兒童手足口病檢驗淺談

摘要：兒童手足口病為急性傳染病，其主要病原為EV71 和CoxA16，由于該病癥的臨床并發癥發生率也死亡率較高，因此一直以來都是臨床關注的重點。在臨床檢驗當中，對兒童手足口病的主要檢驗內容為血常規、心肌酶、cTnI、CRP、血糖、乳酸、血氣分析及腦脊液。為了更快、更準確的確診兒童手足口病，臨床檢驗技術也在不斷的發展，包括多種檢測設備，本次研究針對兒童手足口病的臨床檢驗進展進行匯總分析，涵蓋臨床檢驗中的檢驗方法、檢驗設備等內容，為臨床兒童手足口病的檢驗提供一定的參考。

關鍵詞：兒童手足口病；臨床檢驗；檢驗技術；進展

手足口病（HFMD）為腸道病毒（EV）引起的全球性急性傳染病，可引發手足口病的腸道病毒有20 多種。手足口病多發生于學齡前兒童，主要癥狀表現為手、足、口腔等部位的斑丘疹、皰疹。少數病例可出現腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫、循環障礙等，多由EV71 感染引起，致死原因主要為腦干腦炎及神經源性肺水腫。

1血液檢查

1.1 血常規 白細胞計數正常或降低，病情危重者白細胞計數可明顯升高，重癥手足口病中WBC計數增高患兒占50.00%。

1.2肌鈣蛋白I （cTnI）檢查 cTnI 僅存于心臟，是心肌特異性抗原，當受到病毒感染的心肌細胞發生變性壞死時，cTnI 通過破損的細胞膜釋放入血，于3～5 h 升高，24 h 達高峰。在血液中持續較長時間，反映心肌細胞損害的特異性高達97%～100%，是理想的心肌細胞特異性標志物[4]。與心肌酶學聯合應用，可以提高其檢出率。

1.3心肌酶檢查 部分病例可有谷草轉氨酶（AST）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）升高，尤其是重癥患兒，表明HFMD患者合并有心肌損傷。心肌炎是一種比較嚴重的并發癥，也是造成患兒死亡的主要原因。但是心肌酶活性增高幅度及比例都有明顯差異。CK-MB升高例數較cTnI 多，LDH、CK-MB、α-HBDH 升高比例均較大。陳大宇等報道CK-MB活性明顯升高。重視心肌酶的聯合檢查，能及早發現心肌損傷，給予相應的治療。

1.4血糖 血糖一般偏低，可能與患者發熱以及口腔皰疹影響進食等因素有關，但重癥患者可出現應激性高血糖，最高達22.0 mmol/L，研究表明，HFMD患兒一旦血糖增高，肢體無力，常提示病變累及腦干，多病情危重，預后不佳。

1.5 C反應蛋白（C-reactive protein，CRP） CRP是一種敏感的急性炎性反應標志物，升高程度常與炎性反應、組織損傷的程度呈正相關，急性細菌性感染時，CRP會升高或明顯升高，有些病毒感染造成較大的組織損傷時，可使CRP含量增高，HFMD患兒CRP一般不升高，但HFMD患兒HSCRP水平明顯升高，CRP檢測是有意義的。

1.6乳酸 實驗室檢查結果顯示危重癥患兒血乳酸明顯高于重癥患兒（P<0.05）。

1.7血氣分析 呼吸系統受累時可有動脈血氧分壓降低、血氧飽和度下降，二氧化碳分壓升高，酸中毒。

2腦脊液檢查

HFMD患兒的腦脊液外觀清亮，壓力增高，白細胞計數增多，多以單核細胞為主，蛋白正常或輕度增多，糖和氯化物正常。錢瑛等報道重癥患兒腦脊液白細胞、多核細胞比例明顯升高，腦脊液胱抑素C濃度明顯降低。并發神經系統感染患兒腦脊液細胞數均升高，其中以淋巴細胞升高為主。

2.1病原學檢查

2.2病毒分離培養 分離到病毒顆粒是確定診斷的最客觀依據。咽、氣道分泌物、皰疹液、糞便陽性率較高。分離出的腸道病毒大多來自咽拭子和糞便，腦脊液中未分離到病毒。腸道病毒（CoxA16、EV71等）特異性核酸檢測陽性，亦可確診

HFMD 。

2.3血清學檢測 急性期與恢復期血清CoxA16、EV71 等腸道病毒中和抗體有4 倍以上的升高，該方法精確且具有特異性，但不適用于早期診斷，可作為回顧性診斷，且由于腸道病毒血清型別眾多，臨床使用檢測價值有限，而多為流行病學采用。

2.3.1聚合酶鏈反應（PCR）技術檢測

2.3.2逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR） 該方法檢測標本中的EV71 快速、簡單、敏感性高，適用于咽拭子、糞便、各種體液及組織中EV71 RNA的檢測，是診斷EV71 感染的有效方法。但此法PCR 后仍需進行凝膠電泳分析，操作也較為繁瑣，同時存在假陰性、早期患者陽性率低以及無法對多種病毒聯合檢測等不足。

2.3.3實時熒光PCR（Real-time RT-PCR） 實時熒光PCR應用與靶序列直接結合的熒光探針可將生產的RNA 加以定量，其特點為檢測快速、敏感性強、擴增產物可直接定量、密閉系統防止交叉污染等。實時熒光RT-PCR 擴增技術越來越多的用于腸道病毒的檢測，是目前檢測EV、EV71 和CA16 的首選方法。

2.3.4基因芯片技術 該技術可以同時檢測多段基因，因此具有較高的靈敏度。也可以有效地降低檢測的假陽性率。此外，可以將多種與EV71 早期癥狀類似的病毒點樣到芯片上進行聯合診斷，對于確診患者、排除疑似患者具有重要意義。

近年來HFMD發病率增高，其并發癥的發生率與病死率也有增高趨勢，目前尚無針對該病的疫苗和特效治療藥物，對癥和支持治療是主要的治療措施。普通病例選擇抗病毒藥物、干擾素及中成藥等治療效果滿意，通過實驗室檢驗及早發現嚴重并發癥的可能線索，應用大劑量甲潑尼龍聯合免疫球蛋白治療效果顯著，積極早期應用機械通氣，能夠提高救治成功率。

參考文獻：

[1]Muir PU，Kammerer K，Korn M，et al.Molecular typing ofenteroviruses：current status and future requirements[J].Clin Microbio，1998，21（11）：202-227.

[2]陳大宇，潘柳吟，劉艷萍，等.超敏CRP、免疫球蛋白與CKMB聯合檢測在幼兒手足口病中的意義[J].中國衛生檢驗雜志，2011，21（6）：1542-1543.

[3]錢瑛，季亞勇，李琴，等.神經系統受累的手足口病患兒腦脊液胱抑素C水平及與病原學關系探討[J].中華醫院感染學雜志，2011，21（19）：4059-4061.

[4]蔡榕，郭嵐峰.EV71 所致重癥手足口病患兒的臨床分析及其預防控制措施[J].現代預防醫學，2011，38（22）：4618-4626.編輯/孫杰