不同蛋白梯度對草魚部分生化指標影響的試驗報告

范鵬

（重慶市長壽區畜牧獸醫局　重慶　長壽　401220）

不同蛋白梯度對草魚部分生化指標影響的試驗報告

范鵬

（重慶市長壽區畜牧獸醫局重慶長壽401220）

本文采取投喂不同蛋白含量飼料的方法，對草魚部分生化指標的變化情況進行研究，以期為草魚飼料蛋白質的合理添加量提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗用魚

選擇體表無傷、體質健壯的草魚作為試驗用魚，經2%食鹽水消毒后暫養兩周開始試驗，周期為8周。試驗用魚體長為20.87±2.49cm，體重為118.19±16.53g。試驗魚分3組，分別投喂蛋白含量為28%、33%、38%的膨化飼料，除蛋白質外，其他飼料成分相同。

1.2試驗方法

1.2.1血液生化指標測定

血糖、甘油三酯和總膽固醇含量測定在半自動生化分析儀上測定。

1.2.2血漿總氨基酸含量測定

采用銅離子絡合物法。原理為銅離子能與各種氨基酸絡合產生藍綠色的絡合物，在一定波長下顏色的深淺與總氨基酸的含量成正比。

1.3粗酶液的制備

取出草魚的腸道以及肝胰臟，將腸分為前、中、后3段，用預冷蒸餾水沖洗并吸干；取心臟、肝胰臟、脾臟、中腎、鰓、肌肉、血液等做常規指標檢測。相同組織剪碎后稱重，加10倍體積的預冷蒸餾水，電動勻漿機勻漿，冷凍離心機12000r/min低溫離心20min，取上清液。

1.4SOD酶活性測定

采用SOD試劑盒測定。測定原理是通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子自由基（O2-），后者氧化羥胺形成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈現紫紅色，用紫外分光光度計測其吸光度。當被測樣品中含SOD時，則對超氧陰離子自由基有專一性的抑制作用，使形成的亞硝酸鹽減少，比色時測定管的吸光度值低于對照管的吸光度值，通過公式計算可以求出被測樣品中的SOD活力。

1.5MDA含量測定

采用MDA測試盒測試。測定原理是過氧化脂質降解產物中的丙二醛（MDA）可與硫代巴比妥酸（TBA）縮合，形成紅色產物，在532nm處有最大吸收峰。

2　結果

2.1不同蛋白梯度飼料對草魚生化指標的影響

不同蛋白梯度飼料對草魚SOD、CAT、MDA活力的影響結果分別見表1、表2、表3。

表1　不同蛋白梯度飼料對草魚SOD活力的影響（±SD）

表1　不同蛋白梯度飼料對草魚SOD活力的影響（±SD）

SOD　28%　33%　38%心臟（U/mg）　24.84±3.58a　27.27±3.92a　26.86±1.95a肝胰臟（U/mg）　47.90±3.45a　50.59±4.14a　54.34±2.76a脾臟（U/mg）　9.42±1.50a　8.49±1.05a　9.10±0.84a頭腎（U/mg）　14.26±2.12b　18.30±1.55ab　20.90±2.78a中腎（U/mg）　33.06±2.57a　35.68±2.56ab　39.53±2.47a鰓（U/mg）　13.59±2.26a　15.90±2.40a　17.04±2.15a肌肉（U/mg）　8.14±1.92a　11.34±2.78a　8.11±1.79a血液（U/ml）　14.90±4.18a　16.12±2.73a　18.62±2.59a

注：表中同一行數據右上角標有相同字母的表示差異不顯著（P>0.05）；標有不同字母的表示差異顯著（P<0.05）。顯著水平為0.05。

表2　不同蛋白梯度飼料對草魚CAT活力的影響（±SD）

表2　不同蛋白梯度飼料對草魚CAT活力的影響（±SD）

注：表中同一行數據右上角標有相同字母的表示差異不顯著(P>0.05)；標有不同字母的表示差異顯著(P<0.05)。顯著水平為0.05。

CAT　28%　33%　38%心臟（U/mg）　0.86±0.15b　1.06±0.08ab　1.18±0.08a肝胰臟（U/mg）　2.68±0.25b　2.99±0.10b　3.58±0.38a脾臟（U/mg）　1.40±0.10a　1.30±0.10a　1.61±0.32a頭腎（U/mg）　1.00±.011b　1.00±.011b　1.64±0.10a中腎（U/mg）　1.80±0.15b　2.07±0.21a　2.09±0.18a鰓（U/mg）　1.10±0.13b　1.05±0.18b　1.46±0.17a肌肉（U/mg）　1.50±0.14b　1.86±0.11a　2.07±0.20a血液（U/ml）　1.28±0.14b　1.51±0.14ab　1.73±0.13a

表3　不同蛋白梯度飼料對草魚MDA活力的影響（nmol/mg）（±SD）

表3　不同蛋白梯度飼料對草魚MDA活力的影響（nmol/mg）（±SD）

注：表中同一行數據右上角標有相同字母的表示差異不顯著（P>0.05）；標有不同字母的表示差異顯著（P<0.05）。顯著水平為0.05。

MDA　28%　33%　38%心臟（nmol/mg）　0.99±0.12b　1.33±0.10a　1.54±0.87a肝胰臟（nmol/mg）　1.39±0.14a　1.68±0.17a　1.49±0.16a脾臟（nmol/mg）　0.82±0.05b　0.95±0.11ab　1.05±0.09a頭腎（nmol/mg）　2.64±0.15a　2.89±0.16a　2.88±0.20a中腎（nmol/mg）　1.98±0.12b　2.07±0.09b　2.44±0.18a鰓（nmol/mg）　1.53±0.11a　1.71±0.21a　1.72±0.13a肌肉（nmol/mg）　0.82±0.15b　1.09±0.13a　1.27±0.07a血液（nmol/ml）　2.87±0.25a　3.29±0.27a　3.08±0.25a

2.2生化指標的影響分析

SOD是機體重要的抗氧化酶，其活性與生物的免疫水平密切相關。草魚心臟的SOD酶活力在33%蛋白濃度組時有較大升高，當飼料蛋白繼續升高至38%時，SOD活力停止上升，甚至稍有下降。肝胰臟SOD活力最強，隨著飼料蛋白濃度的增加，酶活力逐漸增強。脾臟SOD活力較小，其SOD活力沒有隨著飼料蛋白水平變化出現明顯規律變動。頭腎隨著飼料蛋白梯度變化明顯上升，28%-33%梯度組之間變化強于33%-38%梯度組。中腎SOD活性僅次于肝胰臟，SOD活性隨著飼料蛋白梯度變化規律上升。鰓的SOD酶活力同頭腎相近，SOD活性在38%梯度組低于頭腎。肌肉SOD活力最弱，33%梯度組飼料對肌肉SOD活力有較好的提高。血液SOD活性隨著飼料蛋白梯度變化，緩慢上升。

CAT是生物體第一道抗氧化防線，能迅速清除細胞代謝產生的毒性物質，具有一定的解毒能力。草魚心臟的CAT活力在各組織中最低，隨著飼料蛋白的變化緩慢升高。肝胰臟的CAT活力最高，隨著飼料蛋白梯度的升高，CAT活力提高較快。脾臟CAT活力隨著蛋白梯度變化影響不大，沒有規律性的改變。頭腎在28%-33%梯度組之間CAT活力有較大提高，33%-38%梯度組之間變化較慢。中腎變化趨勢同頭腎相近，CAT活力在28%-33%梯度之間有較快升高。鰓的CAT活力在28%-33%梯度組之間變化不大，甚至略有降低，在33%-38%梯度組之間，有一定程度的升高。肌肉CAT活力隨著飼料蛋白梯度的升高，穩定上升。血液CAT活力略低于肌肉，受飼料蛋白梯度影響同肌肉相近。

MDA反映機體受氧化損傷的程度，是脂質過氧化的最終產物。心臟MDA活力隨著飼料蛋白梯度上升，穩定上升。肝胰臟在28%-33%飼料梯度組之間MDA活力上升，33%-38%濃度組之間有所下降，但仍高于28%梯度組。脾臟MDA活性最弱，隨飼料蛋白梯度升高，緩慢上升。頭腎MDA在28%-33%梯度組之間有一定程度的上組升，33%-38%梯度組之間變化不大。中腎MDA在28%-33%梯度組之間上升較慢，在33%-38%梯度組之間有較快升高。鰓的MDA活力低于中腎，隨飼料蛋白梯度變化規律同頭腎相近。肌肉MDA活力略高于脾臟，隨飼料蛋白梯度變化規律同脾臟相近。血液MDA活力在28%-33%梯度組之間有較大的促進作用，33%-38%梯度組之間，MDA活力略有回降。

3　分析

綜合SOD、CAT、MDA數據分析，草魚主要的抗氧化酶在肝胰臟和血液里，這兩者的抗氧化能力大多隨著蛋白含量的升高而升高，在飼料蛋白質33%升高至38%時，肝胰臟和血液的MDA活力有所下降。SOD活力僅次與肝胰臟的心臟，在38%飼料組的酶活力也出現回落。綜合來看，33%飼料組的草魚抗氧化能力高于28%飼料組，38%蛋白飼料使得草魚部分器官抗氧化能力出現回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到較大加強。心臟和肝胰臟的溶菌酶活力均隨著飼料蛋白梯度的上升而有所提高，肝胰臟在草魚各組織中溶菌酶活力最高。脾臟在28%-33%蛋白梯度組時，溶菌酶活力有一定程度升高，在33%-38%蛋白梯度組之間，溶菌酶活力略有下降。頭腎溶菌酶活力略強于心臟，在28%-33%梯度組之間的溶菌酶活力上升速度高于33%-38%梯度組。中腎溶菌酶活力在28% -33%梯度組之間有一定程度的上升，33%-38%梯度組之間上升加快。鰓的溶菌酶活力在各器官之中活力最小，溶菌酶活力受飼料蛋白梯度變化影響不大。肌肉溶菌酶活性隨著飼料蛋白梯度變化有一定程度上升。血液溶菌酶活力在28%-33%梯度組之間的上升速度高于33%-38%梯度組。

加大飼料中的蛋白含量，對草魚各組織的生化指標的含量均有一定程度的提高。反之則反，但是在33%-38%梯度組之間有較快的上升。各種含量隨飼料蛋白含量變化有一定程度的上升，上升幅度較小。頭腎、中腎和鰓的總蛋白含量上升較大，肌肉在33%-38%梯度組之間上升較大，血液總蛋白含量受飼料蛋白含量變化影響較少。綜合來看，33%飼料組的草魚抗氧化能力高于28%梯度組，38%梯度組使得草魚部分器官抗氧化能力出現回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到較大加強。