新疆維、漢族宮頸癌相關細胞因子的表達及臨床意義*

(新疆醫科大學附屬腫瘤醫院放療中心，烏魯木齊 830011)

李亞偉，胡云輝，王若崢△

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論著·臨床研究

新疆維、漢族宮頸癌相關細胞因子的表達及臨床意義*

(新疆醫科大學附屬腫瘤醫院放療中心，烏魯木齊 830011)

目的對比新疆維、漢族HPV16陽性的宮頸癌(CC)患者外周血中1型輔助性T細胞(Th1)、Th2和Th17細胞主要分泌的細胞因子干擾素-γ(IFN-γ)、白細胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL17表達水平的差異性，并探討維、漢族CC患者細胞因子與臨床分期及腫瘤分化程度的相關性。方法采集66例(漢族22例，維吾爾族44例)經該院病理科明確診斷為CC患者治療前的血標本，使用Luminex檢測技術檢測IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17的水平，對比維、漢患者細胞因子的差異；根據患者臨床分期和腫瘤分化程度進行分組，在不同亞組中，比較維、漢患者細胞因子水平的差異性。結果維族CC組IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族CC組(P<0.05)；而維族Ⅰ～Ⅱ期CC組Th細胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10高于漢族Ⅰ～Ⅱ期CC組(P<0.05)；維族Ⅲ～Ⅳ期CC組Th細胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族Ⅲ～Ⅳ期CC組(P<0.05)；維族中高分化CC組Th細胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于漢族中高分化CC組(P<0.05)。結論在HPV16陽性的CC患者中，Th細胞分泌的細胞因子水平在維、漢組之間是存在差異性的，而這種差異性在Ⅲ～Ⅳ期宮頸癌和中高分化宮頸癌中更加明顯。

宮頸腫瘤；T淋巴細胞,輔助誘導；細胞因子類

宮頸癌(cervical cancer，CC)是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤，僅次于乳腺癌，成為全球導致婦女病死的第二大惡性疾病[1]。在我國，CC的患病率和病死率約占世界三分之一[2]。新疆是我國CC高發區之一，其中新疆維吾爾族(以下簡稱維族)CC患病率及病死率分別為459/10萬至526/10 萬和15.78/50萬，遠高于新疆地區漢族、哈薩克族、蒙古族等其他民族[3-5]。已有文獻報道，細胞因子在CC發生發展中起著重要作用[6-8]。在CC的腫瘤微環境中，1型輔助性T(type 1 T helper，Th1)、Th2及Th17分泌的相關細胞因子扮演著重要角色，并成為近年研究的重點及熱點[9]。但對于維、漢族間HPV16陽性的CC患者外周血中Th1、Th2、Th17主要分泌的細胞因子表達水平是否存在差異性，還未有文獻報道。本研究分析探討維、漢族CC患者Th細胞分泌的細胞因子差異性。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2014年6月本院收治的HPV16陽性的CC患者66例，CC臨床分期(FIGO，2009年)：Ⅰ～Ⅱ期26例(其中漢族5例，維族21例)，Ⅲ～Ⅳ期40例(其中漢族17例，維族23例)。CC病理分級：低分化鱗狀細胞癌13例(其中漢族6例，維族7例)，中高分化鱗狀細胞癌53例(其中漢族16例，維族37例)。納入標準：(1)病理確診為CC；(2)經HPV定性檢測為HPV16感染；(3)首次治療前的患者。排除標準：(1)急性或慢性感染性疾??；(2)合并其他腫瘤性疾病；(3)免疫相關疾病(如自身免疫性疾病、HIV陽性等)；(4)免疫藥物濫用史。根據民族分組，其中漢族CC(漢族組)22例，維族CC(維族組)44例。年齡35～81 歲，中位年齡54 歲。

1.2方法研究對象均簽署知情同意書，抽取未接受任何治療的患者空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，分離獲得的血漿在-80 ℃冷凍冰箱保存，根據Human Cytokine multi-plex(Bio-Rad，USA)分析和Luminex multi-analytic profiling (Bio-Rad，USA)技術說明書測定干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白細胞介素2(interleukin 2，IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平。

2　結　　果

2.1漢族、維族CC臨床特征比較對漢族組(22例)和維族組(44例)的年齡、臨床分期、分化程度進行統計學分析，結果顯示兩組患者在年齡(t=1.069，P=0.113)，臨床分期(χ2=3.839，P=0.060)，分化程度(χ2=0.587，P=0.444)，差異均無統計學意義，見表1。

表1　　漢族、維族CC臨床特征比較

2.2漢族、維族CC患者Th細胞分泌的細胞因子水平比較漢族組與維族組患者細胞因子水平比較：IFN-γ(t=2.730，P=0.008)、IL-2(t=3.661，P=0.001)、IL-4(t=3.625，P=0.001)、IL-6(t=2.928，P=0.005)、IL-10(t=3.270，P=0.002)、IL-13(t=3.413，P=0.001)、IL-17(t=3.638，P=0.001)，差異均有統計學意義。見表2。

2.3漢族、維族CC不同臨床分期Th細胞分泌細胞因子水平比較Ⅰ～Ⅱ期漢族CC組與Ⅰ～Ⅱ期維族CC組比較：IL-2(t=2.143，P=0.042)、IL-4(t=2.386，P=0.025)、IL-10(t=2.217，P=0.036)差異有統計學意義，IFN-γ(t=1.203，P=0.241)、IL-6(t=1.953，P=0.063)、IL-13(t=1.860，P=0.075)、IL-17(t=2.021，P=0.055)差異無統計學意義；Ⅲ～Ⅳ期漢族CC組與Ⅲ～Ⅳ期維族CC組比較：IFN-γ(t=2.437，P=0.020)、IL-2(t=2.869，P=0.007)、IL-4(t=2.642，P=0.012)、IL-6(t=2.117，P=0.041)、IL-10(t=0.393，P=0.022)、IL-13(t=0.725，P=0.010)、IL-17(t=3.046，P=0.004)差異均有統計學意義，見表3。

表2　　漢族、維族CC患者Th細胞分泌的細胞因子水平的 比較

2.4漢族、維族CC組織不同分化程度Th細胞分泌細胞因子水平比較 漢族低分化CC組與維族低分化CC組細胞因子比較：IFN-γ(t=1.609，P=1.136)、IL-2(t=1.590，P=0.140)、IL-4(t=1.239，P=0.241)、IL-6(t=1.223，P=0.247)、IL-10(t=1.495，P=0.163)、IL-13(t=1.184，P=0.261)、IL-17(t=1.568，P=0.145)差異均無統計學意義；漢族中高分化CC組與維族中高分化CC組細胞因子比較：IFN-γ(t=2.252，P=0.029)、IL-2(t=3.221，P=0.002)、IL-4(t=3.459，P=0.001)、IL-6(t=2.666，P=0.010)、IL-10(t=2.817，P=0.007)、IL-13(t=3.263，P=0.002)、IL-17(t=3.232，P=0.002)差異均有統計學意義，見表4。

表3　　維、漢族CC患者不同臨床分期Th細胞分泌細胞因子水平的比較±s，pg/mL)

a：P<0.05,與同等臨床分期漢族比較。

表4　　維、漢族CC患者不同病理分化Th細胞分泌細胞因子水平的比較±s，pg/mL)

a：P<0.05,與同等病理分化程度漢族比較。

3　討　　論

在腫瘤免疫微環境中，細胞因子是腫瘤發生發展過程中的重要介質[3,9]。其中 Th細胞是產生細胞因子最多的免疫細胞，Th細胞根據釋放細胞因子的不同，可分為不同亞型[10]。在特異性抗原刺激下，不同轉錄因子誘導Th細胞分化成Th1、Th2及Th17細胞，其中Th1類細胞因子，如IL-2、IFN-γ等，主要促進細胞免疫；Th2類細胞因子，如IL-4、IL-6、IL-10、IL-13等，主要促進體液免疫。而Th17是由Th0細胞在IL-6和 IL-23的刺激下分化而成的Th細胞，主要分泌IL-17等促炎性因子[9,11]。

對于不同民族之間Th細胞分泌的細胞因子的差異性，僅在一些免疫性疾病中有相關研究，在腫瘤疾病中還未見到相關文獻報道。Park等[12]選取高加索人群和非裔美國人作為試驗對象，研究不同民族健康女性細胞因子(IL-6和IFN-γ)之間的差異性，結果發現在健康女性中，非裔美國人IL-6(P<0.001)和IFN-γ(P<0.01)水平明顯高于高加索人群，差異有統計學意義，且這兩種細胞因子在不同民族間的差異與患乳腺癌的風險因素之間具有相關性。這與本研究發現維族CC和漢族CC不同種族之間Th細胞分泌的細胞因子存在差異性相似。李國昌等[13]曾探討細胞因子在中國漢族、維族、哈薩克族正常人群中的表達水平是否存在民族間的差異性，結果發現血清中TNF-α維族組明顯高于漢族組和哈薩克族組(P<0.01)，漢族組與哈薩克族組之間差異無統計學意義(P>0.05)；血清中TGF-β1漢族組與維族組之間差異有統計學意義(P<0.01)，漢族組與哈薩克族組之間差異也有統計學意義(P<0.05)，說明不同民族之間細胞因子水平有差異性。蔣建華等[14]曾對50例(其中漢族30例、維族20例)尋常型銀屑病患者血清中IL-2、IL-6及IFN-γ水平進行測定，探討它們在不同民族的銀屑病發病中的意義，維族組與漢族組對比發現漢族組IL-2、IFN-γ高于維族組，漢族組IL-6低于維族組。岳明明等[15]在探討新疆維吾爾自治區漢族和維族高尿酸血癥患者的相關影響因素的研究中，發現維族患者IL-6、TNF-α兩類炎性細胞因子低于漢族。本研究發現在CC患者中，維族組IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平均高于漢族組(P<0.05)，這與其他非腫瘤性疾病研究結果類似。

在CC腫瘤微環境中，細胞因子的產生和活動受多種因素的影響[16]。維、漢兩民族在生活飲食習慣上有著巨大的不同，相關文獻已報道在新疆地區維、漢CC患者臨床流行病特征上存在差異性[17]。基于維、漢族CC患者Th細胞分泌的細胞因子水平是否存在差異性，目前還未見文獻報道。所以本研究選取CC中感染率最高的HPV16陽性的患者，按其民族不同，分為漢族組和維族組，分別對其外周血中Th1、Th2和Th17細胞分泌的主要細胞因子水平進行測定，將漢族組與維族組患者細胞因子進行比較，發現Th1細胞分泌的IL-2、IFN-γ，Th2細胞分泌的IL-4、IL-6、IL-10、IL13及Th17細胞分泌的IL-17在維族組均高于漢族組，差異均有統計學意義(P<0.05)。這與前人在其他免疫性疾病中研究報道兩民族細胞因子水平存在一定差異性的研究結果相符。由于在CC中隨著臨床分期和分化程度的改變，一些Th分泌的細胞因子水平也會發生相應的改變[18-21]。本研究按臨床分期的不同，將患者分為Ⅰ～Ⅱ期CC組和Ⅲ～Ⅳ期CC組，對Ⅰ～Ⅱ期CC組中維、漢族Th細胞分泌的細胞因子水平進行比較，結果顯示Th細胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10維族CC組高于漢族CC組(P<0.05)，而對Ⅲ～Ⅳ期CC組中維、漢族Th細胞分泌的細胞因子水平進行比較，結果顯示Th細胞主要分泌的幾種細胞因子維族CC組均高于漢族CC組，差異有統計學意義(P<0.05)。這說明維、漢族之間細胞因子水平的差異性，在晚期CC患者中更加普遍。本研究又將這些患者按腫瘤分化程度進行分組，分為低分化CC組和中高分化CC組，并分別對各組中維、漢族細胞因子水平對比分析，最終結果顯示，在宮頸低分化CC中維、漢族之間Th細胞分泌的細胞因子水平差異均無統計學意義，而在宮頸中高分化CC癌中維、漢族之間Th細胞分泌的細胞因子水平差異均有統計學意義(P<0.05)，且維族組細胞因子水平均高于漢族組。不難看出維、漢細胞因子水平的差異性還與腫瘤分化程度有關。

綜上所述，本研究發現在HPV16陽性的CC患者中，Th細胞分泌的細胞因子水平在維、漢之間存在差異性，而這種差異性與臨床分期和組織分化程度均有關系。深入地研究腫瘤患者中兩民族間細胞因子水平的差異性，有助于深化對新疆地區CC患者疾病病情轉歸的認識并對指導臨床治療具有一定臨床意義。

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Expression and clinical significance of cervical cancer related cytokines in Xinjiang Uyghur and Han nationalities*

LiYawei,HuYunhui,WangRuozheng△

(RadiotherapyCenter，AffiliatedTumorHospital，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi,Xinjiang830011，China)

ObjectiveTo compare the differences of cytokines IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 expression levels mainly secreted by peripheral blood Th1,Th2 and Th17 cells and to investigate the correlation between the cytokines in the Han and Uyghur cervical cancer patients with the clinical stage and tumor differentiation degree.MethodsThe blood samples in 66 cases of pathologically diagnosed cervical cancer (Han in 22 cases,Uyghur in 44 cases) before treatment in our hospital were collected.The concentrations of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 were measured by using Luminex assay，then the differences of cytokines were compared between Han and Uyghur patients;according to the clinical stage and tumor differentiation degree,the grouping was performed,then the differences of cytokines in different subgroups were compared between Han and Uyghur cervical cancer patients.ResultsThe levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 in the Uyghur cervical cancer group were higher than those in the Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IL-2,IL-4 and IL-10 secreted by Th cells in the stage Ⅰ-Ⅱ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅰ-Ⅱ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17secreted by Th cells in the stage Ⅲ-Ⅳ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅲ-Ⅳ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 secreted by Th cells in middle to high differentiation Uyghur cervical cancer group were higher than those in middle to high differentiation Han cervical cancer group(P<0.05).ConclusionIn the HPV16-positive cervical cancer patients,the concentrations of cytokines secreted by Th cells are different between Uyghur group and Han group，these differences are more significant in the stage Ⅲ-Ⅳ cervical cancer and in middle to high differentiated cervical cancer.

uterine cervical neoplasms;T-lymphocytes,helper-inducer;cytokines

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.12.025

科技部國際合作項目(2012DFA31560)。作者簡介：李亞偉(1990-)，碩士在讀，主要從事腫瘤放射治療基礎與臨床研究?！?/p>

，E-mail:wrz8526@163.com。

李亞偉，胡云輝，王若崢△

R737.33

A

1671-8348(2016)12-1662-04

2015-11-08

2015-12-10)