血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測在肝癌診斷中的應用

沈聰龍　鄭麗萍福州市傳染病醫院肝膽外科，福建福州　350000

血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測在肝癌診斷中的應用

沈聰龍鄭麗萍
福州市傳染病醫院肝膽外科，福建福州350000

［摘要］目的 檢測不同患者樣本中拮抗劑Ⅱ誘導的蛋白 （protein induced by vitamine K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ）、甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）的含量，研究PIVKA-Ⅱ、AFP在肝癌診斷中的應用。方法 選取我院2013年9月～2016年1月的住院患者血清樣本共計259例，檢測PIVKA-Ⅱ、AFP含量。結果（1）在103例肝癌標本中，PIVKA-Ⅱ的陽性率為70.9%，AFP的陽性率41.7%，經過χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=17.76，P＜0.01）；（2）血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）檢測肝癌的靈敏度為70.2%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測肝癌的靈敏度為69.9%。聯合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測肝癌的靈敏度84.5%，較單獨PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨AFP （χ2=12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異。結論 PIVKA-Ⅱ用于診斷肝癌靈敏度和特異性均優于AFP，可以顯著提高對肝癌診斷的靈敏度和特異性。PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測能更好更快地對肝癌做出早期診斷。

［關鍵詞］肝細胞癌；甲胎蛋白；人異常凝血酶原；診斷

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是肝臟最常見的惡性腫瘤，占全球腫瘤發生率的第五位，死亡率的第三位［1，2］。肝癌早期診斷尚缺乏有效檢測手段，大部分患者發現時多屬中晚期，手術切除率低，術后復發率、轉移率高，嚴重影響預后。甲胎蛋白（AFP）是肝癌早期診斷常用的腫瘤標志物，AFP作為早期肝癌診斷的靈敏度為39%～64%，特異度為76%～91%［3，4］，靈敏度偏低，且其他疾病也可能引起AFP的升高，特別是慢性肝炎、肝炎肝硬化患者。異常凝血酶原為肝細胞癌新型腫瘤標志物的一種，其主要是指維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導的蛋白（PIVKA-Ⅱ）所引發的肝細胞難以有效合成凝血因子的現象。研究顯示PIVKA-Ⅱ已逐漸成為臨床上診斷肝細胞癌的特異性腫瘤標志物，且具有較高的診斷特異性。多個研究［5-7］結果顯示，PIVKA-Ⅱ診斷肝癌的靈敏度為28%～89%，特異度為87%～96%；有研究顯示［8］，合理地對甲胎蛋白（AFP）檢測與PIVKA-Ⅱ進行聯合使用可顯著提高肝癌診斷的敏感性。本研究以本院就診患者的血清為樣本，進行血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測在肝癌診斷中應用的研究。現報道如下。

l對象與方法

1.1研究對象

選取我院2013年9月～2016年1月的住院患者血清樣本共計259例，其中肝癌患者血清樣本103例，其中男63例，女40例，年齡22～79歲，平均（43.5± 9.9）歲。肝炎肝硬化患者血清樣本83例，其中男45例，女38例，年齡19～76歲，平均（44.6±8.9）歲。慢性肝炎患者73例（未合并肝硬化），男39例，女34例，年齡20～75歲，平均（46.8±7.8）歲；所有患者均自愿參與本次研究，且均自愿簽署知情同意書，患者均無精神疾病，可配合本次研究；排除合并有精神疾病不能配合本次研究的患者，排除不愿參與本次研究的患者，排除中途退出的患者。三組患者臨床資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

采用LUMIPULSE G1200全自動免疫分析儀及配套AFP試劑盒（富士瑞必歐株式會社）檢測血清AFP濃度，AFP≥10 ng/mL為陽性，AFP≥200 ng/mL為肝癌判定值；PIVKA-Ⅱ測定時以測定結果不低于40 mAu/mL為肝癌。

1.3觀察指標

觀察比較肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出情況，并對所有肝癌患者綜合血清標志物檢測的靈敏度和特異度進行比較。其中靈敏度=真陽性/（假陰性+真陽性）×100%，特異度=真陰性/（假陽性+真陰性）×100%。

1.4統計學分析

采用SPSS 18.0統計學軟件對本研究數據進行分析，計數資料以（%）表示，并進行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出比較

在103例肝癌患者中PIVKA-Ⅱ檢出肝癌73例，AFP檢出肝癌43例，經χ2檢驗，在肝癌患者的診斷中兩者存在顯著性差異（χ2=17.76，P＜0.01）。在共計156例非肝癌血清樣本中PIVKA-Ⅱ檢出陽性11例，AFP檢出陽性33例，經χ2檢驗，在非肝癌的診斷中兩者存在顯著性差異（χ2=12.81，P＜0.01）。見表1。

表1　肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出比較［n（%）］

2.2患者綜合血清標志物檢測的靈敏度和特異度比較

對選取259例標本中，血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）檢測中真陽性73例，真陰性144例，假陰性31例，假陽性 11例，靈敏度為 70.2%，特異度為92.9%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測中真陽性72例，真陰性123例，假陰性31例，假陽性33例，靈敏度為69.9%，特異度為78.8%；聯合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測中，真陽性87例，真陰性138例，假陰性16例，假陽性18例，靈敏度為84.5%，特異度為88.5%（表2）。聯合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測陽性的靈敏度較單獨PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨AFP（χ2=12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異。

表2　血清PIVKA-II和AFP檢測肝癌的靈敏度和特異度比較

3　討論

肝癌是肝臟最常見的惡性腫瘤，發生率高，死亡率高［1，2］。我國為肝癌高發地區，全世界每年新發病例的55%發生在中國大陸，為我國癌癥死因的第二位。該病發病較為隱匿，患者發病初期多無明顯臨床癥狀，就診時病情多以發展至中晚期，手術切除率低，且術后易發生轉移、復發，對患者健康的影響極大［9，10］。隨著CT、MRI等影像技術發展，部分小肝癌患者得以早期發現，5年生存率有了一定提高。但影像技術用于臨床診斷肝癌仍受地區及經濟等多方面因素限制，在一定程度上對肝癌早期發現造成影響，導致患者喪失最佳治療時機。

甲胎蛋白作為臨床上診斷肝癌的常用標志物，其靈敏度及特異性偏低［3］，且其他疾病也可能引起AFP的升高，特別是慢性肝炎、肝硬化患者，還有其他系統腫瘤、妊娠等［11，12］。需要敏感性更高的腫瘤標志物協助肝癌早期診斷，以便提高肝癌手術切除率，降低術后復發率及轉移率，提高肝癌療效。

研究發現PIVKA-Ⅱ是肝細胞癌新型腫瘤標志物。若維生素K不足則極易對肝細胞合成凝血因子的現象造成影響，導致異常凝血酶原產生。對于肝癌患者，因癌細胞合成凝血酶原前體發生異常，導致凝血酶原前體羧化缺乏，進而極易導致PIVKA-Ⅱ的生成量增加［4］。PIVKA-Ⅱ是臨床上不可缺少的檢查，且具有較高的診斷特異性，影響因素少。只有在Vitamin K缺乏患者，如嚴重阻塞性黃疸及華法林給藥患者中可引起PIVKA-Ⅱ升高。有研究［13］顯示在肝癌檢測方面PIVKA-Ⅱ的靈敏度明顯高于AFP。本研究結果顯示：在肝癌患者診斷中，PIVKA-Ⅱ陽性率70.9%，而AFP陽性率41.7%。二者相比，PIVKA-Ⅱ診斷率更高，兩者存在顯著性差異（χ2=17.76，P＜0.01），結果與國外研究［5-7］一致。另外，本研究結果顯示：在慢性肝炎、肝炎肝硬化患者診斷中，PIVKA-Ⅱ陽性率7.1%，而AFP陽性率21.2%，兩者存在顯著性差異（χ2=12.81，P＜0.01），結果表明PIVKA-Ⅱ不易受慢性肝炎、肝炎肝硬化等非肝癌因素的影響，而AFP診斷肝癌容易受到慢性肝炎、肝炎肝硬化的影響，與國外相關研究一致。如Tanaka Y等［14］研究結果顯示PIVKA-Ⅱ在肝癌與慢性肝病的鑒別診斷具有顯著差異，可排除肝炎肝硬化等慢性肝病的影響，作為診斷肝癌的敏感指標。結合國內外研究及本研究結果顯示：PIVKA-Ⅱ在用于診斷肝癌的靈敏性以及特異性均優于AFP，且不易受慢性肝炎、肝炎肝硬化等非肝癌因素的影響，可作為肝癌早期篩查重要腫瘤標志物［15］。

PIVKA-Ⅱ與AFP是獨立的腫瘤標志物，二者無相互關聯。研究［15］已顯示PIVKA-Ⅱ與AFP水平無顯著相關性。基于這一點，可以通過聯合PIVKA-Ⅱ與AFP檢測來提高早期肝癌診斷。血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）其檢測肝癌的靈敏度為70.2%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測陽性的靈敏度為69.9%（表2）。聯合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測陽性的靈敏度84.5%，較單獨PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨AFP（χ2= 12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異，結果顯示PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測可提高早期肝癌診斷，與Stefaniuk P等［8］研究結果一致。在肝癌早期篩查中，聯合PIVKA-Ⅱ、AFP檢測可提高肝癌篩查率。

本研究尚存在不足，本研究未納其他系統腫瘤病例，在后續的研究中會加以補充。

綜上所述，研究結果顯示，血清PIVKA-Ⅱ作為肝癌篩查的血清標志物，其診斷靈敏度、特異性均高于AFP。而血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯合檢測能更好更快地對肝癌做出早期診斷，從而提高肝癌手術切除率，降低肝癌復發、轉移，改善預后。

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［中圖分類號］R735.7

［文獻標識碼］A

［文章編號］1673-9701（2016）19-0021-03

收稿日期：（2016-04-27）

Application of combined tests of serum PIVKA-Ⅱand AFP in the diagnosis of liver cancer

SHEN ConglongZHENG Liping
Department of Hepatobiliary Surgery，Fuzhou Hospital of Infectious Diseases，Fuzhou 350000，China

［Abstract］Objective To test the content of protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ（PIVKA-Ⅱ）and α-fetoprotein（AFP）in different patient samples，and to study the application of PIVKA-Ⅱand AFP in the diagnosis of liver cancer.Methods 259 serum samples of the patients who were hospitalized from September 2013 to January 2016 in our hospital were collected，and the contents of PIVKA-Ⅱand AFP were determined.Results（1）In 103 specimens of liver cancer，the positive rate of PIVKA-Ⅱwas 70.9%，and the positive rate of AFP was 41.7%.After chi-square test，both of the two were significantly different（χ2=17.76，P＜0.01）；（2）The sensitivity of serum PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）in testing liver cancer was 70.2%；the sensitivity of serum AFP（≥10 ng/mL）in testing liver cancer was 69.9%.The sensitivity of combined test of PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）and AFP（χ2=12.11，P＜0.05）in testing liver cancer was 84.5%，which was significantly different compared with single PIVKA-Ⅱor single AFP tests.Conclusion The sensitivity and specificity of PIVKA-Ⅱ in the diagnosis of liver cancer are better than AFP，which is able to significantly improve the sensitivity and specificity of liver cancer diagnosis.The combined test of PIVKA-Ⅱ and AFP is able to accomplish early diagnosis of liver cancer in a better and faster way.

［Key words］Liver cell cancer；AFP；Human plasma abnormal prothrombin；Diagnosis