血清高遷移率族蛋白B1與頸動脈易損斑塊患者合并短暫性腦缺血發作的相關性研究

林秀潔 張 俊 黃禮傳

福州神經精神病防治院 福州 350000

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血清高遷移率族蛋白B1與頸動脈易損斑塊患者合并短暫性腦缺血發作的相關性研究

林秀潔 張 俊 黃禮傳

福州神經精神病防治院 福州 350000

目的 探討血清高遷移率族蛋白B(HMGB1)與頸動脈易損斑塊合并短暫性腦缺血發作(TIA)的相關性。方法 本研究共納入144例頸動脈易損斑塊患者，根據是否合并TIA分為合并TIA組(A組，n=48)及未合并TIA(B組，n=96)，另設頸動脈穩定斑塊患者(C組，n=60)及正常健康人群組(D組，n=45)為對照組，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法測量各組血清高遷移率族蛋白B1水平。結果 A組血清HMGB1水平顯著高于B組[(8.75±1.46)ng/mL vs (5.12±30.64)ng/mL]，B組血清HMGB1水平顯著高于C組[(5.12±30.64)ng/mL vs (2.35±0.42)ng/mL]，上述3組血清HMGB1水平顯著高于D組的(1.38±0.21)ng/mL，差異均有統計學意義(P<0.05)。多元Logistic回歸分析顯示，高血清HMGB1水平與頸動脈易損斑塊合并TIA呈獨立相關(優勢比2.374，95% 可信區間1.264～3.982；P<0.01)。結論 血清高遷移率族蛋白B1水平的升高有助于評估頸動脈易損斑塊患者發生TIA的風險。

頸動脈易損斑塊；短暫性腦缺血發作；高遷移率族蛋白B1；生物學標記物

短暫性腦缺血發作(transient ischemic attack，TIA)是發生缺血性腦卒中的重要預警信號，頸動脈粥樣硬化斑塊特別是易損斑塊是引起TIA的主要原因之一。因此，及時評估頸動脈易損斑塊患者發生TIA的風險，并進行積極干預，對預防缺血性腦卒中的發生具有十分重要的臨床意義。血清生物學標記物檢查具有取材方便、無創性及價格低廉等特點，在預測和評估疾病風險方面具有獨特的優勢。目前公認，炎癥反應在易損斑塊的病理生理過程中發揮極為重要的作用。高遷移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein，HMGB1)是一種廣泛分布于高等真核細胞核內的核蛋白，由壞死及受損細胞或活化的免疫細胞釋放至細胞外，在全身及局部的炎癥反應中發揮著重要的作用[1]。有研究證實，在頸動脈斑塊病理生理過程中存在HMGB1表達的改變，其與炎癥細胞的浸潤程度具有明顯的相關性[2]。然而，HMGB1與頸動脈易損斑塊合并TIA的關系，目前尚不明確。因此，本研究探討HMGB1與頸動脈易損斑塊合并TIA的相關性。

1 資料與方法

1．1 研究對象 本試驗共納入我院神經內科2012—2015年住院及門診經彩超確診為頸動脈易損斑塊的患者144例，根據患者是否合并TIA，將所有患者分為合并TIA組(A組，n=48)及未合并TIA(B組，n=96)，另選取頸動脈穩定斑塊患者(C組，n=60)及正常健康人群組(D組，n=45)為對照組。TIA診斷標準符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010版》主要排除標準：(1)心房顫動；(2)腦卒中；(3)合并嚴重的肝腎功能障礙；(4)合并全身急慢性感染性疾病；(5)合并系統性炎癥反應性疾病；(6)合并已知惡性腫瘤疾病。

1．2 研究方法

1．2．1 頸動脈血管超聲檢查：所有患者均行頸動脈血管彩超檢查，頸動脈粥樣斑塊定義為頸動脈內膜中層厚度(IMT)≥1.2 mm，斑塊突出于管腔內，呈弱低回聲、等回聲或混合性回聲，不伴聲影者為軟斑塊；斑塊表面不規則、回聲強弱不均勻為混合斑塊；斑塊呈纖維化、鈣化，回聲增強伴后方聲影者為硬斑塊；軟斑和混合斑為易損斑塊，硬斑為穩定斑塊。

1．2．2 血生化檢測：所有患者采集清晨空腹靜脈血10 mL，離心后分裝置于-80 ℃冰箱凍存待測。采用日立7180全自動生化分析儀測定空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、糖化血紅蛋白(GHb)、超敏C反應蛋白(CRP)等各項血生化指標。

1．2．3 血清HMGB1水平檢測：采用酶聯免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法測定各組血清HM-GB1水平。人HMGB1 ELISA試劑盒購自美國Phoenix Pharmaceuticals公司，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2．1 各組基線資料比較 A組較B組吸煙及CRP水平較高(P<0.05)，其余各項基本資料2組間差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組基本臨床特征比較±s)

注：與B組相比，*P<0.05

2．2 各組血清HMGB1水平比較 A組血清HMGB1水平顯著高于B組[(8.75±1.46)ng/mL vs (5.12±30.64)ng/mL]，B組血清HMGB1水平顯著高于C組[(5.12±30.64)ng/mL vs (2.35±0.42)ng/mL]，上述3組血清HMGB1水平顯著高于D組的(1.38±0.21)ng/mL，差異均有統計學意義(P<0.05)。見圖1。

2．3 各變量與合并TIA的獨立相關性 單元Logistic回歸分析發現，吸煙、CRP及HMGB1等變量與頸動脈易損斑塊患者合并TIA有相關的趨勢(P<0.20)。將這些變量納入多元Logistic逐步回歸分析，結果顯示，在排除各混雜因素的干擾后，高血清HMGB1是頸動脈易損斑塊患者合并TIA的獨立危險因子(P<0.01)。見表2。

圖1 各組血清HMGB1水平比較與D組相比，▲P<0.05；與C組相比，*P<0.05；與B組相比，#P<0.05

相關因素單元Logistic回歸多元Logistic回歸OR95%CIOR95%CI吸煙18460531～2732?18250784～3212超敏C反應蛋白16010692～3073?16580814～3574血清HMGB121861275～3821??23741264～3982??

注：*P<0.20，**P<0.05

3 討論

TIA是由頸內動脈或椎基底動脈系統病變引起的短暫性、可逆性的神經功能障礙，是老年人常見的腦血管缺血性病變，主要表現為反復發作的短暫性失語、癱瘓或感覺障礙等，如果不及時干預，容易發展成急性腦梗死。頸動脈粥樣斑塊被認為是引起TIA的常見原因，其發病機制主要在于斑塊的易損性，而非斑塊所致的管腔狹窄。易損斑塊指粥樣斑塊容易發生潰瘍、出血、破裂，引起栓子形成，造成血管栓塞。越來越多的證據支持慢性炎癥反應貫穿于動脈粥樣硬化病變發生、發展的各個環節，在一定程度上決定著粥樣斑塊的穩定性。目前已公認，動脈粥樣硬化是一種全身性、 慢 性

進展性的血管炎癥病變。近年來，作為一種新型的炎癥介質，HMGB1與易損斑塊的密切關系成為學術界研究的熱點。HMGB1 通過與細胞表面晚期糖基化終末產物受體(RAGE)及Toll樣受體2/4(TLR2/4)結合，激活胞內MAPKs、ERK1/2、NF-κB等多種信號通路，導致多種炎癥因子的釋放，后者進一步刺激HMGB1的分泌，形成正反饋效應，促進基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)的分泌，從而促使纖維帽的崩解，增加斑塊的易損性[3]。研究報道，在頸動脈粥樣硬化病理過程中存在HMGB1的高表達，且與炎癥細胞的浸潤程度具有明顯相關性[4]。盛蕾等[4]研究發現，冠心病患者血清HMGB1水平較健康人群顯著升高，其中，急性冠脈綜合征組血清HMGB1水平較穩定型心絞痛組顯著升高，提示血清HMGB1可作為CHD的監測指標之一。與上述研究結果一致，本研究中，頸動脈易損斑塊患者HMGB1水平顯著高于頸動脈穩定斑塊患者及健康人群，提示血清HMGB1可反映動脈粥樣病變炎性反應的劇烈程度。同時，本研究還發現，合并TIA的頸動脈易損斑塊患者血清HMGB1水平明顯高于未合并TIA的頸動脈易損斑塊患者，分析原因可能與合并TIA的頸動脈易損斑塊存在更嚴重的易損性有關，提示檢測血清HMGB1水平有望成為一種預測頸動脈易損斑塊患者發生TIA的重要手段。

綜上所述，血清高遷移率族蛋白B1水平是預測頸動脈易損斑塊患者合并TIA的獨立危險因子，血清高遷移率族蛋白B1水平的升高有助于預測頸動脈易損斑塊患者發生TIA的風險。本研究缺陷在于樣本量少，為單中心的橫斷面研究，需要今后大樣本、多中心的前瞻性研究進一步證實。

[1] Bianchi ME，Manfredi AA．High-mobility group box 1(HM-GB1)protein at the crossroads between innate and adaptive immunity[J]．Immunol Rev，2007，220：35-46．

[2] 李樹合，周定標，余新光，等．頸動脈粥樣硬化斑塊中HMGB1表達的改變及意義[J]．中華神經外科雜志，2007，23(2)：146-148．

[3] Scaffidi P，Misteli T，Bianchi ME．Release of chromatin protein HMGB1 by necrotic cells triggers infla mmation[J]．Nature，2002，418(6 894)：191-195．

[4] 盛蕾，伍瓊．冠心病患者高遷移率族蛋白B1水平變化的臨床研究[J]．微循環學雜志，2011，21(3)：62-63．

(收稿2016-06-21)

Relevant research between serum high mobility group protein box-1 level and vulnerable carotid plaquein patients with transient ischemic attack

LinXiujie，ZhangJun，HuangLichuan

FuzhouNeuropsychiatryHospital，Fuzhou350008，China

Objective To explore the correlation between serum high mobility group protein box-1(HMGB1) level and vulnerable carotid plaque in patients with transient ischemic attack (TIA)．Methods A total of 144 patients with vulnerable carotid plaque were included in this study，who were classified as TIA-combined group (group A，n=48)and non-TIA group (group B，n=96)．We selected another 60 cases with stable carotid plaque as group C and 45 healthy controls as group D．Serum HMGB1 levels of each group were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)．Results The serum HMGB1 level in the group A was higher than that in the group B[(8.75±1.46)ng/mL versus(5.12±30.64)ng/mL]，which showed higher level than group C[(5.12±30.64)ng/mL versus (2.35±0.42)ng/mL)]，and all the above-mentioned groups showed higher level than group D (1.38±0.21)ng/mL，all differences were significant (P<0.05)．Multivariate Logistic regression demonstrated that higher HMGB1 level was independently associated with the presence of vulnerable carotid plaque in patients with TIA (OR=2.374，95%CI：1.264 to 3.982，P<0.05)．Conclusion The higher level of serum HMGB1 may contribute to the assess the risk of TIA for the patients with the presence of vulnerable carotid plaque．

Vulnerable carotid plaque；Transient ischemic attack；HMGB1；Biomarker

R743.31

A

1673-5110(2016)24-0019-03