血清脂蛋白相關磷脂酶A2與不穩定心絞痛患者主要危險因素的相關性

張衛萍， 馬云龍， 馬　瓊， 陳　濤， 郜珊珊

(西安交通大學第一附屬醫院心臟內科，西安　710061; *通訊作者，E-mail:docping@qq.com)

?

血清脂蛋白相關磷脂酶A2與不穩定心絞痛患者主要危險因素的相關性

張衛萍*， 馬云龍， 馬瓊， 陳濤， 郜珊珊

(西安交通大學第一附屬醫院心臟內科，西安710061;*通訊作者，E-mail:docping@qq.com)

目的探討血清脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)與不穩定心絞痛患者主要危險因素的相關性。方法選擇本院心臟內科2015-03～2015-06不穩定心絞痛住院就診的52例患者為研究組，同期58例因胸痛行冠狀動脈造影術(CAG)冠狀動脈狹窄<30%且排除冠心病的患者為對照組。不穩定心絞痛患者入院后24 h內采用TIMI評分進行危險分層以及Gensini積分，并檢測血壓，心率，肝、腎功能，血脂，凝血功能，心肌酶，N端腦利鈉肽前體(NT-proBNP)，高敏性C反應蛋白等指標。ELISIA法測定血清Lp-PLA2水平，并評價Lp-PLA2與不穩定心絞痛主要危險因素的相關性。結果不穩定心絞痛組脂蛋白(a)、低密度脂蛋白、肌鈣蛋白I、肌酸激酶、NT-proBNP、纖維蛋白降解產物(FDP)、hs-CRP和Lp-PLA2水平明顯高于對照組(P<0.05或P<0.01)，Apo-A1則明顯降低(P<0.05)；TIMI評分高危組和中危組Lp-PLA2水平與Gensini積分高于低危組(P<0.01)；不穩定心絞痛組血清Lp-PLA2水平與TIMI評分、Gensini積分、LDL、脂蛋白a、APTT以及D-二聚體呈現明顯的正相關(P<0.05)；Lp-PLA2水平與TIMI評分、Gensini積分、LDL和脂蛋白a呈線性回歸。結論Lp-PLA2水平是不穩定心絞痛高危人群危險程度和冠脈病變嚴重程度的有力預測因素，并且Lp-PLA2水平的升高也直接反映了LDL和脂蛋白(a)與動脈粥樣硬化不穩定斑塊發展的相關性。

脂蛋白相關磷脂酶A2;不穩定心絞痛;危險因素;相關性

血脂代謝紊亂、炎癥和氧化應激目前被認為是動脈粥樣硬化病理生理發生和發展的重要機制。而脂蛋白相關的磷脂酶A2(Lp-PLA2)是磷脂酶超家族中的亞型之一，通過水解ox-LDL中的氧化磷脂，可生成脂類促炎物質，是具有血管特異性的炎癥標志物[1]。因此目前許多研究認為Lp-PLA2可作為冠心病和缺血性卒中的獨立危險因素[2,3]，但是Lp-PLA2與不穩定心絞痛患者主要危險因素之間是否存在相關性還沒有確切的報道，本研究通過不穩定心絞痛與非冠狀動脈疾病患者對比，旨在探討不穩定心絞痛患者Lp-PLA2水平變化及其與冠心病主要危險因素之間的關聯性，有助于全面認識其在冠心病發展過程中的綜合作用。

1　資料和方法

1.1一般資料

選擇西安交通大學第一附屬醫院心臟內科2015-03～2015-06因冠心病不穩定心絞痛住院就診的52例患者為研究組，納入標準依據美國心臟病學會基金會(ACCF)/美國心臟協會(AHA)發布的2012版《不穩定型心絞痛和非ST段抬高型心肌梗死治療指南》。排除標準包括陳舊性心肌梗死、心肌炎、心肌病、心臟瓣膜病等在內的心臟疾病，未經控制的嚴重心律失?；蚋哐獕?，慢性嚴重心力衰竭(NYHA Ⅲ、Ⅳ級)，嚴重肝、腎疾病，甲狀腺疾病，外周血管疾病，急、慢性炎癥性疾病(肺炎、膽囊炎等)，惡性腫瘤，全身免疫性疾病及其他嚴重合并癥的患者。另外選取同期58例因胸痛行冠狀動脈造影術(CAG)冠狀動脈狹窄<30%且排除冠心病的患者為對照組。研究組男39例，女13例，年齡39-80歲，平均(61±11)歲。對照組男38例，女20例，年齡22-85歲，平均(60±16)歲。

1.2研究方法

1.2.1臨床資料記錄患者性別、年齡、發病至就診的時間，有無高血壓病、糖尿病、腦卒中等既往病史，同時進行呼吸、心率、收縮壓、舒張壓等指標的測量。

1.2.2樣本采集與檢測所有患者冠脈造影前經肘正中靜脈取血5 ml，2 500×g常溫離心15 min，分離血清，分裝后置于-80 ℃冰箱中保存，同時由本院檢驗中心進行肝、腎功能，血脂，同型半胱氨酸，超氧化物岐化酶，凝血功能包括血漿凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血酶原時間(APTT)、血漿凝血酶時間(TT)、纖維蛋白降解產物(FDP)、纖維蛋白原(Fig)以及D-二聚體，心肌酶，N端腦利鈉肽前體(NT-proBNP)和高敏性C反應蛋白(hs-CRP)等指標檢測。

1.2.3血清Lp-PLA2水平檢測采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定Lp-PLA2含量，試劑盒由中美合資天津康爾克生物科技有限公司所提供，檢測過程均嚴格按照說明書進行操作。

1.2.4冠脈病變評分采用心肌梗死溶栓治療(the thrombolysis in myocardial infarction, TIMI)評分對冠心病心絞痛進行危險分層[4]，按照TIMI危險評分系統分別積分并加和，再根據各患者總積分將其分為低、中、高?；颊?TIMI：0-2分低危，3-4分中危，5-7分高危)。采用Gensini積分進行冠脈病變程度的評價[5]。主要以每一冠狀動脈的狹窄基本評分乘以該病變部位的系數，即為該病變血管的評分，各病變血管得分總和即為該患者冠狀動脈病變狹窄程度的總評分。

1.3統計學分析

2　結果

2.1兩組患者基本臨床資料比較

兩組間年齡、性別、高血壓、糖尿病、血壓、心率、HAb1c、高密度脂蛋白、甘油三酯、同型半胱氨酸、超氧化物岐化酶、谷丙轉氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、PT、APTT、TT、Fig、D-二聚體差異無統計學意義。不穩定心絞痛組脂蛋白(a)、低密度脂蛋白、肌鈣蛋白Ⅰ、肌酸激酶、NT-proBNP、FDP水平明顯高于對照組，Apo-A1低于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01，見表1)。

2.2兩組Lp-PLA2與hs-CRP水平的比較

不穩定心絞痛組hs-CRP和Lp-PLA2水平明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.01，見表2)。

2.3TIMI評分危險分層各組患者血清 Lp-PLA2水平的比較

對TIMI評分危險分層的三組患者Lp-PLA2水平與Gensini積分進行比較，單因素方差分析顯示三組間Lp-PLA2與Gensini積分存在顯著性差異，高危組Lp-PLA2水平與Gensini積分高于低危組(P<0.01)，同時中危組Lp-PLA2水平和Gensini積分高于低危組(P<0.01)，高危組與中危組之間比較則差異無統計學意義。

2.4Lp-PLA2與主要危險因素的相關性分析

不穩定心絞痛組血清Lp-PLA2水平與TIMI評分(r=0.668，P=0.012)、Gensini積分(r=0.368，P=0.020)、LDL(r=0.277，P=0.004)、脂蛋白a(r=0.529，P=0.000)、APTT(r=0.385，P=0.000)、D-二聚體(r=0.385，P=0.000)呈現明顯的正相關。與年齡、血壓、同型半胱氨酸、PT、TT、hs-CRP以及心肌酶的相關指標無明顯相關性。

表1兩組患者基本臨床資料比較

Table 1Baseline characteristics of the patients in two groups

項目 不穩定心絞痛組(n=52)對照組(n=58)t/χ2P年齡(歲)61±1160±160.3780.71男性[例(%)]39(75.0)38(65.5)1.1740.28高血壓[例(%)]30(57.7)40(69.0)1.5060.22糖尿病[例(%)]14(26.9)11(19.0)0.9890.32收縮壓(mmHg)133±21 138±26 -1.101 0.27舒張壓(mmHg)75±1176±12-0.4540.65心率(次/min)75±1476±16-0.3470.73ALT(U/L)65.18±12.2969.47±19.02-1.387 0.17Cr(μmol/L)67.98±17.6367.45±22.190.1380.89HAb1c(%)6.07±1.435.85±1.130.8990.37脂蛋白(a)(mg/L)205±87 161±87 2.6480.00甘油三酯(mmol/L)1.71±1.251.55±1.050.7290.47低密度脂蛋白(mmol/L)2.37±0.842.01±0.652.5280.012高密度脂蛋白(mmol/L)1.00±0.301.05±0.32-0.8430.40Apo-A1(g/L)1.07±0.171.15±0.22-2.1160.04Apo-B(g/L)0.70±0.200.75±0.25-1.1500.25肌鈣蛋白I(ng/ml)0.14±0.050.12±0.042.3270.02肌酸激酶(U/ml)113±10977±382.3610.02同型半胱氨酸(μmol/L)18.89±10.1516.95±8.91 1.0680.29超氧化物岐化酶(U/ml)131±18 135±21 -1.066 0.29NT-proBNP(pg/ml)1301±254 975±486 4.3340.00PT(s)13.50±0.70 13.60±1.07 -0.572 0.57APTT(s)35.49±4.11 36.19±4.17 -0.8850.38TT(s)16.72±0.79 16.55±1.34 0.7990.45FDP(mg/L)1.67±0.281.58±0.191.9900.04Fig(mg/L)3.15±1.253.31±2.18-0.4650.64D-二聚體(mg/L)0.65±0.330.77±0.68-1.1560.25

組別nhs-CRP(mg/L)Lp-PLA2(ng/ml)不穩定心絞痛組5230.73±11.21191±85對照組588.85±4.38122±77 t13.7464.467 P0.000.00

分組nLp-PLA2(ng/ml)Gensini積分低危組14139±3512.15±3.26中危組21 187±42**17.22±4.17**高危組15 218±57**18.42±3.08**

與低危組比較，**P<0.01

2.5Lp-PLA2與TIMI評分及主要危險因素的回歸分析

分別將Lp-PLA2與TIMI評分進行Logistic 回歸分析以及與Gensini積分、LDL、脂蛋白a等變量進行線性回歸分析，結果顯示Lp-PLA2與TIMI評分回歸系數r=0.648(P=0.000)，Lp-PLA2與Gensini積分、LDL、脂蛋白a的回歸系數r分別為0.468(P=0.022)、0.345(P=0.041)、0.529(P=0.000)。

3　討論

目前認為炎癥反應在動脈粥樣硬化斑塊由穩定到不穩定的發展中具有重要的作用。炎癥反應誘導斑塊破裂、血小板活化，繼而血栓形成，引起冠狀動脈管腔嚴重狹窄甚至閉塞，最終導致心肌缺血性損傷和壞死。Lp-PLA2是由441個氨基酸殘基組成的一種絲氨酸酯酶，主要由成熟的巨噬細胞、泡沫細胞、T淋巴細胞及肥大細胞等炎性細胞在粥樣斑塊及肝臟中產生[6]。目前已經證實，冠心病患者血漿 Lp-PLA2水平或活性顯著升高，它獨立于傳統危險因素及 hs-CRP 等炎性指標來預測冠心病事件的發生，是新的冠心病獨立危險因素[7]。但是Lp-PLA2與傳統危險因素之間的關系并未有明確的說明。本研究結果再次驗證冠心病主要危險因素LDL、脂蛋白a以及甘油三酯明顯高于非冠狀動脈疾病人群，Apo-A1則明顯下降；同時不穩定心絞痛患者血清Lp-PLA2與hs-CRP水平也明顯增高，提示炎癥激活是導致不穩定斑塊發展的重要機制，進一步通過TIMI分層研究顯示，高危組不穩定心絞痛患者血清Lp-PLA2水平明顯高于低危組，說明Lp-PLA2水平與不穩定心絞痛危險嚴重程度有密切的聯系。同時Lp-PLA2水平分別與TIMI評分和Gensini積分的相關及Logistic回歸分析結果進一步證實Lp-PLA2對不穩定心絞痛危險程度和冠脈病變程度具有重要的預測價值。

Lp-PLA2與不穩定心絞痛主要危險因素的相關分析及回歸結果顯示，年齡、血壓、HAb1c以及心肌酶等指標與Lp-PLA2水平無明顯相關，提示Lp-PLA2是一個相對獨立、穩定的風險預測因素。而Lp-PLA2與LDL、脂蛋白a、APTT、D-二聚體水平呈現正相關，說明在不穩定斑塊發展過程中，炎癥反應、脂質代謝紊亂以及凝血功能激活三者存在密切聯系。同時進一步的分析顯示Lp-PLA2與LDL、脂蛋白a具有一定程度的線性相關，不僅說明斑塊發展過程中炎癥與脂質代謝紊亂存在密切的關系，而且Lp-PLA2升高也部分反映了LDL和脂蛋白a變化對不穩定心絞痛的促進作用。有研究顯示脂蛋白a是評價不穩定心絞痛的較佳的標志物，與不穩定冠脈綜合征及治療預后密切相關[8,9]。而另一方面的研究顯示，循環中80%以上的Lp-PLA2與LDL結合。動脈管壁上的LDL在氧化應激的作用下轉化為氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)，ox-LDL表面較多的氧化磷脂可以激活LDL中的Lp-PLA2，從而產生氧化脂肪酸(OxFA)和溶血磷脂酰膽堿(lysoPC)，刺激巨噬細胞增殖，炎癥細胞趨化，產生基質金屬蛋白酶，誘導斑塊不穩定[10]。這些都進一步證實Lp-PLA2是反映冠脈病變不穩定斑塊發展的一個重要標志物。這與既往類似的研究基本一致[11]。但是本研究也提示Lp-PLA2與hs-CRP之間也無明顯相關性，可能與各自在炎癥反應中的作用機制有關，Lp-PLA2與非感染性炎癥有關，在動脈粥樣斑塊中的巨噬細胞表達較多[12]。hs-CRP是由肝臟合成的一種全身性炎癥反應急性期的非特異性標志物，對于冠脈粥樣硬化炎癥變化敏感性高，但特異性差。

通過本研究可以認為，Lp-PLA2水平變化對不穩定心絞痛危險程度和冠脈病變嚴重程度的預測具有重要的參考價值，并且Lp-PLA2水平的升高也直接反映了LDL和脂蛋白a對冠脈病變斑塊穩定性的影響，這對于不穩定心絞痛中高?；颊咧笇娀幬镏委熂霸缙诠诿}血運重建發揮重要作用。但是本研究當前入組的樣本例數仍較少，仍需要更大樣本研究重復驗證該研究結論；此外由于未涉及Lp-PLA2抑制劑的研究，因此Lp-PLA2水平的降低與LDL和脂蛋白a之間的相關性尚需進一步研究。

[1]Du Y,Wei F,Dong Z,etal.Prognostic value of serum LP-PLA2 and hs-CRP in unstable atherosclerotic plaques[J].Clin Exp Hypertens,2011,33(2):113-116.

[2]Tonkin AM,Blankenberg S,Kirby A,etal.Biomarkers in stable coronary heart disease,their modulation and cardiovascular risk:The LIPID biomarker study[J].Int J Cardiol,2015,201:499-507.

[3]Persson M,Berglund G,Nelson JJ,etal.Lp-PLA2 activity and mass are associated with increased incidence of ischemic stroke:a population-based cohort study from Malm?[J].Atherosclerosis,2008,200(1):191-198.

[4]Marwick T,D’Hondt AM,Baudhuin T,etal.Optimal use of dobutamine stress for the detection and evaluation of coronary artery disease:combination with echocardiography or scintigraphy,or both[J].J Am Coll Cardiol,1993,22(1):159-167.

[5]Hess EP,Agarwal D,Chandra S,etal.Diagnostic accuracy of the TIMI risk score in patients with chest pain in the emergency department:a meta-analysis[J].CMAJ,2010,182(10):1039-1044.

[6]Tousoulis D,Papageorgiou N,Androulakis E,etal.Lp-PLA2-a novel marker of atherosclerosis:to treat or not to treat[J].Int J Cardiol,2013,165(2):213-216.

[7]Packard CJ,O’Reilly DS,Caslake MJ,etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2 as an independent predictor of coronary heart disease.West of Scotland Coronary Prevention Study Group[J].N Engl J Med,2000,343(16):1148-1155.

[8]Konishi H,Miyauchi K,Kasai T,etal.Impact of lipoprotein(a) as residual risk on long-term outcomes in patients after percutaneous coronary intervention[J].Am J Cardiol,2015,115(2):157-160.

[9]Niccoli G,Chin D,Scalone G,etal.Data on the lipoprotein(a),coronary atherosclerotic burden and vulnerable plaque phenotype in angiographic obstructive coronary artery disease[J].Data Brief,2016,7:1409-1412.

[10]Ikonomidis I,Kadoglou NN,Tritakis V,etal.Association of Lp-PLA2 with digital reactive hyperemia,coronary flow reserve,carotid atherosclerosis and arterial stiffness in coronary artery disease[J].Atherosclerosis,2014,234(1):34-41.

[11]Maiolino G,Bisogni V,Rossitto G,etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2 prognostic role in atherosclerotic complications[J].World J Cardiol,2015,7(10):609-620.

[12]Ferguson JF,Hinkle CC,Mehta NN,etal.Translational studies of lipoprotein-associated phospholipase A2in inflammation and atherosclerosis[J].J Am Coll Cardiol,2012,59(8):764-772.

Correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2 and main risk factors in unstable angina pectoris patients

ZHANG Weiping*, MA Yunlong, MA Qiong, CHEN Tao, GAO Shanshan

(DepartmentofCardiovascularMedicine,FirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,China;*Correspondingauthor,E-mail:docping@qq.com)

ObjectiveTo investigate the correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2) and main risk factors of unstable angina pectoris(UA).MethodsTotally 52 patients with UA in Department of Cardiovascular Medicine from March 2015 to June 2015 were chosen as study group, and 58 chest pain patients with coronary stenosis<30% detected by coronary angiography and non-coronary heart disease were chosen as control group. All UA patients were subjected to risk assessment and stratification with TIMI risk score and Gensini score within 24 h after admission, and blood pressure, heart rate, liver and renal function, blood lipids, coagulation function including prothrombin time(PT), activated partial thromboplastin time(APTT), fibrin degradation product(FDP), fibrinogen and D-dimer, myocardial enzymes, NT-proBNP, and high sensitivity C reactive protein(hs-CRP) were determined. Lp-PLA2 was measured by enzyme-linked immunosorbent assay and its relationship with risk factors of UA was analyzed.ResultsThe levels of Lp-PLA2, lipoprotein(a),low density lipoprotein, troponin I, creatine kinase, NT-proBNP,FDP and hs-CRP were significantly higher in UA group than in control group(P<0.05 orP<0.01), but Apo-A1 level was lower(P<0.05). Lp-PLA2 level and Gensini score were significantly elevated in high and middle risk groups compared with low risk group(P<0.01). Lp-PLA2 level was positively correlated with TIMI risk score,Gensini score,LDL,lipoprotein(a), APTT and D-dimer(P<0.05). There was a linear regression between Lp-PLA2 level and TIMI risk score,Gensini score, LDL and lipoprotein(a).ConclusionThe level of Lp-PLA2 is a potent predictive factor as hazardous level and the severity of coronary lesion in UA patients.The higher level of Lp-PLA2 also directly suggests the relation of LDL and lipoprotein(a) with unstable atherosclerotic plaque.

Lp-PLA2;unstable angina pectoris;risk factors;relation

國家自然科學青年基金資助項目(81102843)

張衛萍，女，1973-07生，博士，主治醫師，E-mail：docping@qq.com

2016-04-27

R541.4

A

1007-6611(2016)08-0685-04

10.13753/j.issn.1007-6611.2016.08.002