不同致傷原因對大鼠勃起功能障礙的影響*

吳　濤,李　敏,陳宗平,陳嬋娟,彭義娟,邱兆雨,梁國標,崔　偉,簡　毓,張　能,羅　旭,趙澤駒

(遵義醫學院附屬醫院泌尿外科，貴州遵義 563099)

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論著·基礎研究

不同致傷原因對大鼠勃起功能障礙的影響*

吳濤,李敏,陳宗平△,陳嬋娟,彭義娟,邱兆雨,梁國標,崔偉,簡毓,張能,羅旭,趙澤駒

(遵義醫學院附屬醫院泌尿外科，貴州遵義 563099)

目的探討不同組合切斷雄鼠勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌對勃起功能障礙(ED)的影響。方法根據切斷方式不同，將285只生殖期雄性Wistar大鼠分成單側切斷A1～A7組(勃起神經；勃起血管；坐骨海綿體肌；勃起神經和血管；神經和坐骨海綿體肌；勃起血管和坐骨海綿體肌；勃起神經、勃起血管和坐骨海綿體肌)；雙側切斷B1～B3組(勃起神經；勃起血管；坐骨海綿體肌)；一側勃起神經和對側勃起血管組(C1組)；一側勃起神經和對側坐骨海綿體肌組(C2組)；一側勃起血管和對側坐骨海綿體肌組(C3組)；假手術組(D組)，以上各組20只，健康對照組(E組，n=5)。育齡期未孕雌鼠285只，隨機與上述各組一一配對飼養。觀察配對雌鼠受孕情況(3個月)。結果A1～A4組死亡分別為4、2、3和2只，配對雌鼠受孕率100%；A5～A7組死亡分別為4、5和4只，配對雌鼠受孕率分別為88.9%、83.3%和94.1%；B1～B3、C1～C3組死亡分別為3、2、3、2、5和5只，配對雌鼠均未受孕；D組死亡2只，配對雌鼠受孕率100%；E組無死亡，配對雌鼠受孕率100%。結論不同組合切斷雄鼠同側勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌均不會導致永久性ED，不同組合切斷雄鼠雙側勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌均導致永久性ED。

勃起功能障礙；病因學；損傷；大鼠,Wistar

外傷性勃起功能障礙(erectile dysfunction，ED)是泌尿外科治療的難點，目前對器質性ED的病因考慮有勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌損傷。陰莖的勃起神經、血管及坐骨海綿體肌均為雙側性。單側和雙側性神經或血管損傷引起ED臨床上均有報導，但多數并未指明其單雙側性[1-6]，這些結果提示臨床上對ED的病因判斷仍然模糊，不夠精確。單側坐骨海綿體肌損傷不會導致永久性ED，而雙側損傷會導致永久性ED[7-9]。雙側勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌之間的不同組合方式的損傷對ED有何影響，目前未完全清楚。本研究通過對生殖期雄鼠的雙側勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌以不同組合方式切斷，術后與生殖期未孕雌鼠配對飼養。根據配對雌鼠受孕率間接判斷雄鼠勃起功能障礙，從而推斷勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌之間不同組合方式的損傷對導致勃起功能障礙的關系，為臨床診治外傷性勃起功能障礙病因提供依據。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗大鼠生殖期雄性 Wistar 大鼠285只，月齡4～6個月，體質量200～300 g，分組如下，A1：單側勃起神經切斷組； A2組：單側勃起血管切斷組； A3組：單側坐骨海綿體肌切斷組； A4組：單側勃起神經和血管切斷組； A5組：單側勃起神經和坐骨海綿體肌切斷組； A6組：單側勃起血管和坐骨海綿體肌切斷組； A7組：單側勃起神經、勃起血管和坐骨海綿體肌切斷組； B1組：雙側勃起神經切斷組； B2組：雙側勃起血管切斷組； B3組：雙側坐骨海綿體肌切斷組； C1組：一側勃起神經和對側勃起血管切斷組； C2組：一側勃起神經和對側坐骨海綿體肌切斷組； C3組：一側勃起血管和對側坐骨海綿體肌切斷組； D組：假手術組(以上各組20只)；E組：健康對照組 (5只)。育齡期未孕雌性大白鼠285只，月齡4～6個月，體質量200～300 g，隨機與上述各組一一配對飼養。

1.1.2試劑與器械麻醉劑：20%水合氯醛,采用腹腔內注射，劑量按0.1 mL/100 g。消毒劑：0.5%聚維酮碘。手術器械：輸精管分離鉗、眼科剪、線剪、持針器、手術刀各1把，皮鉗2把，鑷子2只，蚊鉗4把，小圓針及三角針，1號、4號絲線。

1.2方法與觀察指標將各手術組每只雄鼠分別稱質量及麻醉后，仰臥位固定于手術臺上， 按無菌操作原則手術，按不同分組要求，采用經腹腔切斷勃起神經、勃起血管，經會陰部切斷坐骨海綿體肌。D組僅模擬手術過程并不切斷勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌。術后腹腔內注射長效青霉素12.5萬單位/只預防感染。手術后1周將上述各組雄鼠各自單獨分開，并與未孕雌鼠一一配對飼養。E組不作手術處理，同期與未孕雌鼠一一配對飼養。觀察3個月，了解各組雄鼠死亡及配對雌鼠受孕情況。實驗結束后將鼠斷頸處死。

在建立大鼠神經、血管性ED模型時，顯露膀胱及膀胱頸，在膀胱的兩側后方可清晰看見陰莖的勃起血管神經束通過膀胱頸兩側出盆腔前行進入陰莖腳。根據手術要求，打開勃起神經血管束鞘，小心分離開勃起神經及勃起血管，予以切斷、結扎相應的勃起神經、血管，見圖1。

1：膀胱；2：勃起神經血管束；3：坐骨海綿體肌；4：陰莖。

圖1雄鼠勃起神經血管束解剖術中圖

1.3統計學處理采用SPSS16.0統計軟件進行統計學處理，計數資料用頻數表示，采用χ2檢驗，并進一步用確切概率法行兩兩比較，以P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　果

2.1雄鼠死亡情況A1組雄鼠死亡4只，分別死于術后8、12、24、36 h；A2組雄鼠死亡2只，分別死于術后12、16 h；A3組雄鼠死亡3只，分別死于術后12、16 h及術后5 d；A4組雄鼠死亡2只，分別死于術后12、18 h；A5組雄鼠死亡4只，分別死于術后12 h,3、9、11 d；A6組雄鼠死亡5只，分別死于術后8、24 h,10、12、16 d；A7組雄鼠死亡4只，分別死于術后24、48 h,5、10 d；B1組雄鼠死亡3只，分別死于術后12、24 h,9 d；B2組雄鼠死亡2只，分別死于術后24 h、5 d；B3組雄鼠死亡3只，分別死于術后8 h,6、15 d；C1組雄鼠死亡2只，分別死于術后24 h、8 d；C2組雄鼠死亡5只，分別死于術后12、16 h,8、11、15 d；C3組雄鼠死亡5只，分別死于術后8、16 h,9、13、16 d；D組雄鼠死亡2只，分別死于術后16 h、3 d；E組無死亡。

2.2配對雌鼠受孕情況及受孕率E組、D組以及A1～A7組之間兩兩比較差異無統計學意義(P>0.05)，B1～B3、C1～C3組之間兩兩比較差異均無統計學意義(P>0.05)，E組、D組以及A1～A7組中的任意一組與B1～B3、C1～C3組中的任意一組兩兩比較差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1　各組配對雌鼠受孕情況比較

3　討　論

ED是指在有性欲要求時，陰莖不能達到或維持持續的勃起，因而妨礙性交或不能完成性交。陰莖勃起過程是一系列神經血管的活動，勃起程度取決動脈流入血和靜脈流出血之間的平衡。在勃起過程中，坐骨海綿體肌起到阻斷勃起血管內血液回流的作用，維持陰莖硬勃起[7]。外傷性ED是泌尿外科治療的難點，目前器質性ED的病因包括勃起神經、勃起血管損傷，即神經性ED及血管性ED。有研究發現切斷雄鼠雙側坐骨海綿體肌必然導致ED，而僅切斷單側坐骨海綿體肌可能會引起短暫的ED，但不會導致永久性ED[7-10]。臨床上對于骨盆骨折后勃起血管及勃起神經的損傷引起的ED報道較多[6]，但這些報道并未指明單側還是雙側神經或血管損傷導致，說明臨床上對ED的病因判斷仍然不夠精確。此外，兩側勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌的單側、雙側損傷以及三者之間的不同組合的復合性損傷對ED有何關系，目前不甚清楚。由于大鼠在盆腔、陰莖的血管及神經解剖、受體分布以及性反應的感覺、運動、反射等方面都與人相似[11-12]。因此本研究通過建立不同致傷原因導致大鼠ED的模型，探討不同致傷原因對大鼠 ED 的影響，為臨床診治外傷性ED的病因提供參考。

陰莖海綿體動脈是陰莖勃起的主要供血動脈。海綿體動脈從兩側陰莖腳匯合處進入陰莖海綿體，此處在恥骨或坐骨支骨折時易損傷海綿體動脈，造成血管性ED。通過實驗前對雄性大鼠解剖發現，其勃起血管與勃起神經相伴行，包裹于纖薄的結締組織鞘內，共同形成勃起血管神經束。在建立大鼠神經、血管性ED模型時，根據手術要求，打開勃起神經血管束鞘，小心分離開勃起神經及勃起血管，予以切斷、結扎相應的勃起神經、血管。

實驗結果顯示，切斷同側的勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的任何一種組合其有效配對雌鼠全部或絕大部分均受孕，與D組及E組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，推斷其未導致永久性的ED。原因考慮為支配陰莖的勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌均為雙側性，當一側損傷后，仍有另一側作為代償并協調統一，完全能支配整體的勃起功能。實驗中我們還觀察發現，切斷同側的勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的任何一種組合，其有效配對雌鼠雖然全部或絕大部分均受孕，但與D組及E組比較，其受孕時間一般需推遲5～16 d。考慮在損傷早期，對側可能發生代償而功能增強，代償期間會出現短暫的ED。而切斷不同側的勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的任何一種組合方式其有效配對雌鼠全部均未受孕，與D組及E組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，推斷其導致永久性的ED。原因考慮為支配陰莖的勃起神經、勃起血管及坐骨海綿體肌均為雙側性，當不同側的任何一種組合性損傷后，其健存的另一側的不同組合不能達到協調統一，失去支配整體的勃起功能的能力。需要說明的是在實驗中由于大鼠的勃起血管與勃起血管緊密伴行，且勃起血管纖細，尤其勃起血管中的靜脈血管，分離時容易損傷。因此在切斷勃起神經時，一部分勃起血管可能一并損傷。相當于在切斷單側勃起神經時有可能同時損傷同側的勃起血管，雖然這對我們的實驗結論并不會產生明顯影響。即單側的勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的任何一種組合方式的損傷均不會導致ED。而不同側的勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的任何一種組合方式的損傷均會導致臨床上的血管性ED、神經性ED以及坐骨海綿體肌損傷性ED或者是混合性ED。這為臨床上尋找外傷性ED的病因以及針對病因采取有針對性的治療提供了理論參考。

實驗結果顯示，A5組有效配對雌鼠18只，其中16只受孕，2只未受孕，受孕率88.9%；A6組有效配對雌鼠18只，其中15只受孕，3只未受孕，受孕率83.3%；A7組有效配對雌鼠17只，其中16只受孕，1只未受孕，受孕率94.1%。這3組中共計6只雌鼠未受孕，通過記錄分析均為配對后短期死亡的雄鼠的配對雌鼠。引起未受孕的原因，考慮為雄鼠死亡前未發生性交或未發生有效的性交，從而未導致雌鼠受孕有關。

ED是骨盆骨折合并后尿道損傷的常見并發癥，其發生率為54%～62%[6]，其中神經性占72%、動脈性占28%[12]，均未指明單、雙側性損傷。其原因多認為有以下幾點：(1)骨盆骨折易損傷陰部內動脈，影響陰莖的血管，導致血管性ED；(2)陰莖勃起神經位于前列腺尖部 的后外側的血管神經內，骨盆骨折易損傷這些結構及自主神經可引起ED[13]。陳宗平等[14]對大鼠骨盆骨折后ED的病因學分析發現：骨盆骨折后的器質性ED主要表現為坐骨海綿體肌損傷及勃起神經損傷，勃起血管損傷不明顯。可以考慮在臨床上是否能通過對骨盆骨折后尿道損傷患者的坐骨海綿體肌進行二期修復來改善患者的勃起功能。其他外傷如腰、骶椎壓縮性骨折或騎跨傷會陰部外傷，均會可以引起勃起神經、勃起血管、坐骨海綿體肌的不同程度的損傷，導致ED。因此，對此類患者在進行相關檢查如血管造影、神經誘發電位等明確病因后可采取有針對性的修復手術來治療。

此外，臨床上外科手術如盆腔大血管手術、前列腺癌根治術、膀胱根治性切除術、子宮根治性切除術、盆腔淋巴結清掃術、直腸癌根治術及脊柱手術等，均有可能會引起支配性功能的神經不同程度損傷和血管不同程度的損傷或栓塞，從而導致性功能障礙。這提醒一方面，在術中操作時須仔細，謹慎，對盆底的血管和神經應采取盡可能多的保護；另一方面，在術中需要而不得不損傷的情況下，應盡可能避免對雙側的勃起血管和勃起神經同時造成損傷，以免造成永久性性功能障礙。

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Influence of different injury causes on erectile dysfunction in rats*

WuTao,LiMin,ChenZongping△,ChenChanjuan,PengYijuan,QiuZhaoyu,LiangGuobiao,CuiWei,JianYu,ZhangNeng,LuoXu,ZhaoZeju

(DepartmentofUrology,AffiliatedHospitalofZunyiMedicalCollage,Zunyi,Guizhou563099,China)

ObjectiveTo explore the influence of different combination cuttings of male rat erectile nerves,erection vessels and ischiocavernosus muscle on erectile dysfunction(ED).MethodsAccording to different cutting modes,285 reproductive male Wistar rats were randomly divided into:unilateral cutting group A1-A7 ( erectile nerve,erectile vessel;ischiocavernosus muscle;erectile;nerve and ischiocavernosus muscle,erectile vessel and ischiocavernosus muscle;erectile nerve,erectile vessel and ischiocavernosus muscle);bilateral cutting group B1-B3 (erectile nerve,erectile vessel and ischiocavernosus muscle);unilateral erectile nerve and contralateral erectile vessel cutting group (C1);unilateral erectile nerve and contralateral ischiocavernosus muscle cutting group(C2);unilateral erectile vessel and contralateral ischiocavernosus muscle cutting group(C3);sham operation group (D),20 cases in each group,and the healthy control group(E,5 cases).285 non-pregnant childbearing rats were randomly paired with the above groups for feeding.The pregnant situation(3 months) in the paired female rats was observed.ResultsThe death in the group A1-A4 was 4,2,3 and 2 cases respectively;the pregnancy rate in paired female rats was 100%;the death in the group A5-A7 was 4,5 and 4 cases respectively;the pregnancy rates in paired female rats were 88.9%,83.3% and 94.1% respectively;the death in the group B1-B3 and group C1-C3 was 3,2,3,2 and 5 cases respectively;all paired female rats were not pregnant;2 cases in the group D died,the pregnancy rate in paired female rats was100%;no case in the group E died and all paired female rats were pregnant with the pregnancy rate of 100%.ConclusionDifferent combination cuttings of ipsilateral erectile nerves,erectile vessels and ischiocavernosus muscle do not lead to permanent ED;different combination cuttings of bilateral erectile nerves,erectile vessels and ischiocavernosus muscle lead to permanent ED.

erectile dysfunction;etiology;injury;rats,Wistar

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.13.006

貴州省科技廳基金[黔科合J字 LKZ(2011)07]。作者簡介：吳濤(1981-)，碩士，主治醫生，主要從事泌尿外科方面的研究。△

，E-mail：czpingzhang@qq.com。

R698

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1671-8348(2016)13-1747-03

2015-12-28

2016-01-02)