熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關性

趙秋霞　周松偉　王莉

熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關性

趙秋霞周松偉王莉

目的 探討熒光定量PCR法檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學指標的相關性。方法 以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者為研究對象，全部患者均以熒光定量PCR法和ELISA法分別對HBV-DNA和前s1抗原等乙肝免疫學指標進行檢測。結果 （1）模式1（大三陽患者）HBV陽性符合率93.70%、前s1抗原陽性率81.66%；模式2（小三陽患者）HBV陽性符合率61.76%、前s1抗原陽性率64.71%，兩項指標均占多數；（2）HBsAg濃度與前s1抗原陽性率呈正相關。結論 乙肝免疫學指標與HBV-DNA存在相關性，兩者聯合應用能提高臨床診斷準確性，乙肝前s1抗原能夠反映HBV復制狀態與傳染性，可作為HBeAg和HBV-DNA檢測的補充和對照。

乙型肝炎；HBV-DNA；免疫標志物；相關性

乙型病毒性肝炎是臨床常見肝臟炎性病變[1］。乙肝免疫學指標檢測（乙肝兩對半）是現階段臨床篩查、診療乙肝最常用方法，它能夠反映出機體對乙肝病毒的免疫反應狀態，但無法直接表達HBV復制。HBV-DNA監測是能夠反映HBV復制活躍度及傳染性的重要方法。有報道指出[2］，HBV-DNA與乙肝免疫學指標間的相關性對臨床治療乙肝和判斷預后具有重要指導意義，鑒于此，文章現以110例患者為研究對象進行分析和探討，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

以2014年1月～2015年12月我院收治的110例乙肝患者為研究對象，全部患者入院時不同程度的伴有惡心、上腹不適等消化道表現及乏力、疲勞、輕度發熱等全身表現，部分患者黃疸或肝區疼痛等。經診斷，患者病癥均符合文獻標準[3］，臨床判定為乙型病毒性肝炎。其中，男60例，女50例；患者年齡18～72歲，平均年齡（46.3±9.1）歲；急性乙肝53例，慢性乙肝57例；患者病程1～14周，平均病程（6.3±2.7）周。

1.2方法

全部患者均以熒光定量聚合酶鏈式反應（PCR法）和酶聯免疫吸附實驗（ELISA法）分別對HBV-DNA和乙肝免疫學指標進行檢測，對比分析檢測結果。乙肝免疫學指標檢測項目：（1）乙肝表面抗原（HBsAg）；（2）乙肝表面抗體（抗-HBs）；（3）乙肝e抗原（HBeAg）；（4）乙肝e抗體（抗-HBe）；（5）乙肝核心抗體（抗-HBc）；（6）乙肝前s1抗原。

表1　110例患者乙肝免疫學指標表現模式

2　結果

檢查結果顯示，110例患者分別處于不同乙肝發病階段，詳見表1。通過PCR檢測HBV-DNA和前s1抗原測定，結果顯示，模式1（大三陽患者）HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率最高，模式2（小三陽患者）HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率次之，模式6（乙肝恢復期患者）HBV陽性符合率最低，模式5、模式6 前s1抗原陽性率均為0%，詳見表2。

表2　各模式下的PCR檢測結果 [n（%）］

3　討論

乙肝免疫學指標檢查主要是指對乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體和乙肝核心抗體的檢查，俗稱乙肝五項，主要用來判斷人體是否遭受乙肝病毒感染并粗略估計病毒復制水平，可用于乙肝疾病監測和療效動態觀察[4-5］。本次臨床研究在這五項檢查項目基礎上加入了對乙肝前s1抗原的檢測。肝細胞膜是HBV的主要附著體，前s1蛋白的氨基酸21～47片段是肝細胞受體結合部位，提示前s1抗原具有高度敏感性和免疫原性，人體含有HBV就會有前s1抗原。有臨床研究證實，前s1抗原是HBV感染后最早出現的血清學標志物，這對于乙肝病毒的早期診斷具有重要參考意義[6］。HBV-DNA即乙肝病毒基因，是HBV感染最直接、特異性強和靈敏性高的指標，可用于鑒別HBV復制及是否具有傳染性。本次臨床研究以熒光定量PCR法對HBV-DNA進行定量檢查，這能夠直觀的幫助臨床掌握機體內病毒含量，了解患者病情，指導意義顯著。此次研究結果顯示，大三陽、小三陽患者HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率均處于較高水平，發病之初或病情逐漸轉復以后，HBV陽性符合率和前s1抗原陽性率較低，HBsAg濃度與前s1抗原陽性率呈正相關，與既往文獻研究結論基本一致[7-8］，提示前s1抗原可作為HBeAg和HBV-DNA檢測的補充和對照，乙肝免疫學指標與HBV-DNA存在相關性，兩者聯合應用能提高臨床診斷準確性。

[1]黃存敏，李艷艷，梁海輝，等. ELISA法與熒光定量PCR法檢測乙肝病毒相關性分析[J］.國際病毒學雜志，2015，22（z1）：207-209.

[2]黃靜. 熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA法乙肝免疫學檢測的探討[J］. 中國醫藥科學，2013，3（6）：110-111.

[3]周玉林，鄭金川，吳旭耀，等. 熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA與乙肝病毒標志物相關性[J］. 中國農村衛生事業管理，2013，33（10）：1191-1192.

[4]龔杰，劉柏林，方艷秋，等. 乙肝病毒外膜大蛋白、前S1抗原、HBV-DNA與血清標志物之間相關性分析[J］. 中國實驗診斷學，2013，17（9）：1634-1637.

[5]王碧玉，黃燕妮. 乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯合檢測的臨床意義[J］. 海南醫學，2016，27（7）：1182-1184.

[6]羅慧琴，王志剛，李玲，等. 乙肝患者血清標志物與前S1抗原及HBV-DNA相關性分析[J］. 國際檢驗醫學雜志，2013，34（24）：3337-3338.

[7]曾繁鈺，蔣冰，譚璐，等. Pre S1抗原與HBV血清學標志物和HBV DNA的相關性及臨床意義[J］. 武漢大學學報（醫學版），2014，35（1）：85-88，105.

[8]張蕾，周玉妮，董景云，等. 血清HBV-DNA載量、乙肝免疫學標志物定量與老年慢性乙肝患者肝功能的關系[J］. 中國老年學雜志，2014，34（13）：3563-3564.

The Correlation Between HBV-DNA and EL ISA Method of Hepatitis B Imm une Index by Fluorescence Quan titative PCR Method

ZHAO Qiuxia ZHOU Songwei WANG Li Department of Clinica l Laboratory， The People's Hospital of Xinghua City， Xinghua Jiangsu 225700， China

Objective To study the correlation between the HBV-DNA and the ELISA method of hepatitis B immune index by fuorescence quantitative PCR method. Methods From January 2014 to December 2015， 110 cases of hepatitis B patients in our hospital were selected as the object of study. A ll the patients were by f uorescence quantitative PCR and ELISA respectively of HBV-DNA， Pre-s1 antigen and HBV immunological markers were detected. Resu lts Pattern 1 （ HBeAg positive patients ） in patients with HBV positive coincidence rate of 93.70%， Pre-s1 antigen positive rate of 81.66%； Pattern 2 （ HBV-DNA patients ） with HBV positive coincidence rate of 61.76% and Pre-s1 antigen positive rate was 64.71%， two indicators are in the majority； II HBsAg concentration is similar to that of Pre-s1 antigen positive rate was positively. Conclusion There was correlation betw een HBV Imm unological Markers and HBV-DNA and com bined application can increase the accuracy of clinical diagnosis and HBV Pre-s1 antigen can ref ect HBV replication and infectivity， as HBeAg and HBVDNA detection and control.

Hepatitis B， HBV-DNA， Immune markers， Correlation

R 446.6

A

1674-9308（2016）25-0045-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.25.026

江蘇省興化市人民醫院檢驗科，江蘇 興化 225700