雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2在肺腺癌中的表達

秦文婧　張雙林河南大學第一附屬醫院呼吸內科，河南開封　475000

雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2在肺腺癌中的表達

秦文婧張雙林
河南大學第一附屬醫院呼吸內科，河南開封475000

目的 探討雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及原癌基因Her-2（C-erbB-2）在肺腺癌發生發展過程中的作用。方法 選擇2013年3月～2015年2月在我院手術治療的肺腺癌患者組織切塊60例為研究對象。分析不同性別、年齡、分化程度、臨床分期患者肺腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表達，分析肺腺癌患者組織中C-erbB-2的表達與ER、PR表達的相關性，分析骨轉移患者與無骨轉移患者肺腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2的表達。結果 60例患者，14例ER陽性表達，占23.3%，13例PR陽性，占21.7%，6例C-erbB-2陽性，占10.0%。分化程度越低的患者ER陽性率及C-erbB-2陽性率越高（P＜0.05）。不同性別、臨床分期肺腺癌患者組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。相關性分析：C-erbB-2與ER表達呈顯著正相關的關系（r=0.461），C-erbB-2表達與PR呈正相關（r=0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽性呈顯著正相關的關系（r=0.329），ER與PR表達無相關性（r=0.081）。骨轉移患者與無骨轉移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。結論 肺腺癌中均可表達一定程度的雌激素受體、孕激素受體及原癌基因Her-2水平。

雌激素受體；孕激素受體；原癌基因Her-2；肺腺癌

[Abstract]Objective To discuss expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma.Methods Diced tissues of 60 cases with lung adenocarcinoma from Mar 2013 to Feb 2015 were selected.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients of different sex，age，degree of differentiation，clinical stage were analyzed.Association of C-erbB-2 expression with ER and PR was analyzed.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients with bone metastases and non bone metastasis were analyzed.Results In 60 cases，ER positive expression in 14 cases，accounted for 23.3%，13 cases of PR positive，accounted for 21.7%，and 6 cases of C-erbB-2 positive，accounted for 10%.ER and C-erbB-2 positive rates in patients with the lower the degree of differentiation were higher（P＜0.05）.ER，PR and C-erbB-2 positive rates in patients with different sex，there was no significant difference in the clinical stage（P＞0.05）.C-erbB-2 and ER expression was significantly positive correlation relationship（r=0.461），C-erbB-2 expression and PR were positively correlated（r=0.326）;C-erbB-2，ER and PR were positive significant positive correlation relationship（r=0.329），ER and PR expression no correlation（r=0.081）.ER，PR and C-erbB-2 expressions showed no significant difference in patients with bone metastases and non bone metastasis（P＞0.05）.Conclusion ER，PR and C-erbB-2 express in lung adenocarcinoma.

[Key words]ER;PR;C-erbB-2;Lung adenocarcinoma

近年來內分泌治療腫瘤取得了較大的進展，相關研究也越來越多，尤其是前列腺癌、乳腺癌等內分泌相關癌癥。有學者報道肺癌組織中存在雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR），隨后這種結論由多種方法證實[1]。肺腺癌容易發生骨轉移，而骨骼中雌激素受體高表達，且兩者之間可能存在一定的相關性。孕激素是雌激素的調控基因產物，反映了雌激素的功能及活性，而原癌基因Her-2（Proto-oncogene HER-2，C-erbB-2）是與雌激素受體表達相關受體，與肺癌的預后相關[2，3]。本研究分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2表達，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2013年3月～2015年2月在我院手術治療的肺腺癌患者的組織切塊60例為研究對象。納入標準：手術治療，術后病理確認，標本石蠟固定；所有患者在手術前未接受放療或者化療治療；臨床資料及隨訪資料完整。排除標準：合并其他系統腫瘤，合并其他疾病，隨訪過程中因其他原因死亡。60例患者男39例，女21例，年齡37～77歲，平均（56.1±12.7）歲；其中Ⅰ期22例，Ⅱ期29例，Ⅲ期9例。隨訪：28例發生骨轉移，其中男19例，女9例；32例患者未發生骨轉移，其中男20例，女12例。

1.2方法

組織切塊中ER、PR及C-erbB-2的表達檢測采用免疫組化方法，試劑盒由上海撫生實業有限公司提供。操作嚴格按照說明書進行。石蠟切塊制作為4～5 μm切片，脫蠟，梯度酒精水化，蒸餾水沖洗2次，隨后PBS液沖洗3次，每次沖洗3 min，輕微震蕩。進入濃度為0.01 mol/L，pH 6.0的枸櫞酸鹽內煮沸15 min。加53%過氧化氫，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加1∶100的50 μL一抗，室溫下孵育60 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加即用型 Max Vision試劑50 μL，室溫下孵育10 min，PBS沖洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加DAB溶液100 μL，3~5 min后，自來水沖洗，蘇木素復染，PBS沖洗，梯度濃度乙醇脫水，風干，二甲苯溶液過2 min，樹膠封片。

1.3結果判斷[4]

在光鏡下隨機選擇10個高倍視野，計1000個細胞。核表達受體判斷細胞核有黃棕色顆粒為陽性。每個高倍鏡視野內，陽性細胞占0%~10%為陰性，11% ~33%為（+），34%~66%為（++），67%~100%為（+++）。膜表達受體判斷細胞膜染色：陰性為無染色細胞；超過10%的癌細胞細胞膜染色，染色在細胞膜上間斷分布，為環繞細胞膜為（+）；癌細胞細胞膜染色超過10%，染色強度為弱到中度，連續，環繞整個細胞膜為（++）；癌細胞細胞膜強度染色超過10%，連續，環繞整個包膜為（+++）。陰性為0-+；弱陽性為++，強陽性為+++。

1.4觀察指標

分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2陽性情況，分析不同性別、分化程度、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2的陽性表達。分析C-erbB-2陽性與ER、PR陽性表達的相關性。分析患者是否發生骨轉移與ER、PR及C-erbB-2陽性表達的相關性。

1.5統計學方法

采用SPSS13.0統計學軟件對數據進行分析。計數資料采用χ2檢驗，計量資料以均數±標準差表示，采用t檢驗。相關性分析采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

表1　ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達[n（%）]

2　結果

2.1ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達

60例患者，14例ER陽性表達，占23.3%，13例PR陽性，占21.7%，6例C-erbB-2陽性，占10.0%。不同性別、年齡、臨床分型、臨床分期患者ER、PR及C-erbB-2陽性表達比較見表1。分化程度越低的患者ER陽性率及C-erbB-2陽性率越高（P＜0.05）。

2.2C-erbB-2在肺腺癌組織中的表達與ER及PR表達的相關性

相關性分析：C-erbB-2與ER表達呈顯著正相關的關系 （r=0.461），C-erbB-2表達與PR呈正相關 （r= 0.326）；C-erbB-2與ER及PR均為陽性呈顯著正相關的關系（r=0.329），ER與PR表達無相關性（r=0.081）。

2.3是否發生骨轉移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達比較

見表2。骨轉移患者與無骨轉移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2表達無差異（P＞0.05）。

3　討論

越來越多的研究證實，性激素參與了多種惡性腫瘤的發生及發展，包括子宮內膜癌、乳腺癌、前列腺癌，性激素具有促癌作用。近來的研究顯示，性激素受體也廣泛存在肺癌組織中。性激素具有調節肺細胞分化、成熟的作用，同時肺癌組織中雌激素受體、孕激素受體高表達導致肺癌組織內分泌環境發生變化。另外肺癌細胞在癌變過程中，可能啟動了雌激素受體及孕激素受體的蛋白合成基因，合成受體蛋白[5，6]。雌激素與雌激素受體結合發揮生理效應。既往認為ER是一種配體依賴性轉錄激活因子，近年來的研究顯示，在沒有配體的情況下，ER也會與其他細胞信號傳導通路發生作用，即配體非依賴性激活，包括其磷酸化，其與生長因子、孕激素受體、癌基因/抑癌基因蛋白等通路的相互作用，從而參與靶細胞的分化、增生、正常生理功能維持的調節，并且雌激素相關腫瘤發病以及對雌激素拮抗劑藥物耐藥等與ER的這些作用有關[7-9]。雌激素是乳腺癌的生物學標志物，是目前用于比較可靠的治療、判斷乳腺癌預后的指標[10，11]。研究顯示乳腺癌ER呈陽性的組中，ERαmRNA水平呈高表達，且ERα基因突變率高，這些變化導致雌激素受體對雌激素的敏感性顯著增加，從而促使細胞增殖，誘發癌癥的發生[12，13]。也有學者研究，結腸癌、直腸癌中ER的表達水平也顯著升高，尤其是進展期的結腸癌及直腸癌，其水平高于早期，并且同時表達ER及PR的患者生存期縮短，因此認為雌激素受體及孕激素受體的表達與惡性腫瘤的進展具有相關性[14]。

表2　是否發生骨轉移患者肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2陽性表達比較[n（%）]

肺腺癌（lung adenocarcinoma）是肺癌的一種，屬于非小細胞癌。不同于鱗狀細胞肺癌，肺腺癌較容易發生于女性及不抽煙者[15]。起源于支氣管黏膜上皮，少數起源于大支氣管的黏液腺。發病率比鱗癌和未分化癌低，發病年齡較小，女性相對多見。多數腺癌起源于較小的支氣管，為周圍型肺癌。早期一般沒有明顯的臨床癥狀，往往在胸部X線檢查時被發現。表現為圓形或橢圓形腫塊，一般生長較慢，但有時早期即發生血行轉移。淋巴轉移則發生較晚。在本次研究中，肺腺癌組織均有不同程度的ER、PR表達，提示肺腺癌為內分泌相關的惡性腫瘤。在不同性別、臨床分期的肺腺癌組織中ER、PR表達沒有顯著差異。但是ER表達與腫瘤細胞的分化程度具有一定的相關性，對于低分化及中分化的腺癌，ER的表達更高。但是PR的表達與肺腺癌分化程度沒有明顯的相關性，不同分化程度的肺腺癌PR的表達相似。目前的研究顯示，ER、PR在不同的腫瘤組織中與臨床分期、病理分型、分化程度等的相關性不同。目前的研究顯示性激素與肺癌的關系具有兩方面性，一方面具有抑癌的作用，一方面也有致癌的作用。機體內的激素環境失衡，無論過多或者減少，都是導致癌癥發生的誘因。性激素本身不致癌，但是其能夠促進靶細胞增殖，導致致癌物質更容易發生作用，啟動致癌過程。性激素也有促催化劑作用，促進癌細胞起始階段的增殖，還能夠促使癌細胞的迅速增殖。在本次研究中C-erbB-2在肺腺癌中的陽性表達率為10.0%。研究顯示，C-erbB-2陽性表達提示肺腺癌的惡性程度較高。本研究發現低分化腺癌的陽性率更高，提示患者預后較差。另外本研究還提示，發生骨轉移患者與未發生骨轉移的患者ER、PR及C-erbB-2的陽性率比較差異無統計學意義。

綜上所述，肺腺癌組織中ER、PR及C-erbB-2均有一定程度的表達，說明肺腺癌是內分泌相關腫瘤，內分泌靶向治療可以作為今后研究的方向之一。

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Expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma

QIN WenjingZHANG Shuanglin
Department of Respiratory Medicine，the First Affiliated Hospital of He'nan University，Kaifeng475000，China

R734.2

A

1673-9701（2016）12-0008-03

河南省教育廳科學技術研究重點項目（13A320061）

2016-01-16）