甲狀腺癌頸淋巴結轉移診斷中D2—40免疫組化檢測和彩超的價值

王勇炫

[摘要]目的探討甲狀腺癌頸淋巴結轉移診斷中D2-40免疫組化檢測和彩超的診斷效果。方法選取2013年1月～2016年1月廣東省佛山市第二人民醫院收治的40例甲狀腺癌患者設為A組，40甲狀腺腺瘤患者設為B組，40例甲狀腺組織正常者設為對照組。所有患者均進行D2-40免疫組化檢測和彩超診斷，對比三組患者診斷效果。結果手術病理檢查，40例甲狀腺癌患者頸淋巴結轉移率為100.0%。超聲診斷準確率、靈敏度、特異性與術前觸診相比明顯較高（P<0.05）。A組患者頸淋巴結密度與B組、對照組相比明顯較高（P<0.05）。結論臨床上彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結轉移診斷準確率高，甲狀腺癌患者D2-40免疫組化染色檢測時患者頸淋巴結密度明顯高于甲狀腺良性病變患者，臨床可采取D2-40免疫組化染色輔助診斷甲狀腺癌頸淋巴結轉移診斷，提高診斷效果。

[關鍵詞]甲狀腺癌；頸淋巴結轉移；D2-40免疫組化檢測；彩超；診斷

甲狀腺癌是發生于甲狀腺的惡性腫瘤，其在女性中發病率較高。由于甲狀腺癌分型較多，許多患者發病較為隱襲，常導致臨床診治不及時，影響患者治療效果。因此，加強對患者的早期診斷，及時對患者進行針對性診治，控制疾病擴展，是保證患者生命安全的基礎。甲狀腺癌患者常出現頸淋巴結轉移狀況，且常表現為淋巴結腫大癥狀，而甲狀腺良性腫塊患者淋巴結腫大發生率較低，臨床常通過觸診輔助甲狀腺癌診斷。但采取觸診時常出現誤診和漏診狀況。D2-40屬于一種單克隆抗體，可識別特定糖蛋白，其只存在于人體淋巴管內皮中。此次研究中探討D2-40免疫組化檢測和彩超診斷的效果，以期提高甲狀腺癌的臨床診斷效果，對患者進行及時有效的治療，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2016年1月廣東省佛山市第二人民醫院收治的40例甲狀腺癌患者設為A組，患者符合《甲狀腺疾病的診斷與治療》中關于甲狀腺癌的相關診斷標準，均經手術病理檢查確診；患者未進行進一步頸淋巴結清除手術；無化療和放療史。選取同時期收治的40甲狀腺腺瘤患者設為B組，將同時期收治的40例甲狀腺組織正常者設為對照組。所有患者重要器官均無嚴重損害；所有患者均無嚴重精神性疾病，能自主表達意愿。A組患者中男女比為23：17；年齡19～74歲，平均（41.6±6.2）歲；B組患者中男女比為22：18；年齡20～74歲，平均（42.1±6.5）歲；對照組患者中男女比為21：19；患者19～75歲，平均（42.4±6.3）歲。A組、B組、對照組患者的一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

所有患者均采取觸診、彩超檢查，使用多普勒超聲診斷儀（GE公司LOJIQ-P3型）對患者進行術前檢查，頻率7.5～12MHz，對患者上中下頸、氣管部位對患者頸淋巴結部位進行觀測。對患者進行手術，清除患者頸部淋巴結，并對患者轉移淋巴結獲取部位進行標識，統計轉移淋巴結數量、分布狀況。取患者轉移淋巴結標本，使用4%甲醛溶液（湖南爾康制藥股份有限公司，H43020198）進行固定，隨后完成脫水，使用石蠟包埋，行切片，厚度4μm，將切片組織進行免疫組化染色后，使用顯微鏡觀測患者標記試驗淋巴管狀況。使用SP試劑盒、鼠抗人D2-40單克隆抗體、DBA顯色試劑盒完成染色和顯色過程，所有試劑和材料均由北京中杉金橋生物有限公司生產。陽性標本使用已知D2-40陽性乳腺浸潤性導管癌標本，陰性標本使用PBS代替抗體。

1.3觀察指標

統計病理檢查、彩超和頸部觸診對A組患者轉移淋巴結診斷狀況，對比患者彩超診斷和頸部觸診的診斷效果。對比A組患者不同部位淋巴結轉移狀況。對比三組患者D2-40免疫組化檢測的效果，對比三組患者標記淋巴管數目。以Weider標準作為計數標準，首先使用40低倍鏡對患者腫瘤狀況、周邊組織等進行觀測，確定患者淋巴管密度較高的部位，使用200高倍鏡再次進行觀測，統計患者標記淋巴管數目。計數過程中若出現與周邊組織分開的棕色內皮細胞，也計為一個標記頸淋巴管。對比三組患者頸淋巴結密度狀況：選取5個部位進行頸淋巴管計數，取平均值。

1.4統計學方法

用統計學軟件SPSS19.0對本次研究所統計數據進行分析，數據資料的表述形式如下：正態計量資料→均值±標準差；正態計數資料→例數（率）；檢驗方法如下：正態計量資料→t檢驗；正態計數資料→x²檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1超聲診斷和病理診斷A組患者淋巴結轉移狀況

采用超聲診斷時，圖像顯示淋巴結表現為腫大狀況；淋巴結髓質狀況不明顯，皮質狀況較多；淋巴結內部回聲強，部分患者表現為鈣化灶；存在淋巴結轉移的，血液流速快。

手術病理檢查，40例甲狀腺癌患者中40例患者均存在頸淋巴結轉移，頸淋巴結轉移率為100.0%。經彩超診斷，38例患者存在頸淋巴結轉移，診斷符合率為95.0%；術前采取頸部觸診，確定31例患者存在頸淋巴結轉移，診斷符合率為77.6%，采取超聲診斷準確率與術前觸診相比明顯較高，差異有統計學意義（x²=5.165，P<0.05）。

病理診斷出轉移性淋巴結43枚，非轉移性淋巴結33枚，超聲診斷轉移淋巴結44枚（病理確診42枚），非轉移性淋巴結32枚（病理確診31枚），超聲診斷靈敏度為97.7%（42/43），特異性為93.9%（31/33）。觸診轉移淋巴結42枚（病理確診34枚），非轉移性淋巴結34枚（病理確診25枚），超聲診斷靈敏度為79.1%（34/43），特異性為75.8%（25/33）。采取超聲診斷的靈敏度、特異性與觸診相比明顯較高，差異有統計學意義（x²=7.242、4.243，P<0.05）。

采用彩超診斷甲狀腺癌患者時，38例存在頸淋巴結轉移患者中，27例患者頸淋巴結轉移累及2個或以上區域，占71.1%，累及一個區域患者11例，占28.9%。采用彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結轉移時，中頸轉移檢出率與上、下頸、氣管旁相比均明顯較高，差異有統計學意義（x²=5.846、4.828、12.258，P<0.05）。見表1。

2.2D2-40免疫組化檢測效果

A組患者頸淋巴結密度與B組、對照組相比明顯較高，差異有統計學意義（t=19.021、24.066，P<0.05）。B組患者頸淋巴結密度與對照組相比明顯較高，差異有統計學意義（t=9.454，P<0.05）。見表2。

3討論

甲狀腺癌是臨床常見甲狀腺惡性腫瘤。甲狀腺癌是臨床常見疾病，導致甲狀腺病變的因素較多，缺碘、放射線、相關激素慢性刺激、生甲狀腺腫物質刺激、家族遺傳、甲狀腺疾病等均是引起甲狀腺癌的重要影響因素。甲狀腺癌患者常出現甲狀腺腫塊，增長明顯，部分患者會出現呼吸困難癥狀，由于甲狀腺癌患者臨床表現不具備特異性，使得臨床早期診斷效果不佳，影響患者治療效果。甲狀腺癌患者頸淋巴結轉移是臨床常見癥狀，其多發生在未分化癌，部分患者甲狀腺整塊狀況不明顯。因此，發現患者頸淋巴結轉移狀況，也是臨床早期輔助診斷甲狀腺癌的重要檢測方法。甲狀腺癌患者晚期可出現聲音嘶啞、呼吸困難、吞咽困難、交感神經壓迫、頸叢疼痛等，治療不及時將導致患者死亡，嚴重威脅患者生命安全。

以往診斷甲狀腺癌常采取頸部觸診來診斷，但采取頸部觸診時，對于存在淋巴結腫大患者判定為陽性，若無腫大患者則判定為陰性。因此采取頸部觸診時，對于不同患者診斷效果不同，易受患者體型狀況、淋巴結轉移部位、淋巴結大小等的影響；且醫生臨床診斷經驗也是影響診斷效果的重要影響條件。因此，采取觸診對患者轉移性淋巴結和非轉移性淋巴結狀況判斷效果不佳，易出現漏診和誤診狀況。隨著當前醫療技術的發展，彩超技術在臨床上的運用也越來越廣泛。在姜東升的相關研究中，對50例甲狀腺癌患者進行檢測，其中彩超診斷的符合率為93%，采取門診觸診的診斷準確率為85%，采取彩超診斷的符合率與觸診相比明顯較高，此次研究結果與之相符，進一步肯定了彩超對甲狀腺癌患者的診斷效果。且采取彩超診斷時，患者甲狀腺相關部位圖像顯現清晰，能直接觀測到患者淋巴腫大狀況，且顯現患者淋巴結內部狀況，出現淋巴結轉移患者淋巴結內部回聲較強，部分患者可顯現微小鈣化狀況。臨床可根據患者影像學顯現狀況及血流狀況輔助判定甲狀腺癌，提高診斷效果，因此采取超聲診斷時，能有效減少漏診和誤診狀況，提高診斷靈敏度和特異性。

D2-40屬于單克隆抗體，屬于抗M2A癌胚膜抗體，其可識別相對分子質量為40000的糖蛋白，而該糖蛋白主要存在于淋巴管內皮。D2-40免疫組化檢測時，主要利用D2-40多在腫瘤外周淋巴管上皮中表達，在腫瘤內部間質淋巴管中較少，主要因為腫瘤組織中壓力較大，能抑制腫瘤中淋巴管的生長；腫瘤細胞增生擴散、靜水壓等相關微環境等均是影響淋巴管生成的重要因素，因此甲狀腺病變狀況將會影響D2-40分布。且當前相關研究結果顯示，腫瘤內淋巴管屬于無功淋巴管，而腫瘤轉移依靠有功淋巴管，有功淋巴管主要存在于外周血管，因此可根據D2-40分布狀況判定患者淋巴結轉移狀況。此次研究中甲狀腺癌組患者頸淋巴結密度與甲狀腺腺瘤組、對照組相比明顯較高，該研究結果與上述理論相符，進一步說明隨著患者甲狀腺病變程度增加，患者頸淋巴結密度將會逐漸升高，說明頸淋巴結密度可作為臨床診斷頸淋巴結患者轉移的重要診斷指標。

綜上所述，臨床上彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結轉移診斷準確率高，可將其作為臨床診斷甲狀腺癌淋巴結轉移的重要診斷方法。甲狀腺癌患者D2-40免疫組化染色檢測時患者頸淋巴結密度明顯高于甲狀腺良性病變患者，對于彩超無法診斷患者，臨床可將采取D2-40免疫組化染色輔助診斷，以提高診斷效果。