一例肉鴨細菌病混合感染的診斷與治療*

王苗利 ，陳靜 **， 肉先姑庫爾班 ，曹振山 ，王士榮 ，李玉杰 ，劉麗平 ，劉娜

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.新疆喀什麥蓋提縣畜牧獸醫站，新疆 麥蓋提 844600）

一例肉鴨細菌病混合感染的診斷與治療*

王苗利1，陳靜1**， 肉先姑庫爾班2，曹振山1，王士榮1，李玉杰1，劉麗平1，劉娜1

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.新疆喀什麥蓋提縣畜牧獸醫站，新疆 麥蓋提 844600）

齲齒羅氏菌（Rothia dentocariosa）為需氧或微需氧、不形成芽孢、無動力、多形態的革蘭氏陽性菌，是人類口咽部的共生菌群，也是引起齲齒和牙周病的病原菌。通常認為，齲齒羅氏菌對人類具有低毒力，但現在已公認為成年人的機會致病菌，常與感染性心內膜炎有關[1]，也可引起其他多種感染，如腹腔內感染、肺炎、腦膿腫、瓣膜周圍膿腫、眼內炎以及細菌性動脈瘤等[2]。有人報道可以從貓抓病腫大淋巴結分離出齲齒羅氏菌[3]。未見有鴨感染該菌的報道。

緩慢葡萄球菌（Staphylococcus lentus）屬于葡萄球菌屬。該菌被Kloos等于1976年命名為松鼠葡萄 球 菌 緩 慢 亞 種 （Staphylococcussciurisubsp.lentus）[4]，并由 Schleifer K H 等[5]在 1983 年將其劃分為葡萄球菌屬的一個獨立的種，即緩慢葡萄球菌（S.lentus）。緩慢葡萄球菌屬于凝固酶陰性葡萄球菌（Coagulase-negative staphylococci,CNS）[4]。CNS 曾被認為不具有致病性，但越來越多的資料表明CNS是人類或許多動物不可忽視的致病菌[6-10]。

施氏假單胞菌（Pseudomonas stutzeri）屬于假單胞菌科假單胞菌屬，假單胞菌廣泛分布于土壤、淡水、海水以及生物體中。革蘭氏陰性菌，細胞單個，多為直的或彎的桿菌，大小為 （0.5～1）um×（1.4～4）um，單鞭毛或多鞭毛，不產生鞘或突起物。生長溫度范圍較廣，可在4～43℃生長，大多數菌的最適溫度在30℃左右。生長的pH范圍在pH7.0～8.5，大多數不能在pH6或6以下生長[11]。革蘭氏大腸桿菌病是養鴨場最常見的細菌病之一。大腸桿菌既可以水平傳播，也可以垂直傳播，主要引起鴨的卵黃吸收不全、心包炎、氣囊炎、肝周炎[12]，本菌由于很容易產生耐藥性，實際生產中感染途徑及感染原因不一，臨床治療越來越復雜。

近年來，禽病感染發病原因越來越復雜，混合感染越來越常見，再加上抗生素的濫用，細菌的耐藥性越來越強，給臨床診斷帶來了很大的困難。因此，根據實驗室診斷以及科學的藥敏分析，合理的指導用藥治療，成為今后發展的趨勢，相信如果廣大養殖用戶都能科學、合理地用藥，一定會改善抗生素濫用、細菌耐藥性增強的現象，減少抗生素給禽以及人類帶來的危害，更好地應對禽場的疫病防控。

1 發病情況

2017年4月，濟寧市梁山縣某鴨場出現鴨拉稀、癱瘓進而死亡的情況。經過詢問調查，該場存欄量8000只左右，送檢當日鴨日齡為30日齡，24日齡前鴨群正常，24日齡左右的鴨部分表現出拉稀現象，大約有5%的鴨表現出癱瘓。發病的鴨伴有輕微呼吸道癥狀，采食量略微下降，發病3d后死亡數量增加，8d內死亡700只左右鴨。免疫情況：1日齡免疫大華農生產的H5N2亞型滅活苗。用藥治療情況：24日齡使用環丙沙星、黃芪多糖飲水用3d，28日齡使用氟苯尼考飲水用4d，治療效果不明顯。

解剖病變情況，肝臟輕微腫大，心包內有少量液體，肺臟水腫，小腸出現卡他性腸炎，氣管環出血，脾臟有壞死。實驗室對送檢的3只鴨進行實驗室檢測，檢測項目為新城疫病原、禽流感病原、傳染性支氣管炎病原、細菌分離、生化鑒定及藥敏分析，并根據檢驗結果指導用藥，得到了良好的效果。

2 試驗材料與方法

2.1 試驗材料移液器、熒光定量PCR儀、核酸提取儀、奧林巴斯顯微鏡，梅里埃生化及藥敏儀VITECII compact60、流感通用型熒光PCR檢測試劑盒、新城疫熒光PCR檢測試劑盒、傳染性支氣管炎熒光PCR檢測試劑盒、顯色培養基，營養瓊脂，革蘭氏染色液。

2.2 試驗方法

2.2.1 病毒檢測 選取送檢病料的肝臟、淋巴結、脾臟、氣管等部位組織樣品，經過研磨處理后使用核酸提取儀提取病毒核酸，并根據檢測試劑盒的操作步驟進行操作，通過熒光定量PCR儀進行PCR擴增，并讀取結果。

2.2.2 細菌鑒定及藥敏分析 選取送檢病料的肝臟、肺臟在顯色平板上進行接種，挑取顯色平板上培養出的細菌進行革蘭氏染色，100倍油鏡觀察細菌形態。結合鏡檢結果及培養基培養出的細菌顏色、形態的不同，挑取單菌落，三線劃線法純化到營養瓊脂平板上，將營養瓊脂平板倒置放于溫箱中，37°C培養 18～24h。根據染色鏡檢結果，選擇合適的鑒定、藥敏卡片；無菌操作，分別挑取純化的單菌落制備菌懸液，濃度控制在0.5～0.63Mc濃度，備裝鑒定卡片；將鑒定卡片和藥敏卡片分別插入制備好的菌懸液中，做好標記，裝載上機，5～18h后讀取結果。

3 結果與分析

3.1 病毒檢測結果 通過病毒檢測，新城疫病原、禽流感病原、傳染性支氣管炎病原檢測結果為陰性。

3.2 細菌鑒定及藥敏結果 經過溫箱37°C培養18～24h后，根據菌落外觀形態及革蘭氏染色染色結果，初步判定平板上長出的細菌為四種，其中兩種為革蘭氏陽性球菌，另外兩種為革蘭氏陰性桿菌。

根據鏡檢結果，選擇GP革蘭氏陽性球菌鑒定卡片和GP67革蘭氏陽性球菌藥敏卡片、GN革蘭氏陰性桿菌鑒定卡片和GN13革蘭氏陰性桿菌藥敏卡片，制備菌懸液并上機；經過鑒定和藥敏分析，鑒定結果為齲齒羅氏菌、緩慢葡萄球菌、施氏假單胞菌、大腸桿菌，用藥組合為替加環素、左氧氟沙星、黃芪多糖，肌肉注射。

4 討論

結合此次藥敏試驗的結果，以及考慮較小的血藥濃度，此鴨場選擇替加環素、左氧氟沙星、黃芪多糖治療，血藥濃度控制在1μg/ml，防止濫用藥、過度用藥，造成微生物生態失衡、耐藥菌株的增加的現象。通過用藥治療，很好控制了該鴨場病情。

另外，建議養殖場在日常中注意生物安全的科學管理，舍內、舍外定期消毒，減少病原菌的繁殖；及時清理病死禽及糞便，并做無害化處理；定期對場內鼠類等動物進行滅殺；減少外來獸醫等人員帶來的感染風險；減少與場外禽類的接觸風險。

[1]Funke G，von Graevenitz A，Clarridge JE 3rd,et al.Clinical microbiology of coryneform bacteria[J].Clin Microbiol Rev,1997,10:125-159．

[2]劉青芹,李金鐘.齲齒羅氏菌及其臨床感染[J].國際檢驗醫學雜志,2010,31(9):981-983.

[3]MullerHE.Cat-scratch disease:historical,clinical,phylogenetic and taxonomic aspects[J]．Tierarztl Prax,1997,25:94-99.

[4]趙卿，李金鐘，吳正祥.松鼠葡萄球菌腦膜炎及菌株的分離與鑒定 [J].中國人獸共患病雜志,1996，12(05):54.

[5]盛相鵬，杜崇濤，許會會.倉鼠源緩慢葡萄球菌的分離鑒定及生物學特性研究[J].動物醫學進展，2010，31(07):30-35.

[6]董明駒，史莉.凝同酶陰性葡萄球菌醫院感染及體外耐藥監測[J].中華醫院感染學雜志,2009(03):328-330.

[7]孫淑慧.凝固酶陰性葡萄球菌臨床分布及耐藥性監測分析[J].中國實用醫刊,2009(12):92-93.

[8]Irlinger F.Safety assessment of dairy microorganisms:coagulase -negative staphylococci[J].International JournalofFood Microbiology,2008,126 (03):302-310.

[9]Schleifer K H,Geyer U,Kilpper-Balz R.Elevation of Staphylococcus sciuri subsp.lentus(Kloos et al.)to species status:Staphylococcus lentus (Kloos et al.)comb[M].Nov,Systematic and Applied Microbiology,1983.

[10]Kloos W E,Schleifer K H,Smith R F,Characterization ofStaphylococcussciurisp.nov.and itssubspecies[J].InternationalJournalofSystematic Bacteriology,1976,26(01):22.

[11]布坎南 RE,吉本斯 NE.中國科學院微生物研究所譯.伯杰細菌鑒定手冊（第 8版）[M].北京：科學出版社,1984：87.

[12]劉潔，魏昆鵬，謝峰,等.鴨大腸桿菌的分離鑒定[J].養殖技術顧問,2013(8)：105.

2030年全球禽肉產量預計將會超過豬肉產量

在巴西圣保羅召開的國際豬肉和家禽展上，美國家禽及禽蛋出口委員會主席和國際家禽委員會主席James H Sumner在分析全球肉雞及火雞的生產養殖情況時指出，全球家禽業呈現“現象級”增長，2030年全球禽肉產量預計將會超過豬肉產量。需求方面，過去二十年，全球雞肉需求增長91%，年均增速3.5%；預計十年后全球雞肉需求將會再增加30%。

全球雞肉最主要的出口國是巴西和美國，兩國雞肉出口量合計占全球雞肉出口總量的三分之二，其中，巴西占比相對較高。通過對比美國2009～2016年雞肉出口形勢，Sumner表示美國已經適應了國際關系和國際優先選擇權的變化。例如，2009年，美國雞肉出口最大的單個貿易伙伴是俄羅斯，占整個市場份額的20.5%;其次是中國，占19.9%；而2016年，這兩個市場沒有與美國進行禽肉貿易，墨西哥和中國香港則成為其最主要的單個出口市場，所占份額分別為21.9%和9.8%。

同時，美國禽肉出口也面臨許多挑戰。當前由于美國禽流感爆發，中國禁止了從美國進口禽肉。Sumner期望年底能夠解除出口禁令。特朗普政府將會著手解決這一問題。此外，北美自由貿易協定(NAFTA)正在磋商，美國和墨西哥關系惡化。Sumner對此表示樂觀，認為北美自由貿易協定仍會繼續，不會有顯著變化，面臨的問題只是暫時的。雖然墨西哥能夠從任何渠道進口商品，但美國與墨西哥的地緣優勢高于任何國家，尤其是在禽肉貿易上，跟其他國家相比具有無可比擬的成本競爭力。

S858.325.1

C

1673-1085（2017）11-0044-03

2017-10-15

山東省家禽產業體系創新團隊SDAIT-11-13；病死畜禽無害化處理技術推廣；種畜禽場疫病凈化技術示范與推廣。

王苗利（1987-），女，山東人，碩士，獸醫師，研究方向：動物細菌病檢測。

**通訊作者：陳靜，博士，研究員，山東省動物疫病預防與控制中心。