七味溫陽膠囊鎮(zhèn)痛及抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

呂棟，杜雅娟，馬迎春，王蘭霞，王奕勻

（甘肅省藥品檢驗(yàn)研究院，甘肅 蘭州 730070）

腰膝酸軟、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、夜尿頻繁等是腎陽虛的典型癥狀。七味溫陽膠囊是由鹿角膠、鹿角霜、柏子仁、菟絲子、熟地黃、茯苓、補(bǔ)骨脂等七位藥材加工制成,具有補(bǔ)腎溫和、益精養(yǎng)血的功效。本文通過小鼠的動物實(shí)驗(yàn)，研究了七味溫陽膠囊對小鼠鎮(zhèn)痛及抗炎作用的影響，為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物

昆明種小鼠，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半[2]，來源：蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司，實(shí)驗(yàn)動物使用號：SYXK（甘）2016-0002，飼養(yǎng)于籠盒中，環(huán)境溫度18℃，濕度45%，自由飲食飲水。

1.2 藥品及儀器

七味溫陽膠囊（甘肅隴神戎發(fā)制藥公司，批號：20160301），36%乙酸（天津市化學(xué)試劑一廠，批號：20140923），智能熱板儀（寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠，型號：GJ8402-型），吲哚美辛腸溶片（臨汾寶珠制藥有限公司，批號：150701），電子天平，伊文思蘭（上?；瘜W(xué)試劑公司，批號040503），紫外分光光度計(jì)（日本日立公司，型號U-3010），灌胃針，氫化可的松（浙江仙琚制藥有限公司，批號：161140，規(guī)格5 mg/片），伊文氏藍(lán)（上海麥克林生化科技公司有限，批號：B10089006）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 腎陽虛動物模型的建立參照文獻(xiàn)方法[1-2]，采用腹腔注射0.1%氫化可的松的方法建立小鼠腎陽虛模型，具體方法為：實(shí)驗(yàn)小鼠腹腔注射0.1%氫化可的松0.5 mL，qd，連續(xù)10 d，每天觀察并記錄小鼠體質(zhì)量、飲水量、飲食量及溫度等指標(biāo)。

1.3.2 小鼠熱板實(shí)驗(yàn)取痛閾值在5～30 s以內(nèi)合格的小鼠60只，隨機(jī)分為6組：對照組、模型組、陽性對照組及高、中、低3個劑量的給藥組，每組10只，除對照組，其他5組按照“1.3.1”項(xiàng)建立腎陽虛模型。對照組及模型組給予等量蒸餾水，陽性對照組給予吲哚美辛腸溶片，19 mg/kg，隔日給藥1次，共3次，七味溫陽給藥3個劑量組分別給予0.31 g/kg，0.62 g/kg，1.24g/kg，按0.5 mL/20 g，灌胃（ig），qd，連續(xù)5 d，于末次給藥后1 h，2 h，4 h，6 h測定痛閾值，以小鼠舔后足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)，記錄時間。若痛閾值超過60 s，為防止?fàn)C傷小鼠足部，痛閾值記為60 s[3-7]。

1.3.3 小鼠扭體實(shí)驗(yàn)取符合“1.1”項(xiàng)小鼠60只，隨機(jī)分為6組：對照組、模型組、陽性對照組及高、中、低3個劑量的給藥組，每組10只，除對照組，其他5組按照“1.3.1”項(xiàng)建立腎陽虛模型。對照組及模型組給予等量蒸餾水；陽性對照組給予吲哚美辛腸溶片，19 mg/kg，隔日給藥1次，共3次；七味溫陽給藥組0.62 g/kg，1.24 g/kg，2.48 g/kg，按 0.5 mL/20 g，灌胃（ig），qd，連續(xù)5 d。于末次給藥1 h后，每鼠腹腔注射0.8%冰醋酸溶液0.2 mL，由于疼痛使小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)，根據(jù)文獻(xiàn)[2]，該反應(yīng)在注射后15 min內(nèi)發(fā)生的頻率高，因此以注射后15 min內(nèi)發(fā)生的扭體反應(yīng)次數(shù)作為指標(biāo)。進(jìn)行t檢驗(yàn)，并計(jì)算各組小鼠對醋酸刺激造成扭體反應(yīng)的疼痛抑制率[3-7]。

1.3.4 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性改變的影響取符合“1.1”小鼠60只，同“1.3.3”方法分組及給藥，每組10只。于末次給藥1 h后，每鼠腹腔注射0.8%醋酸0.3 mL，并立即尾靜脈注射1%伊文氏藍(lán)0.2 mL/只，30 min后處死小鼠，用注射器吸取5 mL生理鹽水反復(fù)沖洗腹腔，收集洗液，離心（1 500 r/min）10 min，取上清液在590 nm處測定吸光度[6-7]，比較小鼠毛細(xì)血管通透性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 10.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以“±s”表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 七味溫陽膠囊對小鼠熱板致痛的影響

陽性組在給藥后1 h，2 h，4 h的痛閾值顯著高于模型組（P＜0.01），七味溫陽給藥中劑量組在1 h，2 h，4 h時痛閾值均高于模型組（P＜0.01），七味溫陽給藥低劑量與高劑量組在2 h時痛閾值均高于模型組（P＜0.01）；七味溫陽給藥低劑量組在2 h，中劑量在1 h，4 h，高劑量在1 h，2 h時痛閾值顯著高于對照組（P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

表1 七味溫陽膠囊對小鼠熱板致痛的影響

2.3 七味溫陽膠囊對醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響

陽性組與七味溫陽給藥組（低、中、高劑量）小鼠扭體次數(shù)顯著低于模型組（P＜0.01）；模型組小鼠扭體次數(shù)與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），陽性組與七味溫陽給藥組（低、中、高劑量）小鼠扭體次數(shù)顯著低于對照組（P＜0.01）；給藥組小鼠扭體次數(shù)與陽性組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），七味溫陽給藥組中劑量組的扭體次數(shù)明顯低于低、高劑量組（P＜0.05），且對炎癥的抑制率也高于低、高劑量組（P＜0.05）。見表2。

表2 七味溫陽膠囊對醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響

2.4 七味溫陽膠囊對小鼠毛細(xì)血管通透性改變的影響

陽性組與七味溫陽給藥組（低、中、高劑量）均顯著低于模型組（P＜0.01）；給藥組與陽性組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。給藥組低、中劑量的通透性顯著高于高劑量組（P＜0.05）。

表3 七味溫陽膠囊對小鼠毛細(xì)血管通透性改變的影響

3 討論

七味溫陽膠囊主要用于腎陽虛引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、夜尿頻繁等癥狀。本實(shí)驗(yàn)采用小鼠鎮(zhèn)痛模型及抗炎模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，七味溫陽膠囊對上述鎮(zhèn)痛及抗炎模型均具有一定的作用，既能顯著緩解醋酸引起的疼痛，又可以延長熱板致痛時間，還能顯著降低小鼠毛細(xì)血管通透性。其中中劑量抑炎時間最持久，為臨床科學(xué)合理用藥提供參考。

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