金銀忍冬腋芽離體培養技術研究

張健+建德鋒

摘要：以金銀忍冬腋芽作為外植體進行離體培養技術研究，得出：把消毒后的腋芽切割成0.3毫米轉入MS+KT 0.5 毫克/升+NAA 0.2 毫克/升培養基，分化率達到100%；然后將分化后的不定芽切割成1厘米小段轉入MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升培養基，增殖效果最好；將增殖的大量莖段切割成2 厘米小段轉入1/2 MS+IBA 0.8 毫克/升生根培養基中，生根效果最佳。

關鍵詞：培養基配方；金銀忍冬；腋芽

基金項目：吉林省高等學校大學生創新創業訓練項目（2015004）

中圖分類號： S567.7 文獻標識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.01.017

金銀忍冬（Lonicera maackii（Rupr.） Maxim.）又叫金銀木，為落葉灌木，其多個器官均可入藥，根可解毒截瘧，莖葉祛風解毒，活血祛瘀，花淡、平，可祛風解表，消腫解毒，完全可代替金銀花入藥。目前，金銀忍冬常用繁殖方法為播種和扦插。播種繁殖過程復雜且萌發率不高，扦插繁殖季節限制嚴格，管理方面要求較高，這些都影響到金銀忍冬苗木的快速、大量、優質繁殖。隨著器官離體培養技術的發展，利用其快速、高效、去毒的優點，本試驗嘗試采用離體培養技術進行金銀忍冬繁殖。

1材料與方法

1.1試驗材料

2016年6月20日于吉林農業科技學院校園挑選生長良好、無病蟲害的金銀忍冬植株，采集帶腋芽的枝條若干，帶回組培室實驗室消毒接種。

1.2 試驗方法

1.2.1材料處理 將采集回來的枝條切成小段，每段帶一腋芽，在自來水下用流水沖洗20分鐘，然后用0.5%的84消毒液浸泡15分鐘，用無菌水沖洗3～4次，再放入0.05%次氯酸鈉（NaClO3）溶液中浸泡8分鐘，無菌水沖洗后放入超凈臺備用。

1.2.2培養基配方 初代誘導培養基：A1：MS+KT 1.0 毫克/升+NAA 0.1 毫克/升；A2：MS+KT 1.0毫克/升+NAA 0.2毫克/升；A3：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.1 毫克/升；A4：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升。增殖培養基：B1：MS+KT 0.5毫克/升；B2：MS+KT 0.5 毫克/升+IAA 0.02毫克/升；B3：MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.04 毫克/升；B4：MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.06毫克/升；B5：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.02毫克/升；B6：MS+KT 0.5 毫克/升+IBA 0.04毫克/升； B7：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.06毫克/升。生根培養基：C1：1/2MS+IBA 0.5 毫克/升；C2：1/2MS+IBA 0.8毫克/升；C3：1/2MS+IBA 1.0 毫克/升L。以上培養基均添加瓊脂6克/升，蔗糖30克/升，pH值均調整為5.6。

1.2.3培養條件 培養室濕度保持在80%，初代誘導階段溫度20℃，光照強度1600 Lx，光照時間12小時；繼代增殖階段溫度25℃，光照強度2000 Lx，光照時間14小時；生根階段溫度25℃，光照強度3000 Lx，光照時間14小時。

2結果與分析

2.1 不同初代誘導培養基上誘導不定芽情況

腋芽莖尖接種后均有不同程度的分化。20天左右莖尖開始分化出愈傷組織，進而愈傷組織出現突起，后來突起分化出不定芽，接種后55天開始統計不定芽誘導生長情況，具體結果見表1。由表1可以看出，從A1～A4，分化率、平均芽數及芽高各不相同，比較得出A4（MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2 毫克/升）分化瓶數最多、分化率最高、平均芽數最多，平均芽高最高，為最佳的培養基。

2.2不同增殖培養基上增殖情況

不定芽切段轉接到各繼代增殖培養基配方，各小段開始生長，轉瓶28天統計各瓶中苗木的增殖狀況，具體結果見表2。由表2可以看出，B5增殖倍數最大，其次為B6和B7，說明添加NAA有利于增殖，綜合比較，B6（MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升）增殖效果最好。

2.3不同生根培養基上生根情況

將繼代增殖的苗切段轉入生根培養基，25天統計各配方中苗木的生根狀況，具體結果見表3。由表3可以看出，C1、C2、C3配方生根率均較高，說明1/2 MS配方中添加IBA有利于生根；比較C1、C2、C3配方，生根率均為100%，但C2平均根數最多，另產生的根系粗壯，所以，C2（1/2 MS+IBA 0.8毫克/升）最適合作為生根培養基。

3結論與討論

通過4個培養基配比對金銀忍冬腋芽進行誘導，得出誘導最佳配方為MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升，誘導率達到100%，產生的不定芽數較多，平均達到8個以上，且不定芽生長健壯；通過比較7個配比對苗木的增殖狀況，得出MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升配方最有利于苗木增殖；通過比較3個配比對苗木的生根狀況，得出1/2 MS+IBA 0.8毫克/升配方有利于生根，生根率達到100%。腋芽是植物的常見器官，另接種腋芽莖尖能達到脫毒的效果，所以本試驗利用腋芽莖尖進行了離體誘導培養，另得出了誘導、增殖、生根三個階段的最佳培養方式，試驗僅針對培養室培養階段進行比較，對于金銀忍冬組培瓶苗的出瓶方式、基質選擇、出瓶后管理栽培等方面還有待于進一步研究探討。

參考文獻

[1] 潭文澄，戴策剛.觀賞植物組織培養技術[M].北京：中國林業出版社，1996：54.

[2] 胡瑩，楊柳青.山茶科植物組織培養研究進展[J].江蘇農業科學，2008（02）：6-8.

作者簡介：張健，2013級中藥學專業學生，研究方向：植物栽培。

通訊作者：建德鋒，碩士，副教授，研究方向：植物栽培。