were analyzed.Results The serum level of C1q in the SLE group was significantly lower than that of the other rheumatic disease group，the other kidney disease group and the normal control group（F=41.428，P=0.000）.The LN patients showed a significantly lower level of serum C1q than the non-LN patients（t=-4.262，P=0.000）.The SLE patients in active stage showed a significantly lower level of serum C1q than the stable patients（t=-5.159，P=0.000）.The sensitivity and specificity of C1q to diagnose LN in the SLE group were 66.7%and 59.3%respectively.The area under ROC curve was 0.717.Correlation analysis showed that the serum level of C1q was positively correlated with C3 and C4 concentrations but negatively correlated with the SLEDAI scores（r=0.593，0.448 and-0.589 respectively，andP= 0.000）.Conclusions C1q may not only contribute to the diagnosis of SLE and LN，but also reflect the disease activity and treatment effect.

systemic lupus erythematosus；lupus nephritis；complement 1q；immunity transmission turbidity

R593.241

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.09.011

1005-8982（2016）09-0054-05

2015-12-28

鐘白云，E-mail：zbycsu@hotmail.com