雷公藤凝膠劑的制備工藝研究

馬鑫斌王利勝巴文強

雷公藤凝膠劑的制備工藝研究

馬鑫斌1王利勝2巴文強2

目的 優選雷公藤凝膠劑制備工藝并進行初步質量考察。方法 采用單因素方法，以凝膠劑的外觀、黏稠性、涂展性和穩定性為指標，考察基質的種類、用量和甘油用量；通過體外透皮試驗，確定雷公藤甲素最佳接收液；采用正交試驗法篩選處方，確定最佳制備工藝；并對雷公藤凝膠劑進行初步質量考察。結果 以凝膠劑的外觀、黏稠性、涂展性和穩定性為考察指標，篩選出最佳的凝膠基質為卡波姆940（2%），甘油用量5%；通過體外透皮試驗，確定雷公藤甲素最佳接收液為50%甲醇生理鹽水；正交試驗篩選出凝膠劑的最佳處方為載藥量3%，氮酮用量1%，丙二醇用量10%，并確定最佳制備工藝為：“將卡波姆940撒在適量水中，靜置待充分溶脹成凝膠基質；將雷公藤提取物溶于乙醇中，加入甘油、氮酮、丙二醇、尼泊金乙酯和亞硫酸氫鈉，攪拌均勻，緩慢加入凝膠基質中并混合均勻，加三乙醇胺調節pH值至6～7，并加蒸餾水至100 g，攪拌均勻”；對雷公藤凝膠劑進行了體外透皮考察，體外透皮過程以零級動力學方程擬合最優，符合零級方程，透皮速率常數Js為0.6712 μg·cm-2·h-1，時滯Tlag為2.61 h。結論 該制備工藝操作簡單，所得凝膠穩定性好，釋放速率高。

雷公藤；凝膠劑；制備工藝；質量考察

中藥凝膠劑系指藥材提取物與能形成凝膠的輔料制成的稠厚液體或半固體制劑。根據基質組成不同，可分為水性凝膠和油性凝膠，由于水性凝膠易涂展和洗除，無油膩感，故較為常用。凝膠劑具有良好的生物相容性和緩控釋作用[1]，將雷公藤制成凝膠劑可以減少藥物損失，提高局部藥物濃度，避免口服產生的首過效應，降低雷公藤毒性。周潔等[2]對雷公藤凝膠劑治療大鼠佐劑型關節炎治療效果和肝臟毒性研究發現，雷公藤凝膠劑對佐劑型關節炎大鼠能夠起到明顯的抗炎消腫作用，能有效保護關節軟骨組織，并且不會引起明顯肝臟毒性反應。本研究參考文獻[3-11]，采用改良的Franz擴散池對雷公藤凝膠劑的處方進行了優化篩選，并對優化的處方進行了透皮性能考察。

1 儀器與試劑

1.1 藥品與試劑 雷公藤甲素對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號：111567～200502；雷公藤提取物（雷公藤甲素含量0.45%），桂林市三菱生物制品有限公司，批號：130613；卡波姆-940，德國BASF公司；色譜純甲醇，迪馬公司；水為超純水，其他試劑均為分析純。

1.2 儀器 Waters高效液相色譜儀（美國Waters公司）；N3000色譜工作站（浙江大學）；AUW120D分析天平（日本島津）；KQ-500型超聲清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）；TG1650-WS離心機（上海盧湘儀離心機儀器有限公司）；TK-12A型透皮擴散試驗儀（上海鍇凱科技貿易有限公司）；8.2 ml立式玻璃擴散池（接口面積3.46 cm2）（上海鍇凱科技貿易有限公司）。

1.3 動物 雄性SD大鼠，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（粵）2008-0020，體量200～250 g。

2 方法與結果

2.1 基質種類考察 以凝膠外觀、黏稠性、涂展性和穩定性為考察指標，對CP-940、CP-980、HPMC和CMC-Na進行考察。結果顯示，HPMC和CMC-Na在此濃度情況下并不能形成凝膠，黏度小，成液體狀；而CP-940和CP-980成型性較好，但CP-980形成的凝膠較稠，不易涂展，且表面相比于CP-940略顯粗糙，故CP-940最適合作為雷公藤凝膠劑的基質。見表1。

表1 不同基質對凝膠劑的影響

2.2 考察CP-940用量 以凝膠的外觀、黏稠性、涂展性和穩定性為考察指標，對CP-940的用量（0.5%、1.0%、2.0%）進行考察。結果顯示，卡波姆用量為0.5%和1.0%時，制成的凝膠黏稠性不夠，而且涂展性不佳，用量2.0%時無論是在黏稠性還是涂展性方面均優于用量在0.5%和1.0%，故本研究選擇卡波姆用量為2.0%，見表2。

2.3 考察甘油用量 參考文獻[12]，以凝膠的外觀、黏稠性、涂展性、穩定性和保濕性為考察指標，對甘油的用量進行了考察。由表3可知，所制備的3批凝膠劑黏稠性、涂展性及穩定性相似；但從表4可知，含5%的甘油凝膠比含10%和15%的甘油凝膠的失水率要低，即含5%甘油凝膠的保濕性能更加優越，

所以將甘油的含量定為5%。

表2 CP-940不同用量的考察(%)

表3 甘油不同用量考察(%)

表4 不同時間甘油含量凝膠的失水率(n=3,±s)

表4 不同時間甘油含量凝膠的失水率(n=3,±s)

2.4 接收液的考察 參考文獻[13-15]，選擇50%甲醇生理鹽水，30%PEG 400生理鹽水，30%乙醇生理鹽水3種不同接收介質，以Q-t方程和透皮速率常數作為指標，考察這3種不同接收液對雷公藤凝膠劑透皮速率的影響，選出適合雷公藤甲素的接收液。

2.4.1 凝膠劑的制備 先將2%卡波姆940用蒸餾水溶脹24 h后，將2%雷公藤提取物溶解于10%乙醇中，將5%甘油、0.1%尼泊金乙酯、0.1%亞硫酸氫鈉加入至雷公藤提取物乙醇溶液混勻后，一起加入基質中并攪拌均勻，采用三乙醇胺調節pH至6.0～6.5，加水至100 g，即得。

2.4.2 離體皮膚的處理 取雄性SD大鼠（200～250 g），先用電推子剃除大鼠腹部毛，剩余毛用6%硫化鈉溶液進行脫毛，脫毛后正常飼養24 h。頸椎脫臼處死，剝離腹部皮膚，仔細剝離皮下脂肪組織，直至透明，再用0.9%氯化鈉注射液沖洗干凈，直至無渾濁為止，放入-20 ℃冰箱中保存備用。1周內使用，使用前應檢查皮膚有無破損，有破損者棄用。

2.4.3 離體透皮試驗 先將磁攪拌子放入接收池內，再將自然解凍的離體大鼠腹部皮膚平放置于接收池上端，角質層面向上，然后用夾子固定于接收池上。在接收池中注入經超聲脫氣處理的接收液8.2 ml，確保皮膚與接收液之間無氣泡，放在恒溫水浴中（32±0.2）℃，磁攪拌子轉速為205 rpm，預平衡1 h，倒掉接收液注入空白接收液。釋放池上涂凝膠劑2 g，在1、2、4、6、8、12、24 h后取樣1 ml，每次取樣后立即補充同體積同溫度的空白接收液，取上述溶出液用0.22 μm微孔濾膜濾過，取續濾液進樣測定雷公藤甲素含量，結果見表5。

表5 不同接收液中雷公藤甲素的含量(n=3，±s)

表5 不同接收液中雷公藤甲素的含量(n=3，±s)

時間(h) 接收液1 接收液2 接收液3濃度(μg/ml) 1 0.53±0.06 未檢測到 0.37±0.07 2 0.69±0.18 0.49±0.03 0.50±0.05 4 1.06±0.15 0.72±0.07 0.68±0.11 6 1.08±0.13 0.75±0.05 0.79±0.08 8 1.20±0.18 1.03±0.11 0.97±0.12 12 2.15±0.14 1.26±0.27 1.24±0.11 24 3.75±0.23 2.37±0.15 2.13±0.15

2.4.4 數據處理 將得到的數據按下面公式處理，計算各時間點單位面積累積透過量Q及透皮速率。

式中，Cn為第n個取樣點測得的藥物濃度（μg/ml），Ci為第i（i≤n－1）個取樣點測得的藥物濃度（μg/ml），A為有效透過面積（3.46 cm2），V為接收液體積，Vi為第i次取樣體積。以凝膠劑中雷公藤甲素的Q（μg/cm2）對t（h）分別按零級、一級與Higuchi動力學方程進行線性回歸。所得直線斜率J（μg·cm-2·h-1）即為穩態透皮速率常數，直線與X軸的交點即為時滯Tlag（h），以相關系數r2作為方程擬合的判斷標準。由表6和圖1中可以得出以Q-t方程擬合最好的是零級方程，以50%甲醇生理鹽水作為接收液時，雷公藤甲素透皮速率最大，所以50%甲醇生理鹽水最適合作為雷公藤甲素的接收液。

2.5 處方優化

2.5.1 正交試驗優選處方 根據處方前研究的工作及結合預試驗結果，參考文獻[16-22]，選擇卡波姆940作為雷公藤凝膠劑的基質，氮酮和丙二醇作為透皮促進劑，由于雷公藤提取物大部分為脂溶性成分，在水溶性基質中難以溶解及分散均勻，故選擇乙醇用來溶解雷公藤提取物。在實驗中，選擇雷公藤提

t（h）分別按0級、1級與Higuchi動力學方程進行線性回歸，結果見表11。由表10、11可知，雷公藤凝膠劑體外透皮過程以零級動力學方程擬合最優，其符合零級方程，透皮速率常數Js為0.6712 μg·cm-2·h-1，時滯Tlag為2.61 h。

表10 雷公藤甲素體外透皮數據(n=3)

表11 雷公藤甲素透皮數據擬合表(n=3)

3 討論

通過單因素考察和正交試驗優化的雷公藤凝膠劑最佳處方為：雷公藤提取物3 g，卡波姆940 2 g，乙醇10 g，甘油5 g，氮酮1 g，丙二醇10 g，尼泊金乙酯0.1 g，亞硫酸氫鈉0.1 g，三乙醇胺適量，蒸餾水加至100 g。其制法為：將卡波姆940撒在適量水中，靜置待其充分溶脹成凝膠基質；將雷公藤提取物溶于乙醇中，依次加入甘油、氮酮、丙二醇、尼泊金乙酯和亞硫酸氫鈉，攪拌混合均勻，緩慢加入凝膠基質中并混合均勻，加三乙醇胺調節pH值至6～7，加蒸餾水至100 g，攪拌均勻。

卡波姆是一種引濕性較強的白色松散粉末，由于分子中存在大量的羧酸基團，可以在水中迅速溶脹，但不溶解，隨著pH升高，黏度會隨著增大。其分子結構中的羧酸基團使其在水中呈酸性，黏性較低。當用堿中和時，隨大分子逐漸溶解，長鍵彌散伸展，形成空間網狀結構，黏度也逐漸上升，在低濃度時形成澄清溶液，在濃度較大時形成半透明狀凝膠。在pH值為6～11時黏度和稠度最大，而皮膚表面的pH值為4.2～5.6，偏酸性。為了使凝膠劑有較好的黏度和稠度，也為了避免凝膠劑對皮膚造成刺激，本實驗選取凝膠劑的pH值為6～7。

[1] 錢杰人.卡波姆凝膠劑及其應用[J].中國藥業,2003,12(6)∶77.

[2] 周潔,劉岳鳳,何凱.復方雷公藤凝膠劑對大鼠佐劑型關節炎的療效及肝毒性研究[J].細胞與分子免疫學雜志,2013,29(9)∶914-918.

[3] 張文晴,楊全,龐玉新,等.艾納香鼻清爽凝膠劑的制備及其皮膚刺激性的檢測[J].香料香精化妝品,2015(2)∶43-46.

[4] 袁端鋒,倪艷華,石巖.冰黃膚樂凝膠劑的制備及其止癢作用的研究[J].山西醫藥雜志,2015,44(2)∶454-457.

[5] 謝紅梅,趙丹丹,李雅雅,等.蟾皮凝膠劑制備工藝優選及體外透皮性能考察[J].中國實驗方劑學雜志,2014,20(12)∶20-23.

[6] 王梅,常占英,侯艷霞,等.黃體酮凝膠劑的制備及藥效測定[J].中國藥物應用與監測,2015,12(4)∶205-208.

[7] 張慶華,丁海燕,李自強,等.雞血藤酚微乳凝膠劑的制備及體外透皮特性研究[J].長沙醫學院學報,2012,10(1)∶20-23.

[8] 徐和,戴領,沈成英,等.苦參堿凝膠劑的制備及體外釋藥特性考察[J].中國實驗方劑學雜志,2014,20(1)∶8-11.

[9] 蔡晨辰,王榮雪,于洪丹,等.咪達那新凝膠的制備及其體外經皮透過性[J].中國藥劑學雜志,2015,13(3)∶97-105.

[10] 熊蕊,符旭東,羅夢穎,等.鹽酸羅哌卡因透皮凝膠劑的處方優化[J].中國藥師,2016,19(4)∶660-664.

[11] 曹英驥,陶曜天,桂雙英.鹽酸青藤堿自溶性微針的制備及其體外經皮滲透性能考察[J].中國實驗方劑學,2016,22(10)∶6-9.

[12] 崔福德.藥劑學[M].北京∶人民衛生出版社,2006∶173.

[13] 管詠梅,丁瑩.雷公藤凝膠與軟膏中雷公藤內酯的經皮滲透性比較研究[J].中國藥師,2008,11(4)∶373-375.

[14] 李燕.雷公藤甲素外用凝膠的研制[D].重慶∶重慶醫科大學,2008. [15] 鄧亞利,周莉玲.雙藤巴布劑中青藤堿、雷公藤甲素的體外釋放與體外透皮機制研究[J].中國藥房,2012,23(23)∶2113-2115.

[16] 崔福德.藥劑學[M].6版.北京∶人民衛生出版社,2010∶471.

[17] 李平,臺育泰,樊敬麗,等.氮酮對雙氯滅痛透皮吸收作用的研究[J].中國醫院藥學雜志,1993,13(5)∶210.

[18] 王巨存,胡文鐸,朱鐵梁,等.氮酮促進吡羅昔康軟膏體外釋放的實驗研究[J].中國藥學雜志,1992,27(1)∶15.

[19] 謝茹嘉,章順楠.氮酮對延胡索浸膏經皮給藥的影響[J].中國藥科大學學報,1995,26(2)∶78.

[20] Stoughton B,Mcclure O.Azone∶a new non-toxic enhancer of cutaneous penetration[J].Drug Development and Industrial Pharmacy, 1984,9(4)∶725.

[21] 孫考祥,徐凱建,田輝凱,等.不同透皮吸收促進劑對丹參貼膏離體透皮吸收的影響[J].中國藥房,1998,9(2)∶58-59.

[22] 虞金寶,程怡,金克寧,等.蟾蜍透皮吸收研究[J].中國中藥雜志, 1995,20(9)∶539.

Study on preparation of Tripterygium wilfordii gels

Ma Xinbin Wang Lisheng Ba Wenqiang

Objective To optimize the Preparation of Tripterygium wilfordii gels.Methods With the appearance of the gel, viscosity, malleable and stability as examining index, the effects of the variety of matrix and the dosage and glycerin dosage of gels was investigated.By intro transdermal test to determine the best receiver solution of triptolide. By orthogonal select the best prescription gels and determine its optimal preparation. Finally, the best prescription Tripterygium wilfordii gels were investigated in vitro transdermal.Results In the appearance of gels,viscosity, spreadability

Tripterygium wilfordii;Gels;Preparation process;Quality evaluation

R942

A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.11.006

1華南農業大學醫院藥劑科，廣東廣州 510642

2廣州中醫藥大學中藥學院，廣東廣州 510006

馬鑫斌（1983-），碩士學位，藥學專業，主管藥師。主要從事藥劑科工作。E-mail：maxinbin_HNYY@163.com

and stability as indexes,selecting the best gel matrix is carbomer 940,in an amount of 2%,glycerin in an amount of 5%.By transdermal test to determine the best reception triptolide solution of 50% methanol saline.By orthogonal select the best prescription for the drug gel 3%,1% of the amount of nitrogen ketone,propylene glycol 10% of the amount,and determine its optimal preparation of the carbomer 940 scattered on the amount of water,standing overnight,until the full swell into a gel matrix;would Tripterygium extract was dissolved in ethanol,glycerin,Azone, propylene glycol,ethyl paraben and sodium bisulfite,mixing evenly,then slowly add condensate plastic matrix and mixed evenly,and finally adjusting the pH with triethanolamine to 6-7,add distilled water to a final 100g,stirred evenly. Finally,the best prescription Tripterygium wilfordii gels were investigated in vitro percutaneous,transdermal gels result tripterygium process with zero-order kinetics equation was optimal,the zero-order equation.Transdermal rate constant Js is 0.6712μg·cm-2·h-1,Tlagis 2.61h.Conclusion The optimized preparation of Tripterygium wilfordii gels are characterized with simplicity, stable quality and good drug relaease rate.