血清抗體與快速尿素酶檢測幽門螺桿菌感染的靈敏度及特異性分析

周小微，李安全

（福建醫(yī)科大學附屬南平市第一醫(yī)院檢驗科，福建南平353000）

血清抗體與快速尿素酶檢測幽門螺桿菌感染的靈敏度及特異性分析

周小微，李安全

（福建醫(yī)科大學附屬南平市第一醫(yī)院檢驗科，福建南平353000）

目的 比較血清抗體和快速尿素酶檢測幽門螺桿菌（Hp）感染的靈敏度及特異性。方法 選取2014年5月至2015年12月該院門診及住院患者100例，行胃鏡檢查時在內(nèi)鏡指導下活檢胃竇黏膜組織1塊立即進行快速尿素酶檢查，隨后進行血清抗體檢測。以病理組織學檢查結(jié)果陽性作為對照，比較2種方法檢測Hp感染的靈敏度、特異性。結(jié)果 血清抗體檢查Hp陽性率明顯高于快速尿素酶，血清抗體檢測Hp感染的靈敏度明顯高于快速尿素酶，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。血清抗體檢測Hp感染的特異性與快速尿素酶相當。結(jié)論 血清抗體檢測Hp感染的靈敏度較高，特異性與快速尿素酶相當，是一種普查Hp感染的較理想的檢測方法，但快速尿素酶檢測費用低、費時少，適合經(jīng)濟水平低及門診患者的檢測。

螺桿菌，幽門； 抗體； 尿素酶； 實驗室技術(shù)和方法

幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）不僅是消化道潰瘍、慢性胃炎、胃癌、功能性腹痛等疾病的主要病因，還是胰腺癌、肝硬化，甚至肝癌等疾病的病因[1-2]。目前，診斷Hp感染的方法分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性診斷方法主要是依賴胃鏡活組織檢查包括快速尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、組織學檢查、Hp基因檢測（如寡核苷酸探針雜交、聚合酶鏈反應(yīng)）等。非侵入性檢測方法主要指不需要內(nèi)鏡檢查的方法包括13碳或14碳尿素呼氣試驗、Hp抗體檢測、糞便Hp抗原檢測、尿液Hp抗體試驗等。因此，如何簡便、快速地檢出Hp感染非常重要。本研究將2種檢測Hp感染的方法進行比較，旨在尋找一種操作簡便、敏感的檢測Hp方法，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2014年5月至2015年12月本院門診及住院患者100例，其中男58例，女42例；年齡20～70歲，平均（54.2±14.2）歲。100例患者均于胃鏡檢查時鏡下活檢胃竇組織后進行快速尿素酶檢測，隨后進行血清抗體檢測。

1.1.2 納入標準 有上腹痛、飽脹、反酸、噯氣、食欲減退等不同癥狀就診而行胃鏡檢查并經(jīng)病理檢查證實者。

1.1.3 排除標準 1個月內(nèi)曾應(yīng)用質(zhì)子泵抑制劑、抗生素、鉍劑等治療者。

1.2 方法

1.2.1 快速尿素酶檢測 采用胃Hp檢測試劑盒（產(chǎn)品標準編號：YZB/閩0692-2011，生產(chǎn)企業(yè)許可證編號：第20110191號，醫(yī)療器械注冊證編號：準字2011第2400096號），主要組成為底物微孔藥條、反應(yīng)液。主要成分為尿素、酚紅、純化水，規(guī)格為12孔/條，4條。取樣時盡可能避免酸堿類物質(zhì)、重金屬鹽類污染。操作方法：（1）取出底物微孔藥條，每孔加100 μL反應(yīng)液，充分溶解備用；（2）胃鏡檢查時活檢胃竇黏膜組織，立即放入尿素酶試劑中，10~30℃條件下反應(yīng)1.5 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判定：采用目測法。陽性為黏膜樣品孔顏色呈紅色至紫紅色；陰性為黏膜樣品孔無色。

1.2.2 血清抗體檢測 采用Hp免疫球蛋白G抗體試劑盒（產(chǎn)品標準編號：YZB國4915-2012，醫(yī)療器械注冊證編號：準字2012第3401447號）。主要成分為Hp抗體檢測試劑40人份、一次性塑料吸管。采集患者早晨空腹靜脈血2 mL，分離血清，盡量使用新鮮標本，如未及時檢測置于2～8℃保存3 d。操作方法：（1）從原裝鋁箱中取出試劑；（2）將試劑置于干凈平臺上用塑料吸管吸取樣板，垂直滴注3滴（約100 μL）無空氣氣泡的血清于試劑的加樣孔內(nèi)；（3）等待紅色條帶的出現(xiàn)。結(jié)果應(yīng)在10～20 min內(nèi)判讀。結(jié)果判定：陽性為2條紅色條帶出現(xiàn)；陰性為僅質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)1條紅色條帶。

1.2.3 靈敏度、特異性判定標準 以病理組織學檢查結(jié)果陽性作為對照，判定2種方法檢測Hp感染的靈敏度、特異性。

1.3 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 2種方法檢測Hp陽性率比較 血清抗體檢測Hp陽性率[74.00%（74/100）]明顯高于快速尿素酶[42.00%（42/100）]，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=26.69，P＜0.05），見表1。

表1 2種方法檢測Hp陽性率比較

2.2 2種方法檢測Hp感染的靈敏度及特異性比較血清抗體檢測Hp感染的靈敏度明顯高于快速尿素酶，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），特異性與快速尿素酶相當，

見表2。

表2 2種方法檢測Hp感染的靈敏度及特異性比較（n=100）

3 討 論

Hp是一種彎曲、螺旋形或S形革蘭陰性微需氧桿菌。Hp首先通過細菌膜表面尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨云在Hp周圍產(chǎn)生過氧化物歧化酶和過氧化氫酶避免受中性粒細胞殺傷，這是Hp定植于胃、十二指腸的主要原因。Hp能產(chǎn)生炎性反應(yīng)繼而導致消化道腫瘤的發(fā)生。

快速尿素酶檢測因試劑廉價、反應(yīng)迅速對胃鏡檢查常為首選方法。該法檢測影響因素較多：（1）檢測結(jié)果陽性強度與標本中細菌密度呈正相關(guān)，同時受Hp在胃“灶性分布”的影響[3-5]，使其靈敏度低。（2）胃內(nèi)pH值及影響胃內(nèi)pH值的藥物可影響檢測結(jié)果。pH值為2.5～6.5時尿素酶主要維持Hp的代謝活動，在胃pH低的環(huán)境中尿素酶是維持Hp胞質(zhì)周圍pH穩(wěn)定的關(guān)鍵因子。pH值上升至4.0～5.5時尿素酶活力逐漸降低[6]。因此，質(zhì)子泵抑制藥物、胃酸缺乏、膽汁反流、嚴重萎縮性胃炎等疾病均可導致胃內(nèi)pH明顯上升，則均可出現(xiàn)假陽性。（3）具有活性的尿素酶僅存在于黏液層，因此，黏液層厚度可影響檢查結(jié)果。尿素酶為蛋白質(zhì)分子，少量尿素酶一定時間內(nèi)可能不能產(chǎn)生肉眼能見的反應(yīng)。因此，也不可避免地出現(xiàn)假陰性。同時可產(chǎn)生尿素酶的常見細菌至少有20種以上[7]，因此，也可能存在假陽性。本研究結(jié)果顯示，快速尿素酶檢測Hp感染的靈敏度較低，與血清抗體比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。但最近一種單克隆抗體的尿素酶試驗?zāi)芘c特異性抗體識別并結(jié)合尿素酶，靈敏度得到了提高。

Hp菌體表面存在的鞭毛及分泌的多種抗原組分均可激發(fā)宿主免疫應(yīng)答誘導抗體的產(chǎn)生，檢測血清中特異性抗體同樣可反映病原體感染情況。通過不同種類的抗體能判定細菌類型，進而預(yù)測胃病嚴重程度，能更好地指導臨床治療。Hp感染數(shù)周后才產(chǎn)生特異抗體，同時細菌根除后抗體可維持半年以上[8]。因此，Hp抗體陽性不能肯定患者有活動性感染，陰性也不能排除初期感染。

綜上所述，血清抗體檢測Hp感染的靈敏度高于快速尿素酶，但因存在假陽性及假陰性，不適于臨床診斷，該項檢查只能用于流行病學篩檢。快速尿素酶檢測Hp感染的靈敏度較低，可結(jié)合其他檢測方法，如13碳或14碳尿素呼氣試驗檢測Hp感染。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.22.032

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1009-5519（2016）22-3502-02

2016-07-09）