不同檢測方法對大血小板計數的對比與心腦血管疾病的臨床價值

梁　巍　周艷麗　應媛媛　牛　慧　陳　亮

鄭州市第七人民醫院檢驗科　鄭州　454000

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不同檢測方法對大血小板計數的對比與心腦血管疾病的臨床價值

梁巍周艷麗應媛媛牛慧陳亮

鄭州市第七人民醫院檢驗科鄭州454000

目的探討為有利于心腦血管疾病的診斷與治療，聯合使用不同檢測方法以減少因大血小板所引起的計數誤差，提高血小板計數的準確性。 方法以顯微鏡目視計數法和外周血涂片復檢規則為質量評價方法，對全自動血球分析儀全血模式下檢測血小板<100×109/L的標本，行稀釋血模式復檢，血涂片鏡檢觀察有大血小板的標本，按照顯微鏡目視計數法的要求需對血小板重新計數。 結果不同的檢測方法對血小板計數有統計學意義(P<0.05)。全自動血球分析儀檢測出276例心腦血管疾病患者的血小板<100×109/L，利用血球分析儀稀釋血模式復檢后，血小板結果仍然減少103例，需采用血涂片鏡檢觀察血小板形態并聯合顯微鏡目視法重新計數。不同計數方法的聯合檢測可有效減少大血小板計數的偏差，差異有統計學意義(P<0.5)。 結論全自動血球分析儀檢測血小板會有少數假性低值現象，在日常的檢驗工作中應引起高度重視。如心腦血管疾病患者的血小板減低，需用顯微鏡目視計數法重新計數并結合血涂片鏡檢進行驗證。

大血小板 ；血球分析儀；不同檢測方法

在我國的中老年人群中，心腦血管疾病是常見病和多發病，該病對患者的生活質量易造成極大的影響。隨著醫療診斷技術水平的不斷提高，臨床對血常規準確性和精確性的要求也越來越高。血小板是指導臨床診斷和治療心腦血管疾病的重要指標之一，因此血小板(PLT)計數也是臨床上不可缺少的重要參數。但血球分析儀檢測的血小板數量有真性和假性數值的現象，檢驗人員難以辨別，易造成血小板結果的誤報。本文中的質量評價方法是以顯微鏡目視計數法為主，結合外周血涂片復檢規則，需對血小板<100×109/L的樣本進行復檢。本文討論聯合使用不同的檢測方法可減少大血小板計數誤差，提高血小板的準確性，為心腦血管疾病的診斷和治療提供有價值的參數。

1　材料與方法

1.1一般材料2011-01—2015-10本院門診、住院及體檢中心送檢的疑似和確診的心腦血管疾病的血常規標本，標本分析前、分析中質量控制合格，無重復標本1 720例，經血液實驗室檢測分析后，篩查出血小板<100×109/L的標本276例，需用不同檢測方法對標本進行對比與分析。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑：國產邁瑞BC-6800血球分析儀及其配套的試劑，稀釋液內無EDTA-K2；選用含有2.0 g/LEDTA- K2真空管；普通雙目顯微鏡。依據《全國臨床檢驗操作規程》第4版標準配置[1]的濃度為1%的草酸銨血小板稀釋液；貝索瑞氏復合染液。參加全血細胞室內及室間質控檢測結果全部“在控”。

1.2.2儀器全血模式：來自本院門診、住院及體檢中心疑似和確診的心腦血管疾病患者1 720例，采集靜脈血1.5～2.0 mL于2.0 g/LEDTA-K2真空管中混勻，置于邁瑞BC-6800血球分析儀中進行全血模式下的檢測。

1.2.3儀器稀釋模式：全血模式下篩查出血小板<100×109/L的樣本276例，采集患者末梢血40 μL置于360 μL不含EDTA-K2的稀釋液中，充分混勻后，于邁瑞BC-6800血球分析儀稀釋血模式下進行復檢，排除因含有EDTA抗體所引起的EDTA依賴性假性血小板減少的標本。

1.2.4血片復檢模式：首先將血小板<100×109/L的標本置37 ℃恒溫箱保溫30 min后，再次使用邁瑞BC-6800血球分析儀中進行全血模式下復檢，以排除因冷凝集所造成的血小板假性減低。然后將標本制成血涂片并鏡檢10個視野以上。鏡檢中應著重觀察血涂片的片尾及邊緣部位有無因EDTA抗體的存在所引起的血小板聚集現象。排除以上原因所致的假性血小板減少的標本后，血小板復檢結果仍<100×109/L的標本，需對這些疑似和確診的心腦血管疾病患者進行臨床檢查和病史詢問，確認臨床資料是否與檢測結果相符。

1.2.5顯微鏡目視計數法：血小板鏡檢計數的評估依據為WHO推薦的國際血液學復檢規則。結合外周血涂片鏡檢觀察的血小板形態和數量，需用顯微鏡目視計數法重新計數。采集末梢血，棄去第一滴血，取第二滴血20 μL于濃度為1%草酸銨血小板稀釋液380 μL中并充分混勻，待5～10 min紅細胞完全溶解后，經再次充分混勻，充入細胞計數池內靜止10 min，使血小板完全下沉，需在1 h內完成血小板的計數。

2　結果

2.1真性與假性血小板減少的比值這276例疑似和確診的心腦血管疾病患者的標本中，真性血小板減少168例，假性血小板減少108例。其中含有冷凝集標本1例，EDTA依賴性假性血小板減少的標本4例，其余103例血小板<100×109/L的標本，全自動血球分析儀報告中血小板各項參數異常及曲線圖分布異常。

2.2不同檢測方法對267例疑似和確診的心腦血管疾病患者血小板結果與標準差比較見表1。再次對這103例血小板減少的疑似和確診的心腦血管疾病患者進行臨床病史分析，入院前未查過血常規，6個月內無抗血小板藥物使用史；入院后體檢未發現全身皮膚及黏膜有明顯的瘀斑和出血點；無心、肝、腎等重要器官功能障礙及疾病；無泌尿和消化系統出血的癥狀；未發現淺表淋巴結腫大；無遺傳性出血疾病；6個月內未有外科手術史。全血細胞分析發現血小板<100×109/L，外周血涂片鏡檢易見巨、大血小板。

表1　不同檢測方法對267例疑似和確診的心腦血管疾病患者的血小板結果與標準差比較

3　討論

全血細胞分析是臨床常用于診斷和觀察心腦血管疾病的檢測項目，血小板是觀察該疾病的動態指標之一。血小板的降低和升高，與該疾病的產生、發展、預后以及治療藥物的使用、患者自身因素等有密切的相關性，準確的血小板數據有利于臨床對心腦血管疾病的診斷、治療和合理用藥提供依據，否則會貽誤患者的病情，甚至危及生命。因此血小板計數的準確性具有十分重要的臨床意義。當前隨著基礎醫學的快速發展，高科技和計算機技術的的大量引用，各種血細胞計數的自動化儀器在各級醫院檢驗科的普遍使用，其檢測的靈敏性也越來越高[2]。全自動血球分析儀的檢測性能具有很好的重復性，適于臨床檢驗的普及。通過本組數據對比發現，血小板不同的檢測方法有一定的差異，但由于全自動血球分析儀對血小板的計數常受巨、大血小板和非血小板顆粒(如紅細胞碎片、小紅細胞、大顆粒灰塵、巨大血小板、EDTA抗體和冷凝集)干擾，這些因素可引起血小板假性減低。所以，有些血小板的檢測結果仍需通過目視顯微鏡，人工重新計數后才能得到準確數據。因而國內外醫學界仍將目視顯微鏡計數法(特別是相差異顯微鏡計數法)作為參考方法[3]。由本組5例數據發現，全自動血球分析儀測定的血小板有假性低值現象，經復檢后血小板結果得到明顯糾正。同時還有103例數據，不能得到有效糾正，需通過顯微鏡目視計數法人工重新計數和血涂片鏡檢驗證并對血小板形態加以說明。全國臨床檢驗操作規程里面規定草酸銨溶解計數法為血小板計數方法，1%草酸銨稀釋液有較強破壞細胞的能力，血小板在顯微鏡下形態清晰、易辨認，試劑成本低廉，是進行質量評價首選的方法[4]。觀察血小板在外周血涂片的數量和形態也是臨床血液學研究中的常規項目。[5]因此，只有聯合使用不同檢測方法才能有效的減少因大血小板所引起的計數誤差，為臨床診斷、治療和對心腦血管疾病的預后提供真實準確的血小板數據。

[1]尚紅，王毓三，申子瑜.全國臨床臨檢操作規程[M].4版.北京：人民衛生出版社，2014：135.

[2]梁巍，余德玲，王域平.EDTA-K2誘導血小板假性減少的分析[J].中外婦兒健康，2011，19(7)：1 672.

[3]邵永生，鄭宏偉.組合檢驗法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的應用[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33(16)：2 036-2 037.

[4]叢玉隆，尹一斌，陳瑜.檢驗醫學高級教程[M].北京：人民軍醫出版社，2012：4.

[5](美)Turgeon ML著，彭明婷，申子瑜譯.檢驗醫學基礎理論與常規檢測技術[M].5版.西安：世界圖書出版社西安有限公司，2012：8.

(收稿2016-03-11)

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1673-5110(2016)17-0060-02