氣相色譜法測(cè)定蔬菜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量

蘭子堯 林野 趙松華 周貽兵 李磊 劉利亞

(貴州省疾病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550004)

氣相色譜法測(cè)定蔬菜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量

蘭子堯 林野 趙松華 周貽兵 李磊 劉利亞

(貴州省疾病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550004)

有機(jī)磷； 氣相色譜； 蔬菜； 殘留量

據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國(guó)農(nóng)藥每年用量達(dá)50～60萬(wàn)噸，其中70%為有機(jī)磷農(nóng)藥[1]。有機(jī)磷農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用顯著提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量，但同時(shí)也增加了水源、食物中農(nóng)藥的殘留量，人群暴露于多種有機(jī)磷農(nóng)藥，可使健康受損[2]。歐盟、美國(guó)、日本、韓國(guó)均已立法制定了嚴(yán)格的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量標(biāo)準(zhǔn)[3]。在我國(guó)敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂(lè)果、水胺硫磷、樂(lè)果、毒死蜱和三唑磷9種農(nóng)藥是蔬菜生長(zhǎng)過(guò)程中病蟲(chóng)害防治的常用有機(jī)磷農(nóng)藥，其殘留檢測(cè)問(wèn)題已經(jīng)日益引起社會(huì)各界的共同關(guān)注。目前，國(guó)內(nèi)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法無(wú)法同時(shí)檢測(cè)上述9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，因此，需建立一種科學(xué)、快速、省時(shí)、準(zhǔn)確，一次分析多種有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定方法。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 臨床資料

1.1 主要儀器與試劑 Varian450-GC型氣相色譜儀(配PFPD檢測(cè)器，美國(guó)瓦里安公司)；LD-OV-1701石英毛細(xì)管色譜柱(30 μm×320 μm×0.32 μm，貴州萊德色譜技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司)；IKA-T25均質(zhì)器(德國(guó)IKA公司)；Sigma3-18K高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Sigma公司)；乙腈(色譜純，Merck Sharp&Dohme,MSD)；Siemens實(shí)驗(yàn)室純水器(西門(mén)子有限公司)。氯化鈉及其它試劑均為分析純(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂(lè)果、水胺硫磷、樂(lè)果、毒死蜱和三唑磷標(biāo)準(zhǔn)樣品均為100 μg/mL(農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所)。

1.2 色譜條件 載氣為高純氮?dú)猓d氣流量1.0 mL/min；氫氣流量13 mL/min；空氣1流量17 mL/min；空氣2流量10 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比10∶1；PFPD檢測(cè)器溫度280 ℃；程序升溫初始柱溫150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min速率升至250 ℃，保持8 min；進(jìn)樣量1.0 μL。分離結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 9種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

1.3 樣品測(cè)定 稱(chēng)取切碎混勻的蔬菜樣品10 g于50 mL具塞離心管中，加入乙腈30.00 mL，使用均質(zhì)器均質(zhì)3 min，加入氯化鈉5 g，置于冷凍高速離心機(jī)上以10 000r/min，-5 ℃離心10 min，取乙腈層20.00 mL過(guò)無(wú)水硫酸鈉后，濃縮定容至1.0 mL，待測(cè)定。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取溶劑的選擇 選取同一份加標(biāo)蔬菜樣品，通過(guò)試驗(yàn)比較丙酮、二氯甲烷、乙腈等溶劑對(duì)蔬菜中有機(jī)磷的提取效率，確定最佳提取溶劑。試驗(yàn)結(jié)果表明：丙酮提取效果最好，但色素等大分子也亦被提取到有機(jī)相中，并且丙酮與水互溶，增加后處理負(fù)擔(dān)；二氯甲烷密度大于水，提取液位于樣品溶液下層，不利于操作，且二氯甲烷對(duì)極性較大的有機(jī)磷提取效果不佳；乙腈提取效果較好，并且分層速度較快，便于后續(xù)測(cè)定。因而確定乙腈為最佳提取溶劑。

2.2 提取方法及凈化方案的確定 蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥提取方法主要有振蕩提取、超聲提取和均質(zhì)提取等。選用不同的提取方式，測(cè)定同一份加標(biāo)樣品，比較不同方法的提取率及實(shí)驗(yàn)過(guò)程。結(jié)果表明，振蕩提取和超聲提取耗時(shí)較長(zhǎng)，至少需要30 min，并且振蕩提取效率較低。高速組織勻漿機(jī)均質(zhì)提取速度較快，且提取效率與超聲提取相當(dāng)。因此確定使用均質(zhì)提取3 min為最佳提取方法。

提取液的凈化方法常規(guī)使用加入活性炭吸附色素、過(guò)固相萃取柱(SPE)去除雜質(zhì)，但本項(xiàng)目采用冷凍高速離心的方法進(jìn)行凈化。設(shè)置轉(zhuǎn)速在10 000r/min以上，溫度在-5 ℃以下，提取液中的固體殘?jiān)退直浑x心到離心管的底層，上層提取液較為清澈透明。雖然高速冷凍離心不能去除色素等大分子物質(zhì)，但由于PFPD檢測(cè)器的高選擇性并不影響測(cè)定。凈化時(shí)間較為快速，不消耗試劑耗材，節(jié)約分析成本。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和方法檢測(cè)限 將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在0.05～1.0 μg/mL范圍內(nèi)配制成5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。按照“1.2”項(xiàng)色譜條件進(jìn)行色譜分析，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度做線(xiàn)性回歸分析。以?xún)x器3倍信噪比(S/N=3)對(duì)應(yīng)的濃度作為儀器檢出限，以取蔬菜樣品10 g計(jì)算本方法的最低檢測(cè)濃度，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 9種有機(jī)磷農(nóng)藥線(xiàn)性測(cè)定結(jié)果

2.4 加標(biāo)回收率和精密度試驗(yàn) 在空白蔬菜樣品中添加兩種濃度的有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，考察方法檢測(cè)樣品的準(zhǔn)確度和精密度。按上述實(shí)驗(yàn)步驟操作，平行測(cè)定3次。測(cè)定樣品不同加標(biāo)濃度的回收率，計(jì)算平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 回收率和精密度試驗(yàn)結(jié)果/(mg/kg)

2.5 樣品測(cè)定 應(yīng)用本方法測(cè)定本省新鮮蔬菜樣品300份，其中47份樣品檢出禁用農(nóng)藥甲胺磷，檢出率為15.67%；17份樣品中限用有機(jī)磷農(nóng)藥超標(biāo)，超標(biāo)率為5.67%，超標(biāo)的限用有機(jī)磷農(nóng)藥主要為毒死蜱、敵敵畏和氧化樂(lè)果；其它有機(jī)磷項(xiàng)目未檢出。

3 小 結(jié)

在查閱相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]的基礎(chǔ)上，本文建立了乙腈均質(zhì)萃取，GC-PFPD同時(shí)測(cè)定上述9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，同時(shí)測(cè)定蔬菜樣品中敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂(lè)果、水胺硫磷、樂(lè)果、毒死蜱和三唑磷9種農(nóng)藥的殘留量。方法操作簡(jiǎn)便，各農(nóng)藥組分能較好地分離，各種實(shí)驗(yàn)參數(shù)均達(dá)到氣相色譜分析技術(shù)要求，并且節(jié)省耗材、溶劑，降低了分析成本，適合于大批量樣品的快速測(cè)定。

[1] 趙敏嫻，王燦楠，李亭亭，等.江蘇居民有機(jī)磷農(nóng)藥膳食累積暴露急性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].衛(wèi)生研究，2013,5(42):844-848.

[2] 潘家榮.有機(jī)磷農(nóng)藥的聯(lián)合毒性研究進(jìn)展[J].環(huán)境與健康雜志，2007,2(7):553-556.

[3] 李光浩.水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的氣相色譜法研究[J].分析化學(xué),2009,37(10):146.

[4] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定(GB/T 5009.20-2003)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003.

[5] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定(GB/T 5009.103-2003) [S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003.

[6] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.柑桔中水胺硫磷殘留量的測(cè)定(GB/T 5009.109-2003) [S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003.

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1000-744X(2016)04-0378-02

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