1株膿腫分枝桿菌臨床分離株的鑒定

郭素芳,王俊瑞,范文兵,王艷艷,劉超梅

(1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科,呼和浩特 010050；2.解放軍第二五三醫(yī)院感染控制科，呼和浩特 010051)

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·個案與短篇·

1株膿腫分枝桿菌臨床分離株的鑒定

郭素芳1,王俊瑞1,范文兵1,王艷艷1,劉超梅2△

(1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科,呼和浩特 010050；2.解放軍第二五三醫(yī)院感染控制科，呼和浩特 010051)

膿腫分枝桿菌； 菌種鑒定； 16S rRNA

膿腫分枝桿菌是一種不產(chǎn)色素的快速生長的分枝桿菌，與龜分枝桿菌親緣關(guān)系較近。在快速生長的分枝桿菌引起的疾病中，60%～80%的慢性肺病由該菌導(dǎo)致，該菌也是引起創(chuàng)傷后傷口感染的主要病原體。在我國有膿腫分枝桿菌造成肺部病變和軟組織損害的報道[1-3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，男，74歲。因氣短、咳嗽咳痰20余年，加重5 d，發(fā)熱體溫38.5 ℃伴有寒戰(zhàn)，咳黃色黏痰入院。胸腹CT顯示有肺炎，雙側(cè)胸腔積液，左側(cè)加重并局部包裹，左肺下葉壓縮性肺不張，肝右葉小囊腫，盆腔少量積液。胸腔置管引流出黃色膿性積液1 000 mL,送檢進行常規(guī)、生化及一般細菌培養(yǎng)。培養(yǎng)6 d有革蘭陽性球菌生長，抗酸染色陽性，疑似非結(jié)核分枝桿菌。

1.2 儀器與試劑 PCR儀(伯樂公司)；電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)(美國Bio-Rad公司)；血平皿購自天津金章公司。沙保羅培養(yǎng)基用英國OXOID公司干粉自配；聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增引物試劑由上海生工合成，聚合酶(Ex Taq DNA Polymerase，TAKARA)。

1.3 方法

1.3.1 DNA提取 菌株DNA 嚴格提取按照試劑盒說明書進行，試劑盒由天根有限公司提供。收集沙保羅培養(yǎng)基上的新鮮培養(yǎng)物5～6 環(huán)，采用20 mg/mL溶菌酶作用30 min，蛋白酶K 及RNase A 破除細胞壁，去除蛋白、RNA 等物質(zhì)，最后使用TE 溶解DNA 沉淀，-20 ℃保存?zhèn)溆谩！?br>