IFNα21與冠狀動脈硬化程度關系的研究

張明宇，劉曉霞，王巖，李建飛，張雪巖，孫涵文

哈爾濱醫科大學附屬第四醫院心內科，黑龍江哈爾濱 150001

IFNα21與冠狀動脈硬化程度關系的研究

張明宇，劉曉霞，王巖，李建飛，張雪巖，孫涵文

哈爾濱醫科大學附屬第四醫院心內科，黑龍江哈爾濱 150001

目的 染色體9p21區域是冠心病關聯的疾病易感位點，但其具體作用機制仍不明確，該文旨在研究IFNα21表達和冠狀動脈硬化嚴重程度之間的關聯。方法 連續選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫科大學附屬四院心內科住院并行冠狀動脈造影的病人200例，根據影像學結果分為4組（每組50例），對照組：冠脈內膜光滑無狹窄；實驗1組，冠脈血管狹窄為50%～75%；實驗2組，冠脈血管狹窄＞75%；實驗3組，冠脈血管完全閉塞。采用IFNA21特異性ELISA套裝盒測試和特異性IFNα21抗體測定INFα21濃度。結果 對照組IFNα21蛋白的濃度為（49.32±10.71）μg/L，實驗1組為（51.38±8.23）μg/L（與對照組比較P=0.087），實驗2組為（47.11±11.36）μg/L（與對照組比較 P=0.096），實驗 3組為（57.03±13.31）μg/L（與對照組比較P=0.065），INFα21表達和冠狀動脈硬化程度之間差異無統計學意義(P＜0.05)。結論 干擾素α21表達同冠心病發病率和冠狀動脈硬化嚴重程度均無相關性，染色體9p21造成冠心病高發并不是由I型INF表達介導的。

染色體9p21；冠心病；INFα21蛋白；冠脈造影；高危因素

冠心病作為一種由環境因素和遺傳因素共同作用導致的復雜疾病,是世界范圍內死亡和致殘的首要原因。全基因組關聯研究發現了很多與冠心病相關聯的疾病易感位點和區域[1-3]，但染色體9p21區域與冠心病之間具體作用機制仍不明確，可能是多因素共同起作用。Harismendy等[4]研究提示染色體9p21區域造成冠狀動脈粥樣硬化機制可能和干擾素α21（IFNα21）途徑有關。該文連續選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫科大學附屬四院心內科住院并行冠狀動脈造影的病人，旨在研究染色體9p21區域、IFNα21和冠狀動脈硬化程度的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

連續選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫科大學附屬四院心內科住院并行冠狀動脈造影的病人，排除標準：①惡性腫瘤患者；②外周血管疾病患者；③急性感染患者；④急性心肌梗死患者；⑤急性肺栓塞患者；⑥嚴重肝腎功能不全的患者。根據冠脈造影結果將入組患者分為四組：對照組：50例管壁光滑無動脈硬化斑塊；實驗1組：50例冠脈造影血管狹窄>50%；實驗2組：50例冠脈造影血管狹窄>75%；實驗3組：50例冠脈造影血管完全閉塞。

1.2 實驗方法

入組患者采血經過3 000 rpm離心5 min后于-80°保存，統一測定IFNα21蛋白。①采用冠脈造影評估冠脈血管狹窄的嚴重程度;②采用 E96966Hu IFNα21特異性ELISA套裝盒測試IFNα21，將凍結血清融解后，混勻充分，實驗板條設置樣本孔和標準品孔，標準品孔中加入不同濃度標準品50 μL。樣本孔先加待測血清10 μL，再加樣本稀釋液40 μL。除空白孔外，標準品孔和樣本孔中各加入過氧化物酶標記的100 μL檢測抗體，封板膜封住反應孔，37℃恒溫箱溫育60 min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置2 min，甩去洗滌液，吸水紙上進行拍干，重復洗板5次。每孔加入底物A 50 μL，再加入底物B 50 μL，37℃避光孵育15 min。每孔加入終止液50 μL，15 min內，在450 nm波長處測定各孔OD值。繪制標準曲線圖，通過曲線方程計算各樣本濃度值；③受試者抽血前12 h禁食水,化驗前2周保持清淡飲食。分離血清,使用全自動生化檢測儀,氧化酶法測定總膽固醇、低密度脂蛋白、血壓、血糖[5]。④肥胖指數（BMI）=體重（kg）÷身高（m）的平方。

1.3 觀察指標

年齡、性別、總膽固醇、低密度脂蛋白、血壓、血糖、肥胖指數、吸煙、家族史等。

1.3 統計方法

采用SPSS 11.5統計學軟件,組間計量資料比較采用t檢驗，P＜0.05代表差異有統計學意義，用多變量回歸分析IFNα21蛋白與冠心病發生及冠狀動脈病變嚴重程度之間的關聯。

2 結果

2.1 各組基礎臨床資料分析結果

各組間BMI、膽固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯、吸煙史、高血壓病史、糖尿病史等進行統計分析，實驗各組中低密度脂蛋白、吸煙史率、高血壓病患病率及糖尿病患病率與對照組差異有統計學意義（P<0.05）。年齡、性別、BMI指數、總膽固醇和甘油三酯之間各組差異無統計學意義。見表1、表2。

表1 各組臨床資料比較

表2 各組臨床資料比較

2.2 IFNα21濃度與冠狀動脈粥樣硬化程度分析

結果顯示IFNα21蛋白的濃度未隨冠狀動脈粥樣硬化程度加重而增加。采用多變量回歸分析校正年齡，性別，吸煙，肥胖指數，血脂，血壓變量后，對照組IFNα21蛋白的濃度為(49.32±10.71)μg/L，實驗 1組IFNα21蛋白的濃度為(51.38±8.23)μg/L（與對照組比較P=0.087），實驗2組IFNα21蛋白的濃度為(47.11±11.36)μg/L（與對照組比較P=0.096），實驗3組 IFNα21蛋白的濃度為 (57.03± 13.31)μg/L（與對照組比較P=0.065）(見圖1)。

圖1 各組中IFNα21蛋白的濃度

3 討論

冠心病作為一種由環境因素和遺傳因素共同作用導致的復雜疾病,是世界范圍內死亡和致殘的首要原因。根據世界衛生組織預測報告,2030年世界缺血性心臟病的死亡人數將占總死亡人數的13.1%。最新的冠心病全基因組關聯研究在世界范圍取得了可喜成果,發現了很多與冠心病相關聯的疾病易感位點和區域，包括rs10757278, rs1333049,rs11515,rs518394,rs564309,rs2811712,和rs10811661[6-7]。并且在多中心的研究中得到了相同的結果，這種風險因素與已知的風險因素如高血脂、高血壓、糖尿病、肥胖癥、炎性因子均無關系，說明這是與冠心病相關的一種新的生物學途徑。白種人中25%具有這些危險基因，這些人患冠心病的幾率比非攜帶者高2倍[8]。我國的一個研究小組也報道了在中國漢族人群中的研究，發現中國漢族人群冠心病發病同樣和該區域相關[9-11]。

所有研究中，9p21風險等位基因與冠心病之間具體作用機制仍不明確[12]，可能是多因素共同起作用。因此要進一步研究9p21風險等位基因與冠心病之間關聯機制。一些研究[13-14]報道了在9p21冠心病風險基因近端的CDKN2A和CDKN2B參與了調節，那么9p21冠心病風險基因遠端的I型INF基因串也可能參與了造成冠心病發病率增高的調節。該實驗中在各組的基線資料統計中年齡、性別、BMI、總膽固醇和甘油三酯之間差異無統計學意義，同時該文采用多變量回歸分析校正低密度脂蛋白、吸煙、血壓和糖尿病等危險因素變量后，冠心病患者及不同冠脈狹窄程度與對照組比較，結果顯示差異無統計學意義。說明IFNα21表達和冠心病發病率及動脈硬化狹窄程度之間無相關性。Erridge等[15]研究結果也顯示9P21與冠心病易感性并非由I型干擾素反應所調控。Christopher等[16]研究結果顯示增加I型干擾素的表達與冠心病的發生率之間無相關性。這些實驗的設計雖然各不相同，Erridge等研究了冠心病患者的I型干擾素mRNA、蛋白和生物學活性的表達幾個方面，Christopher等研究了22233例患者和64762例對照者的I型干擾素表達與rs10516487,rs3131379 and rs7574865(OR=1.00,95%CI 0.98～1.02)無相關性，該論文分析了rs10757278與冠心病嚴重程度之間的關系也得到了陰性結果，但得出結果和結論與該實驗的研究結果相同，所以9p21冠心病風險基因遠端的I型INF基因串并沒有參與造成冠心病發病率增高。

4 結論

染色體9p21造成冠心病高發并不是由I型INF表達介導的。

（

）

[1]李建飛，房秋菊，張明宇.9P21染色體單核苷酸多態性與冠心病相關性的研究進展[J].中國現代醫生,2014,52（2）：4-7.

[2]Zivoti I,Djuri T,Stankovi A,et al.9p21 locus rs10757278 is associated with advanced carotid atherosclerosis in a gender-specific manner[J].Exp Biol Med，2016，241(11)：1210-1216.

[3]Volaklis KA,Smilios I,Spassis AT,et al.Acute pro-and anti-inflammatory responses to resistance exercise in patients with coronary arterydisease：a pilot study[J].J Sports Sci Med，2015，14(1)：91-97.

[4]Harismendy O,Notani D,Song X,et al.9p21 DNA variants associated with coronary artery disease impair interferon signaling response[J].Nature，2011，470(7333)：264-268.

[5]Zhu S,H Y Sfieieldsb,Toyoshi MA H,et al.Race ethnicity specific waist circumference cutoffs for identifying cardiovascular disease risk factors[J].Am J Clin Nut，2005（81）：409-415.

[6]張琦,鐘光珍,王志軍,等.染色體9p21上兩個SNP位點與中國漢族人群心肌梗死的關系[J].山東醫藥,2010,50(5)：4-6.

[7]Els Wauters,Kathryn F.Carruther,Ian buysschaert,et al. Influence of 23 coronary artery disease variants on recurrent myocardial infarction or cardiac death：the GRACE Genetics Study[J].Eur Heart J，2013，34(13)：993-1001.

[8]El-Menyar AA,Rizk NM,Al-Qahtani A,et al.The cardiovascular implication of single nucleotide polymorphisms of chromosome 9p21 locus among Arab population[J].J ResMed Sci，2015，20(4)：346-352.

[9]Liu YH,Zhou YW,Yang JA,et al.Gene polymorphisms associated with susceptibility to coronary artery disease in Han Chinese people[J].Genet Mol Res，2014，13(2)：2619-2627.

[10]Yayla,Okyay K,Y lmaz A,et al.Association of rs10757274 and rs2383206 Polymorphisms on 9p21 locus with Coronary Artery Disease in Turkish Population[J].Korean Circ J，2016，46(5)：615-621.

[11]Munir MS,Wang Z,Alahdab F,et al.The association of 9p21-3 locus with coronary atherosclerosis：a systematic review and meta-analysis[J].BMC Med Genet，2014（15）：66.

[12]Chen HH,Almontashiri NA,Antoine D,et al.Functional genomics of the 9p21.3 locus for atherosclerosis：clarity or confusion[J].Curr Cardiol Rep，2014（16）：502.

[13]Nanda V,Downing KP,Ye J,et al.CDKN2B Regulates TGFβ Signaling and Smooth Muscle Cell Investment of Hypoxic Neovessels[J].Circ Res，2016，118(2)：230-240.

[14]Goossens P,Gijbels MJ,Zernecke A,et al.Myeloid type I interferon signaling promotes atherosclerosis by stimulating macrophage recruitment to lesions[J].Cell Metab，2010（12）：142-153.

[15]Clett Erridge,Jay Gracey,Braund,et al.The 9p21 Locus Does Not Affect Risk of Coronary Artery Disease Through Induction of Type 1 Interferons[J].J Am Coll Cardiol，2013（62）：1376-1381.

[16]Christopher PN,Heribert S,Nilesh J,et al.Genetic Analysis of Leukocyte Type-I Interferon Production and Risk of Coronary Artery Disease[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2015，35(6)：1456-1462.

文題

文題應以最恰當、最簡明的詞語反映論文最重要的特定內容。一般使用能充分反映論文主題內容的短語，不使用具有主、謂、賓結構的完整語句，一般不使用標點和縮略語。

中文文題一般不宜超過20個漢字。盡可能不設副題，確有必要時，可采用不同字體字號或加破折號將副題與正題加以區分。

The Reseach on the Relation Between IFNα21 and the Severity of Coronary Artery Desease

ZHANG Ming-yu，LIU Xiao-xia，WANG Yan，LI Jian-fei，ZHANG Xue-yan,SUN Han-wen
The 4th Hospital of Harbin Medical University，Cardiovascular Department，Harbin，Heilongjiang Province，150001 China

Objective Chromosome 9p21 is associated with the high mobility of coronary artery desease,but the mechanism remines unclear.INFα21expression and the link between the sevirity of coronary atherosclersis was studed in this paper.Methoed 200 patients were admitted and underwent angiography in the 4th hospital of Harbin Medical University from Jan 2014 to Jan 2015.Those patients wre divided into 4 groups according to the imaging results.Control group：coronary artery was smooth without any stenosis.Experiment 1：The coronary artery stenosis of 50%～75%.Experiment 2：The coronary artery stenosis was less than 75%.Experiment 3：The coronary artery stenosis was total occulsion.IFNα21 density was tested by using IFNα21 specific ELISA kit box and specific determination.Results Concentration of INFα21 in control group was （49.32±10.71）μg/L，experiment group 1 was （51.38±8.23）μg/L（compared with CP,P=0.087），experiment group 2 was （47.11±11.36）μg/L（compared with CP,P=0.096），experiment group 3 was（57.03±13.31）μg/L（compared with CP,P=0.065）.The results showed there was no signicant differece among the three experiment groups and control group(P＜0.05).Conclusion So which 9p21 genotype modulates cardiovascular risk does not involve regulation of INFα21 responses.

Chromosome 9p21;Coronary artery desease;IFNα21;Coronary angiograpy;Risk factors

R541.4

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.02.02

2016-03-28；

2016-04-16

黑龍江省教育廳科學技術研究項目（12541320）。

張明宇（1973.1-），男，黑龍江人，博士，主任醫師，研究方向：冠心病的治療。