低溫下冬小麥SOD及APX酶相關(guān)基因的表達(dá)分析

陳 露，李卓夫，王曉楠，付連雙，孫瑩璐

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030)

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低溫下冬小麥SOD及APX酶相關(guān)基因的表達(dá)分析

陳 露，李卓夫，王曉楠，付連雙，孫瑩璐

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030)

為進(jìn)一步揭示寒地冬小麥抗寒的生理機(jī)制，以抗寒性差異較大的“東農(nóng)冬麥1號(hào)”和“中國(guó)春”為材料，測(cè)定不同低溫冷凍條件下小麥超氧化物歧化酶(SOD)相關(guān)基因 TSOD-1、 TSOD-2、 TSOD-3以及抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)相關(guān)基因 HAPX-1、 HAPX-2、 HAPX-3的表達(dá)差異。結(jié)果表明， TSOD-1、 TSOD-2、 TSOD-3、 HAPX-2和 HAPX-3基因在特定低溫條件下于東農(nóng)冬麥1號(hào)中的表達(dá)量明顯高于中國(guó)春，而 HAPX-1基因在東農(nóng)冬麥1號(hào)中的表達(dá)量幾乎均低于中國(guó)春。其中， TSOD-3基因在凍處理初期(低溫馴化30 d及 -10 ℃ 2 h)于東農(nóng)冬麥1號(hào)中的表達(dá)量相對(duì)于中國(guó)春達(dá)到最大，分別是中國(guó)春中的8.63和11.78倍； HAPX-2和 HAPX-3基因均在冷凍期(-12 ℃ 2 h)于東農(nóng)冬麥1號(hào)中的表達(dá)量相對(duì)于中國(guó)春達(dá)到最大，分別是中國(guó)春中的3.12和21.22倍。因此，初步推斷 TSOD-3、 HAPX-2和 HAPX-3基因是參與低溫響應(yīng)的重要基因。其中， TSOD-3基因在冷脅迫初期起主要作用， HAPX-2和 HAPX-3基因在持續(xù)冷凍下起主要作用。

小麥；低溫；qRT-PCR；超氧化物歧化酶(SOD)；抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)

植物在遭受低溫脅迫時(shí)會(huì)發(fā)生自由基的積累，細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生和清除的平衡系統(tǒng)遭到破壞，造成植物細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化，破壞了細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而引起細(xì)胞膜的非正常代謝。為了應(yīng)對(duì)一系列的變化，植物細(xì)胞存在復(fù)雜的抗過(guò)氧化酶保護(hù)系統(tǒng)，如超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)、單脫氫壞血酸還原酶(MDHAR)、脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)和谷胱甘肽還原酶(GR)等。當(dāng)植物受到低溫脅迫時(shí)，這些物質(zhì)可以相互協(xié)同除去植物體內(nèi)的自由基，保護(hù)自身正常代謝。在這些抗氧化酶系統(tǒng)中，SOD作為第一個(gè)參與反應(yīng)的酶，處于活性氧清除反應(yīng)的核心地位，可催化比其他活性氧毒性都大的超氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)，是植物體內(nèi)活性氧的關(guān)鍵抗氧化酶[1]。SOD普遍存在于植物界并且具有多種類型，是一種含金屬的抗氧化酶類。目前已知高等植物中有3類SOD酶，包括線粒體Mn-SOD、葉綠體Fe和Cu/Zn-SOD以及細(xì)胞質(zhì)Cu/Zn-SOD。不同來(lái)源的Cu/Zn-SOD在氨基酸序列上具有較高的同源性，結(jié)構(gòu)上有高度的同一性[2]。Gupta等[3]將豌豆Cu/Zn-SOD的cDNA轉(zhuǎn)化到煙草植株中，當(dāng)目的基因大量表達(dá)后提高了煙草植株對(duì)光抑制的抗性，而且光合速率比對(duì)照提高了20%；Samis等[4]將Mn-SOD導(dǎo)入紫花苜蓿中，基因大量表達(dá)后，提高了轉(zhuǎn)基因植物的膜穩(wěn)定性，增加了越冬成活率，同時(shí)提高了植物的生物量。APX是植物體內(nèi)尤其是葉綠體中清除H2O2的關(guān)鍵酶[5]。Davletova等[6]的研究發(fā)現(xiàn)，在擬南芥中，如果缺乏細(xì)胞質(zhì)APX時(shí)，會(huì)導(dǎo)致葉綠體和過(guò)氧化物酶體的H2O2清除系統(tǒng)瓦解，從而不能清除光合作用和光呼吸中產(chǎn)生的H2O2，導(dǎo)致H2O2含量升高，蛋白發(fā)生氧化，其中AtAPx1同工酶是擬南芥消除活性氧的重要成員。目前，APX序列已在菠菜、豌豆、擬南芥、西紅柿、水稻和馬鈴薯等植物中分離獲得[7-9]。轉(zhuǎn)基因植物中APX的過(guò)量表達(dá)，已被證明可以提高轉(zhuǎn)基因植物的抗性。Wang等[10]研究表明，將一個(gè)細(xì)胞質(zhì)APX(cAPX)轉(zhuǎn)入番茄中過(guò)量表達(dá)，轉(zhuǎn)基因番茄的抗寒和抗鹽能力得到了顯著提高。此外，本課題組前期的研究表明，植物在遭遇低溫及其他逆境脅迫時(shí)會(huì)造成體內(nèi)代謝異常，這些異常代謝會(huì)引起體內(nèi)抗氧化酶的活性變化及相關(guān)基因的活躍表達(dá)。馮玉磊[11]的研究表明，低溫會(huì)影響冬小麥體內(nèi)SOD、POD、CAT及APX含量及膜質(zhì)過(guò)氧化程度。抗寒性好的品種SOD活性及APX含量均增加較快。同時(shí)，前期有關(guān)SOD及APX相關(guān)的生理試驗(yàn)結(jié)果表明，兩種酶在抗寒性不同的品種中活性變化差異顯著。但目前有關(guān)這兩種酶相關(guān)基因表達(dá)分析方面的研究卻甚少。鑒于此，本研究以抗寒性差異較大的“東農(nóng)冬麥1號(hào)”和“中國(guó)春”為材料，測(cè)定不同低溫冷凍條件下SOD相關(guān)基因 TSOD-1、 TSOD-2、 TSOD-3以及APX相關(guān)基因 HAPX-1、 HAPX-2、 HAPX-3的表達(dá)差異，旨在明確低溫下起關(guān)鍵作用的抗氧化酶基因，為揭示寒地冬小麥的抗寒機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1供試材料及其處理

供試材料為抗寒性差異顯著的兩個(gè)小麥品種“東農(nóng)冬麥1號(hào)”(強(qiáng)抗寒性)和“中國(guó)春”，均由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)小麥遺傳育種研究室保存。

選取兩個(gè)參試品種飽滿的種子，種植于長(zhǎng)30 cm、寬25 cm、高10 cm的盆栽盒子中，每盆種植100粒，均勻分布，每個(gè)品種種10盆。置于自然條件下生長(zhǎng)，待幼苗生長(zhǎng)至三葉一心期時(shí)，將盆栽轉(zhuǎn)移到光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行冷馴化處理(最大光照強(qiáng)度為2 000 lx，光周期10 ℃、12 h，暗周期4 ℃、12 h)，冷馴化30 d后將盆栽轉(zhuǎn)移至低溫冰箱進(jìn)行冷凍處理。具體處理見(jiàn)表1。CK為對(duì)照，A～G為7個(gè)不同處理。每個(gè)處理對(duì)應(yīng)1個(gè)取樣時(shí)期，每次取樣量1～2盆(視材料長(zhǎng)勢(shì))，將泥土清洗干凈后吸干水分，去除根部及葉片，留取分蘗節(jié)至莖部約2 cm處組織，于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄

參照關(guān) 濤等[12]所用試劑及方法對(duì)不同處理樣品進(jìn)行總RNA提取及其RNA反轉(zhuǎn)錄。

1.3實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析

根據(jù)本課題組從抗寒性不同的兩個(gè)冬小麥品種轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的基因表達(dá)譜里選取的差異基因 TSOD-1(GeneBank:AF092524.1)、 TSOD-2(GeneBank:U69536.1)、 TSOD-3(GeneBank:JX398977.1)、 HAPX-1(GeneBank:AJ006358.1)、 HAPX-2(GeneBank:AF411228.1)和 HAPX-3(GeneBank:AF527606.1)序列，利用Primer 5軟件設(shè)計(jì)qRT-PCR引物(表2)，并交由華大基因NCBI北京公司合成。以1.2中得到的cDNA為模板，以GAPDH基因?yàn)閮?nèi)參，進(jìn)行qRT-PCR分析。反應(yīng)體系(20 μL)：Real Master Mix 10 μL，RNase-free H2O 6.8 μL，引物(10 μmol·L-1)0.8 μL，DyeⅡ 0.4 μL，模板(0.5 μg·μL-1) 2 μL。反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性30 s；94 ℃變性5 s，50～60 ℃退火15 s(各對(duì)引物具體退火溫度見(jiàn)表2)，72 ℃延伸10 s，40個(gè)循環(huán)；65 ℃ 15 s生成溶解曲線；40 ℃冷卻30 s。每個(gè)樣品設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果計(jì)算采用2-ΔΔCt法[12]。計(jì)算所得全部數(shù)據(jù)將處理CK矯正為1作為相對(duì)表達(dá)量，其他數(shù)據(jù)是它的相對(duì)倍數(shù)。

1.4數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)整理及圖表的制作采用Excel 2007。

2　結(jié)果與分析

2.1不同處理下SOD相關(guān)基因的表達(dá)

2.1.1不同處理下 TSOD-1基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖1)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 TSOD-1基因在處理F下上調(diào)表達(dá)最明顯，為對(duì)照的6.69倍，其次是在處理C下，為對(duì)照的6.36倍，在處理 A、B下與對(duì)照差異不顯著。中國(guó)春中 TSOD-1基因在F處理下也表現(xiàn)為明顯上調(diào)，為對(duì)照的6.39倍，在處理B下呈現(xiàn)出下調(diào)表達(dá)，僅為對(duì)照的0.44倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)二者的表達(dá)量差異在B處理時(shí)較為明顯。

表1　樣品編號(hào)及處理

表2　本研究中qRT-PCR分析所用引物

2.1.2不同處理下 TSOD-2基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖2)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 TSOD-2基因在處理A、C、D和F下上調(diào)表達(dá)明顯，分別為對(duì)照的5.98、3.90、7.76和2.84倍。中國(guó)春中 TSOD-2基因均為上調(diào)表達(dá)，但在處理A、C、D、E和F下表達(dá)量上調(diào)較為明顯，分別為對(duì)照的2.81、2.95、3.32、2.85和4.10倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)二者的表達(dá)量差異在處理A、D和E下較為明顯，其中，在處理A和D下，東農(nóng)冬麥1號(hào)表達(dá)量為中國(guó)春的2.13和2.34倍，在處理E下，東農(nóng)冬麥1號(hào)表達(dá)量為中國(guó)春的0.46倍。

a：東農(nóng)冬麥1號(hào)的相對(duì)表達(dá)量；b：中國(guó)春的相對(duì)表達(dá)量；c：東農(nóng)冬麥1號(hào)相對(duì)于中國(guó)春的表達(dá)量；*和**分別表示在5%和1%水平下與CK差異顯著。下同。

a:The relative expression of Dongnongdongmai 1;b:The relative expression of Chinese Spring;c:The relative expression of Dongnongdongmai 1 compared to Chinese Spring;* and ** indicated significant difference with CK at 5% and 1% significance level,respectively.The same as in following figures.

圖1 TSOD-1基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

Fig.1Relative expression of TSOD-1 gene under various treatments detected by qRT-PCR

圖2　 TSOD-2基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

2.1.3不同處理下 TSOD-3基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖3)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 TSOD-3基因在處理B、C下迅速大量上調(diào)表達(dá)，分別為對(duì)照的12.65和14.17倍。中國(guó)春中 TSOD-3基因在處理A、D和E下表達(dá)量分別為對(duì)照的6.48、6.14和4.18倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)二者的表達(dá)量差異在C處理下最大，東農(nóng)冬麥1號(hào)表達(dá)量為中國(guó)春的11.78倍，在處理B下次之，為8.63倍。

2.2不同處理下APX相關(guān)基因的表達(dá)

2.2.1不同處理下 HAPX-1基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖4)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 HAPX-1基因在處理B下下調(diào)表達(dá)最明顯，為對(duì)照的0.41倍。中國(guó)春中 HAPX-1基因在處理B下是對(duì)照的2.98倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)東農(nóng)冬麥1號(hào)在任何處理下均未明顯高于中國(guó)春，除處理B和C外，其他處理?xiàng)l件下二者并沒(méi)有明顯差異。

2.2.2不同處理下 HAPX-2基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖5)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 HAPX-2基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量變化范圍為0.44～6.88，在處理F下達(dá)到最大值，為對(duì)照的6.88倍。中國(guó)春中 HAPX-2基因在不同處理下呈現(xiàn)出不同程度的上調(diào)表達(dá)，變化范圍為2.68～7.41，在處理C下達(dá)到最大值，為對(duì)照的7.41倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)東農(nóng)冬麥1號(hào)在處理B、D和F下明顯高于中國(guó)春，前者分別為后者的2.72、3.12和2.56倍。

圖3　 TSOD-3基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

圖4　 HAPX-1基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

圖5　 HAPX-2基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

2.2.3不同處理下 HAPX-3基因的表達(dá)

qRT-PCR分析結(jié)果(圖6)表明，東農(nóng)冬麥1號(hào)中 HAPX-3基因在不同處理下呈現(xiàn)出不同程度的上調(diào)表達(dá)，在處理A、B和D下上調(diào)表達(dá)最明顯，分別是對(duì)照的4.39、5.68和8.80倍。中國(guó)春中 HAPX-3基因在低溫馴化期和冷凍處理初期上調(diào)表達(dá)，在B處理下上調(diào)表達(dá)明顯，為對(duì)照的7.41倍，但在D處理下顯著下調(diào)，僅為對(duì)照的0.41倍，當(dāng)持續(xù)到E處理時(shí)，僅為對(duì)照的0.24倍。比較兩小麥品種相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)二者的表達(dá)量差異在D處理下最大，東農(nóng)冬麥1號(hào)的表達(dá)量為中國(guó)春的21.22倍。

3　討 論

在冬季寒地冬小麥地上部葉片全部死亡，只有分蘗節(jié)能夠安全越冬和返青[14]，因此選用小麥分蘗節(jié)作為研究材料。在低溫脅迫下，植物體內(nèi)自由基會(huì)大量積累，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)活性氧的積累和清除平衡遭到破壞，大量的活性氧積累，從而引起細(xì)胞的非正常代謝甚至導(dǎo)致植物死亡。因此，為了應(yīng)對(duì)這些變化，植物細(xì)胞存在復(fù)雜的抗氧化保護(hù)系統(tǒng)。其中，超氧化物歧化酶(SOD)和抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)是其中非常重要的兩種活性氧清除酶，生物和非生物脅迫因子可大量誘導(dǎo)SOD和APX基因表達(dá)。因此，對(duì)SOD和APX相關(guān)基因的研究可以為今后探明小麥抗逆的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

圖6　 HAPX-3基因在不同處理下的相對(duì)表達(dá)量

逆境下植物產(chǎn)生的H2O2主要分布在葉綠體和胞質(zhì)中，APX主要清除植物體內(nèi)產(chǎn)生的H2O2。前人已有報(bào)道，提高APX活性可以通過(guò)過(guò)表達(dá)的APX基因?qū)崿F(xiàn)[14-15]。張麗君等[16]報(bào)道，導(dǎo)入APX基因能提高菊苣的抗?jié)B透脅迫能力，而野生型植株在NaCl和甘露醇的滲透脅迫下不能存活。伍小兵和成雨潔[17]將APX基因轉(zhuǎn)化至甘薯中，甘薯幼苗在5 ℃下冷脅迫12 h后植株的長(zhǎng)勢(shì)、膜透性、APX和CAT活性以及光合活性均顯著地高于未轉(zhuǎn)化的甘薯植株。曾秀存等[18]對(duì)比分析抗寒性不同的冬油菜的APX基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)低溫下抗寒品種的APX基因的表達(dá)量要顯著高于不抗寒品種，其最大表達(dá)量在-4 ℃時(shí)出現(xiàn)。本研究中，在低溫下東農(nóng)冬麥1號(hào)中 HAPX-2 和 HAPX-3 基因的表達(dá)量顯著高于中國(guó)春，而 HAPX-1 基因的表達(dá)量低于中國(guó)春，推測(cè)低溫下 HAPX-2 和 HAPX-3 基因的表達(dá)量與APX活性顯著正相關(guān)， HAPX-1 基因的表達(dá)量與APX活性顯著負(fù)相關(guān)。 HAPX-2 和 HAPX-3 基因在東農(nóng)冬麥1號(hào)相對(duì)于中國(guó)春中的表達(dá)量在4 ℃低溫馴化初期為CK的2倍左右，說(shuō)明適度的低溫會(huì)刺激這兩個(gè)基因的表達(dá)，但是在低溫馴化結(jié)束后，再進(jìn)行C處理(-10 ℃ 2 h)時(shí)， HAPX-2 和 HAPX-3 基因表達(dá)量均降低，而再次給予D處理(-12 ℃ 2 h)時(shí)東農(nóng)冬麥1號(hào)中 HAPX-2 和 HAPX-3 基因的表達(dá)量上升，而中國(guó)春中的表達(dá)量則降低，同時(shí)東農(nóng)冬麥1號(hào)相對(duì)于中國(guó)春中這2個(gè)基因表達(dá)量達(dá)到最大值，分別為中國(guó)春的3.12倍和21.22倍，說(shuō)明冷凍條件下，這兩個(gè)基因不屬于應(yīng)激性表達(dá)基因，在適應(yīng)一段冷凍低溫后，抗寒品種中 HAPX2 和 HAPX3 基因高表達(dá)，而不抗寒品種不具備這個(gè)特性，這可能是區(qū)分兩者抗寒性的指標(biāo)之一，尤其是 HAPX-3 基因值得進(jìn)一步功能研究。

SOD是一種氧自由基清除劑，它降低自由基的毒害是通過(guò)催化超氧陰離子的歧化反應(yīng)，從而維持植物細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性[19]。曾秀存等[20]在冬油菜中研究表明，葉片中Cu/Zn-SOD基因在4 ℃下上調(diào)表達(dá)，在-4 ℃下調(diào)表達(dá)，而根中該基因在-4 ℃仍上調(diào)表達(dá)且達(dá)到最高。曾秀存等[21]在冬油菜中還發(fā)現(xiàn)，4 ℃低溫脅迫Fe-SOD基因上調(diào)表達(dá)，而在-4 ℃和-8 ℃下，F(xiàn)e-SOD基因表達(dá)受到抑制。本研究中， TSOD-1 、 TSOD-2 、 TSOD-3 基因在-10 ℃條件下同樣上調(diào)表達(dá)，這與曾秀存的研究有所差異，說(shuō)明本研究中的SOD基因均對(duì)冷凍有積極響應(yīng)。 TSOD-1基因在東農(nóng)冬麥1號(hào)相對(duì)于中國(guó)春中的表達(dá)量于低溫馴化30 h及-10 ℃ 2 h的條件時(shí)顯著高于CK，而在持續(xù)冷凍條件下出現(xiàn)顯著低于CK，說(shuō)明 SOD-1 基因僅在在冷凍初期起作用。 TSOD-2 基因在低溫馴化初期(4 ℃ 6 h)和封凍初期(-10 ℃ 2 h，-12 ℃ 2 h)于兩個(gè)品種中均高表達(dá)，且在低溫馴化初期和封凍初期于抗寒品種中的表達(dá)量均高于不抗寒品種，說(shuō)明該基因?yàn)榈蜏貞?yīng)激響應(yīng)基因，且在抗寒品種中對(duì)溫度響應(yīng)更敏感。 TSOD-3 基因在低溫馴化30 d和-10 ℃ 2 h下于抗寒品種中高表達(dá)，而在不抗寒品種中于低溫馴化初期高表達(dá)，且在低溫馴化30 d和-10 ℃ 2 h于抗寒品種中的表達(dá)量為不抗寒品種的8.63和11.78倍，說(shuō)明 TSOD-3 基因在抗寒品種中在抗寒過(guò)程中的關(guān)鍵基因，其功能值得進(jìn)一步研究。

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Expression of Genes Related to SOD and APX Enzymes in Winter Wheat at Low Temperature

CHEN Lu,LI Zhuofu,WANG Xiaonan,FU Lianshuang,SUN Yinglu

(College of Agriculture,Northeast Agricultural University,Harbin,Heilongjiang 150030,China)

In order to clarify the expression of genes related to antioxidant enzymes under cryogenic conditions,and reveal the physiological mechanism of cold resistance in winter wheat,Dongnongdongmai 1 and Chinese Spring,with distinguishing cold resistance were used as materials to identify the expression differences of TSOD-1, TSOD-2, TSOD-3 related to superoxide dismutase(SOD) and HAPX-1, HAPX-2, HAPX-3 related to ascorbate peroxidase(APX) under different low temperature.Results showed that,under specific low temperature treatment,the expression level of TSOD-1, TSOD-2, TSOD-3, HAPX-2 and HAPX-3 genes in Dongnongdongmai 1 were significantly higher than that in Chinese Spring,while the expression level of HAPX-1 gene in Dongnongdongmai 1 was almost lower than that in Chinese Spring.Among them,the relative expression level of TSOD-3 gene in Dongnongdongmai 1 with respect to that in Chinese Spring reached the maximum at the beginning of the cold processing (cold acclimation 30 d,-10 ℃ for 2 h),with a ratio of 8.63 and 11.78,respectively.However,the relative expression level of HAPX-2 and HAPX-2 gene in Dongnongdongmai 1 relative to that in Chinese Spring reached the maximum at the frozen period (-12 ℃ for 2 h),with a ratio of 3.12 and 21.22,respectively.It is conclued that TSOD-3, HAPX-2,and HAPX-3 genes are important genes involved in cold response.Of them, TSOD-3 gene plays a major role in the early stage of cold stress,and HAPX-2 and HAPX-3 continue to play a major role in refrigeration.

Wheat; Chilling; qRT-PCR; Superoxide dismutase(SOD); Ascorbate peroxidase(APX)

2016-01-25

2016-04-18

黑龍江省博士后科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(LBH-Q14026)；東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)科團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目

E-mail：282339738@qq.com

李卓夫(E-mai:zflicn@163.com)

S512.1；S330

A

1009-1041(2016)08-0982-07

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-08-01

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1359.S.20160801.1120.004.html