RhoA與胃癌的相關研究進展

石會勇　甄亞男　王斌　霍守俊　徐忠法

【摘要】 胃癌是我國高發的惡性腫瘤之一， 占全世界發病患者的40%左右， 年發病在20/10萬。目前就診的胃癌患者大部分為中晚期， 占70%以上， 5年生存率在10%左右， 患者死亡的主要原因為浸潤及轉移。對于晚期胃癌， 目前主要應用化療結合生物靶向治療等手段。但胃癌對于化療存在多藥耐藥， 使得針對胃癌的治療存在困難， 缺乏有效的治療手段。針對胃癌浸潤轉移及多藥耐藥的相關分子機制目前仍不甚明確。本文對RhoA與胃癌的相關研究進展展開一綜述。

【關鍵詞】 RhoA；胃癌；多藥耐藥

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.22.202

RhoA為Ras GTP酶超家族的成員之一， 通過其分子開關作用， 參與調節細胞的運動、粘附及細胞骨架重排， 是下游基因調節信號通路的重要組分， 在胃癌細胞的浸潤、轉移及多藥耐藥機制中發揮了重要作用。

1 RhoA的結構和功能

1. 1 RhoA的結構 RhoA是Ras超家族小GTP酶組分之一， 分子量21～25 kDa。以GTP結合的活性形式及GDP結合的失活形式存在， 起到細胞進程中轉導通路的分子開關作用。

1. 2 RhoA的功能 RhoA在人類癌癥中常過表達[1]。鳥嘌呤核苷交換因子（GEFs）促進GDP結合狀態轉換為GTP結合狀態， 而GTP酶激活蛋白（GAPs）強化內在的GTP酶活性， 從而使其失活。其靜息時， 與GDP結合滯留于胞質中， 呈無活性狀態。當受到細胞外刺激時， GDP轉變為GTP， RhoA獲得活性， 轉位到細胞膜上， 從而發揮細胞內信號轉導作用。RhoA活性及失活狀態可被GDP/GTP交換蛋白或GTP酶活化蛋白調節。研究發現RhoA活性增強可明顯促進腫瘤細胞生長， 這可能跟CyclinD1的表達因RhoA的過度激活而被促進有關， 提示胃癌的發生、發展與可能與RhoA過度激活有關[2]。

2 RhoA與胃癌

2. 1 RhoA與胃癌的侵襲和轉移 胃癌的侵襲和轉移是一個復雜的多步驟過程， 主要包括細胞粘附、基質降解及遠處侵襲3個環節。在胃癌組織中， RhoA的表達據報道與腫瘤發生、發展和浸潤轉移密切相關。RhoA在腫瘤形成過程中是過表達的， 有報道稱RhoA與胃癌的增殖及浸潤有關[3]。

RhoA活化后作用于下游效應蛋白Rho相關激酶（Rho associated kinase， ROCK）或mDia， 進而調節細胞骨架重組， 使腫瘤發生侵襲和轉移。此外， 活化的RhoA通過級聯反應激活MMP-2、cyclin D1、E-cadherin、uPAR等因子， 這些因子的活化與腫瘤細胞凋亡、增殖、粘附密切相關。研究顯示RhoA在胃癌中的表達明顯高于癌旁和正常胃黏膜， 并且其表達僅與胃癌患者的浸潤深度有關[4]。Xu等[5]的研究顯示Wnt5a可以通過PI3K/GSK3β/RhoA信號通路促進胃癌細胞的遷移。在胃癌標本TNM分期研究中， RHOA高表達者五年生存率為28%， 低表達者為62%。RhoA表達與胃癌分期、淋巴結轉移、組織學類型顯著相關。近年認為轉錄因子NF-KB和AP21的轉錄水平因RhoA的激活被促進， RhoA的激活還可以調節增強p27， p21， cyclinD1的活性， 導致細胞的增殖[6]。研究發現RhoA活性增強導致的p27， p21， cyclinD1的活性的增強可明顯促進胃癌細胞SGC7901細胞生長。腫瘤細胞的一個重要特點是細胞周期異常。研究發現胃癌細胞進入S期比例可因正顯性突變V14RhoA蛋白的表達明顯增大。

2. 2 RhoA與胃癌化療的多藥耐藥 化療耐藥是胃癌化療效果的主要障礙， 對于是否RhoA的表達影響了胃癌細胞對化療的反應值得研究。樊代明領銜的項目組對胃癌細胞MDR的分子機制進行了長期研究， 首次報道了RhoA參與胃癌MDR的調控。王旭青等[8]研究發現胃癌細胞SGC7901生長可明顯因RhoA活性增強而得到促進。引人注意的是：與對照細胞相比， 轉染V14RhoA的細胞可降低胃癌細胞對化療藥物的敏感性， 這一點提示不僅胃癌的發生有RhoA參與， 還可能參與胃癌多藥耐藥機制調控也有RhoA參與， 但需進一步研究其作用機理， 作者的研究顯示RhoA在胃癌細胞中的過表達導致了其對泰素及長春新堿的耐藥， 從而與不良預后有關。

RhoA調節細胞凋亡的確切機制還不清楚， 但其耐藥性針對化療藥物種類的不同而不同。為鑒定RhoA引起化療耐藥的確切靶點， 對于親本及RhoA轉染的細胞提取RNA進行cDNA微陣列分析。鑒定了許多轉錄的改變， 大部分與化療耐藥無明顯相關。但是， 抗氧化相關蛋白及NF-KB信號通路被認識。特別是超氧化物歧化酶基因的表達與RhoA表達相關。該研究顯示：RhoA表達受到干擾后不僅Bcl2家族分子被抑制， 并且激活了凋亡誘導因子及大量的caspase家族分子， 這表明腫瘤凋亡的趨勢可因胃癌細胞RhoA表受抑制明顯增強。也有研究顯示轉染顯性活性RhoA突變體的NIH3T3細胞， 或者過表達RhoA蛋白在血清饑餓條件下與對照組細胞相比， 細胞凋亡增加， 這也說明在腫瘤的凋亡調控機制中RhoA起著不可忽視的作用[8]。

抑癌基因是通過基因編碼的蛋白特異性使細胞接受負增長信號， 最總導致腫瘤細胞過度生長、增值受到抑制的基因。細胞會因為抑癌基缺失或者因失去活性而持續生長， 最后轉化成惡性細胞。部分抑癌基因可因RhoA的表達被抑制后表達明顯上調， 因此抑制RhoA的表達可以成為分子靶向治療腫瘤的新的可能， 并未其提供指導[9]。

EGFR是erbB家族的一員， 配體包括EGF及TGFα等。細胞的凋亡、增值及血管生成等是通過配體與受體結合后下游一系列信號轉導通路被激活實現的。EGFR異常表達或者高表達存在于很多腫瘤中。有研究表明[10]， EGFR信號轉導通路與腫瘤的耐藥有關。近期的一項研究結果提示：在胃癌患者中， 與癌旁組織相比EGFR的表達顯著升高。EGFR表達水平與其他臨床病理參數無關卻與胃癌遠處轉移顯著相關。胃癌患者因EGFR陽性生存時間短， 預后差。因此EGFR表達在預示胃癌的轉移、預后好壞中發揮舉足輕重的作用。早期EGFR分子靶向治療EGFR陽性或強陽性的患者很有可能非常有效。該項研究發現EGFR與TopoⅡ表達相關。

綜上所述， RhoA作為信號開關， 在胃癌的浸潤、轉移中起重要的作用。同時， 近期的研究表明RhoA表達與胃癌的多藥耐藥相關。對于RhoA的進一步研究， 探討其能否作為胃癌浸潤轉移及多藥耐藥的預測指標， 針對RhoA的靶向治療能否改善胃癌的多藥耐藥值得進一步研究。

參考文獻

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[10] 肖煒明；施瑞華， 丁巖冰， 等. 胃癌組織中EGFR和COX-2表達的意義及其相關性. 世界華人消化雜志， 2007， 15（2）：123-128.

[收稿日期：2016-03-21]