青風藤配方顆粒的制備及與傳統湯劑的比較

趙帆帆，王嬌嬌，李麗麗，李建晨,哈 婧

(河北科技大學化學與制藥工程學院，河北石家莊 050018)

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青風藤配方顆粒的制備及與傳統湯劑的比較

趙帆帆，王嬌嬌，李麗麗，李建晨,哈 婧

(河北科技大學化學與制藥工程學院，河北石家莊 050018)

為了研究青風藤配方顆粒制備工藝以及對青風藤配方顆粒與傳統湯劑進行定性定量比較，運用正交試驗方法，采用干法制粒，以出膏率、青藤堿含量為指標，優選青風藤配方顆粒制備工藝；采用薄層色譜法進行定性比較；以青藤堿為對照品，采用高效液相色譜法進行定量比較。青風藤配方顆粒最佳制備工藝如下：提取2次，加水量18倍(第1次加水量為10倍，第2次加水量為8倍)，各煎煮1.0 h。TLC結果顯示，配方顆粒與傳統湯劑化學成分的類型無明顯差異。5批青風藤配方顆粒青藤堿含量分別為1.56%，1.58%，1.31%，1.20%和1.78%；5批青風藤傳統湯劑青藤堿含量分別為0.94%，0.96%，0.85%，0.82%和1.02%。青風藤配方顆粒與傳統湯劑中化學成分的類型基本相同，但青藤堿含量差異較大。

化學分析；青風藤；配方顆粒；傳統湯劑；青藤堿

單味中藥配方顆粒是以中藥材飲片為原料，經現代制藥技術提取、濃縮、干燥、制粒、包裝而成的顆粒劑，使用時按處方量調劑后熱開水沖兌即可，具有服用、攜帶、貯藏、運輸方便，溶解迅速，免煎易服，生產自動化，條件恒定等優點[1-5]。與傳統湯劑相比，中藥配方顆粒雖然有一些優勢，但在發展過程中也存在一些問題[6-17]。例如：單味配方顆粒與傳統復方合煎湯劑是否等效；中藥配方顆粒在尚無統一國家標準的情況下，如何控制其質量及服用劑量等。這些問題都制約著配方顆粒的發展，解決這些問題成為推動其發展的關鍵。本文通過正交試驗，對配方顆粒的制備工藝以及配方顆粒與傳統湯劑的定性定量比較進行研究，分析二者之間的差異，為臨床用藥提供實驗依據。

青風藤為防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤莖[18]，始載于宋代《圖經本草》，具有祛濕、通經絡、利小便的功效，用于風濕性及類風濕性關節炎、關節腫大、四肢疼痛麻木等癥的治療。其中，青藤堿等生物堿成分為祛風止痛的主要有效成分[19]。目前，臨床上使用的青風藤制劑主要有注射劑、片劑、丸劑、膠囊劑及復方顆粒劑等劑型[20-23]。將青風藤配方顆粒作為一種新型的中藥飲片應用于臨床，有必要對其進行深入的研究和探討。本實驗通過正交試驗，確定青風藤配方顆粒的最佳制備工藝，對青風藤配方顆粒和傳統湯劑不同極性的化學成分進行薄層色譜(TLC)比較，并按照2015版《中華人民共和國藥典》“青風藤”項下的含量測定方法對青藤堿含量進行比較，為青風藤配方顆粒的推廣提供實驗參考依據。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

島津LC-2010A HT高效液相色譜儀；AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司提供)；KQ5200DE型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司提供)；Merck硅膠60 F254薄層板(德國Merck公司提供)；電熱恒溫水浴鍋(上海勝啟儀器儀表有限公司提供)。

甲醇(色譜純)，磷酸二氫鈉(優級純)，水(杭州娃哈哈集團有限公司提供)，其他試劑均為分析純。青藤堿對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號為110774-200507)。

1.2 樣品

5批青風藤藥材均購買于河北安國東方藥城，經河北省藥品檢驗研究院段吉平老師鑒定為毛青藤。樣品來源為河南(QFT-001，QFT-002)、湖北(QFT-003，QFT-004)、江蘇(QFT-005)。

1.3 配方顆粒的制備

分別稱取5批青風藤50 g，以水為提取溶劑，從加水量、提取時間、提取次數、出膏率、是否加入輔料及輔料加入量等方面進行工藝考察，并通過正交試驗優選工藝條件。綜合考慮出膏率、轉移率、生產成本、能耗等因素，確定最優工藝條件如下：浸泡1 h，提取次數2次，加水量分別為10倍、8倍，提取時間各1 h，不加輔料。合并2次濾液，減壓濃縮至干，采用干法制粒得到青風藤配方顆粒。

1.4 傳統湯劑的制備

參照《中藥煎劑質量評定標準》，分別稱取5批青風藤50 g，浸泡30 min，提取2次，分別加水至浸過藥面2 cm(加水量約為6倍和4倍)，提取時間分別為30 min和25 min，不加輔料。合并2次濾液，減壓濃縮至干，采用干法制粒得到青風藤傳統湯劑顆粒。

1.5 薄層色譜定性比較

分別稱取青風藤配方顆粒和傳統湯劑顆粒2 g，加入25 mL乙醇，加熱回流1 h，過濾，將濾液蒸干，加入1 mL乙醇溶解殘渣，作為供試品溶液。另取青藤堿對照品，加入乙醇制成1 mL含1 mg青藤堿的溶液，作為對照品溶液。分別吸取上述2種溶液各5 μL，點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(體積比為2∶4∶3∶1)為展開劑，置于用濃氨水試液預飽和20 min的展缸內展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液，日光下觀察斑點數量及顏色深淺。

1.6 青藤堿的含量測定

1.6.1 色譜條件

色譜柱：Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm，美國安捷倫科技公司提供)；流動相：甲醇-磷酸鹽緩沖液(0.005 mol/L磷酸氫二鈉溶液，以0.005 mol/L磷酸二氫鈉調節pH值至8.0，再用體積分數為1%的三乙胺調節pH值至9.0，二者體積比為55∶45)；檢測波長為262 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫為室溫；進樣量為5 μL。

1.6.2 對照品溶液的制備

取青藤堿對照品19.8 mg，精密稱定，加入甲醇制成1 mL含0.5 mg青藤堿的溶液，作為對照品溶液。

1.6.3 供試品溶液的制備

精密稱取青風藤配方顆粒和傳統湯劑顆粒約0.5 g，置于具塞錐形瓶中，加入體積分數為70%的乙醇20 mL，稱定質量。超聲20 min，放冷，再稱定質量。用體積分數為70%的乙醇補足減失的質量，搖勻，用0.45 μm濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液。

1.6.4 色譜系統適用性試驗

按照“1.6.1”條件進樣檢測，青藤堿的保留時間為8.543 min，理論塔板數大于5 000，分離度良好。青藤堿對照品、青風藤配方顆粒及青風藤傳統湯劑的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 青風藤HPLC色譜圖Fig.1 HPLC chromatogram of Caulis Sinomenii

2 結果與討論

2.1 配方顆粒制備工藝的篩選

本實驗從提取次數A、加水量B、提取時間C共3個水平，通過正交試驗優選制備工藝條件，實驗設計及結果見表1—表3。

表1 正交試驗因素水平Tab.1 Factors and levels of orthogonal experiment

表2 正交試驗結果分析Tab.2 Results of orthogonal experiment

注：正交試驗中提取次數與加水量的關系如下：若A=1，B1=12倍水，B2=18倍水，B3=24倍水；若A=2，B1=5倍水和7倍水，B2=10倍水和8倍水，B3=13倍水和11倍水；若A=3，B1=5倍水、4倍水和3倍水，B2=8倍水、6倍水和4倍水，B3=10倍水、8倍水和6倍水。

表3 出膏率方差分析Tab.3 Analysis of the variance of the ratio of extraction

表2直觀分析的結果表明，各因素的影響效果依次為A>B>C，優選方案為A3B3C2。由于目前無法權重出膏率和青藤堿含量對于提取條件哪個影響更大，因此引入了“轉移率”概念(轉移率=有效成分含量×出膏率)，為進一步深入研究提供實驗依據。

為了更好地應用于未來的工業化生產，本文僅就出膏率對提取條件的影響進行了簡單分析。出膏率方差分析結果表明，提取次數的影響最大，具有顯著性差異，加水量和提取(煎煮)時間無顯著性差異。在出膏率、青藤堿含量及轉移率無明顯差異時，應綜合考慮生產成本、人工、能耗等因素，最終建議選擇A2B2C2，即提取2次，加水量18倍(第1次加水量為10倍、第2次加水量為8倍)，各煎煮1.0 h。

2.2 薄層條件的篩選

若選用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(四者體積比為2∶4∶2∶1)于10 ℃放置的上層溶液作為展開劑，會發現原點較深；若將展開劑極性調大，甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水的體積比為2∶4∶3∶1，色譜斑點數量增多且清晰，展開效果較好。因此本實驗最終選擇甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(四者體積比為2∶4∶3∶1)為展開劑。薄層色譜圖見圖2，其中1，2，3，4，5為配方顆粒；7，8，9，10，11為傳統湯劑。

圖2 青風藤配方顆粒、傳統湯劑薄層色譜圖Fig.2 TLC of formula granules and traditional decoction of Caulis Sinomenii

結果顯示青風藤配方顆粒供試品溶液與傳統湯劑供試品溶液斑點數量、色澤深淺基本一致，兩者化學成分種類無顯著差異。

2.3 樣品含量測定

按供試品溶液配制方法分別配制配方顆粒和傳統湯劑供試品溶液各5份。精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，按照“1.6.1”條件進樣測定，計算青藤堿的含量，結果見表4。

表4 青風藤配方顆粒、傳統湯劑實驗結果Tab.4 Experimental results of formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii

3 結 論

1)對青風藤配方顆粒制備工藝進行了篩選，綜合考慮出膏率、轉移率、生產成本、能耗等因素，確定了青風藤配方顆粒的最佳制備工藝：浸泡1.0 h，提取次數2次，加水量分別為10倍、8倍，提取時間各1.0 h，不加輔料。從源頭出發降低了制劑成本，為解決中藥配方顆粒價格比傳統飲片高的問題提供實驗參考依據。

2)對青風藤配方顆粒和傳統湯劑進行了比較分析，采用薄層色譜定性比較了不同極性的化學成分。結果表明，青風藤配方顆粒供試品溶液與傳統湯劑供試品溶液顯示相同斑點，兩者化學成分種類無顯著差異。

3)采用高效液相色譜法比較了青藤堿的含量，5批青風藤配方顆粒青藤堿平均含量為1.49%，5批青風藤傳統湯劑青藤堿平均含量為0.92%。結果表明，青風藤配方顆粒青藤堿含量大于傳統湯劑青藤堿的含量，為解決中藥配方顆粒與傳統湯劑化學成分和療效差異問題提供了實驗參考依據。

4)國家應綜合分析各地配方顆粒的應用現狀，建立統一標準，解決中藥配方顆粒質量監管等問題。只有解決了這些問題，才能加快中藥配方顆粒在中國的發展步伐。

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Preparation of formula granules ofCaulisSinomeniiand comparison between formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii

ZHAO Fanfan， WANG Jiaojiao， LI Lili， LI Jianchen， HA Jing

(School of Chemical and Pharmaceutical Engineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang, Hebei 050018, China)

In order to study the preparation ofCaulisSinomeniiformula granules and conduct qualitative and quantitative comparison of formula granules and traditional decoction, by adopting dry granulating and taking the ratio of extraction and the contents of sinomenine as indexes, the paper uses the orthogonal test method to prepareCaulisSinomeniiformula granules. TLC is used for qualitative comparison, and HPLC is used for quantitative comparison withSinomenineas reference substance. The results show that the best preparation of formula granules is adding 18 times water(the first added amount is 10 times, and the second added amount is 8 times) and extracting 2 times for 1.0 hour respectively. The sinomenine contents of 5 group of formula granules are 1.56%, 1.58%, 1.31%, 1.20% and 1.78%. The sinomenine contents of the 5 group of trdaditional decoction ofCaulisSinomeniiare 0.94%, 0.96%, 0.85%, 0.82% and 1.02%. The result shows that the chemical constituents of the formula granules and the traditional decoction are similar, but the contents of sinomenine are different.

chemical analysis;CaulisSinomenii; formula granules; traditional decoction;Sinomenine

1008-1534(2016)06-0479-05

2016-07-23;

2016-10-08；責任編輯：張士瑩

河北省食品藥品監督管理局科技項目(ZD2015025)

趙帆帆(1992—)，女，河北石家莊人，碩士研究生，主要從事中藥制劑方面的研究。

哈 婧教授。E-mail：hajing02@163.com

R283；

A

10.7535/hbgykj.2016yx06007

趙帆帆, 王嬌嬌, 李麗麗，等.青風藤配方顆粒的制備及與傳統湯劑的比較[J].河北工業科技,2016,33(6):479-483. ZHAO Fanfan, WANG Jiaojiao,LI Lili， et al. Preparation of formula granules ofCaulisSinomeniiand comparison between formula granules and traditional decoction ofCaulisSinomenii[J].Hebei Journal of Industrial Science and Technology,2016,33(6):479-483.