核酸檢測技術(shù)在獻血者血液篩查中的作用

王建林

（內(nèi)蒙古赤峰市中心血站，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

核酸檢測技術(shù)在獻血者血液篩查中的作用

王建林

（內(nèi)蒙古赤峰市中心血站，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

目的 分析獻血者血液篩查中運用核酸檢測技術(shù)的價值。方法 通過轉(zhuǎn)錄介導擴增與實時熒光定量方法對我中心血站300份和4000份獻血者的標本實施病毒核酸檢測，比較兩種檢測方法的結(jié)果與對比檢測的結(jié)果。結(jié)果 通過這兩種方式進行檢測，都存在一定的比例的ELASA（+）和NAT（-），運用GFE核酸實施檢測之后，試劑HBV和HCV陽性的結(jié)構(gòu)低于ID-TMA的檢測試劑，此外，在本次研究中，并沒有出現(xiàn)HIV與HCV血清學漏檢的情況。結(jié)論 通過核酸的檢測可以有效降低在輸血過程中發(fā)生傳染病的概率，其中在獻血者的血液中實施病毒篩選，采用ID-TMA的檢測試劑效果更加。

核酸檢測技術(shù)；獻血者血液篩查；作用

當前，輸血所導致的傳染病已經(jīng)成為全社會重點關(guān)注的問題，因此，為了能夠更好地降低類似情況的發(fā)展，需要加強對血液病毒的篩選，從而有效排除血液中所攜帶的病毒，提升接受血液血液使用者的安全性[1]。在本文中結(jié)合我中心的情況而做出如下報道。

1 資料與方法

1.1 檢測儀器與試劑

在本文中采用的實時熒光定量的方法，即從autoX的病毒核算中提出試劑盒（此批號為：120304），HCV/HIVI-PCR和HBV的篩查試劑盒（即120304），其中IC的試劑盒批號是120405，都屬于某國公司的所生產(chǎn)的產(chǎn)品。TMA的方法為你某國公司所生產(chǎn)的自動血液檢測儀器，試劑批號是565034/20130904，鑒別試劑為HIV-I，其批號是：575108/20160312，而HBV的批號是（575112/20140314），而HCD的批號是：565106/20130215。

1.2 檢測方法

采用實時熒光定量中的PCR方法進行檢測，對其中的300份血液實時FLASA的陽性檢測，其中S/CO大于1，而其中的150份屬于陽性，而150份屬于HCV陽性。通過GFE試劑盒中的磁珠法而提取試劑并進行手工提取核酸然后分別放在HCV、HIV-1PCR和HBV的篩選試劑盒中，然后取出混合液BM與探針混合液分別在之前配置的HCV/HBV/PCR和實施混合反應[2]，然后加入大約96孔的PCR的反應板使其發(fā)生擴增反應，大約60秒之后就可以將熒光定量置于PCR中觀察。結(jié)果判斷如下：內(nèi)標為陽性，而標本為陽性的情況則視為陽性，其他則視為無效。

TMA方法，將4000份標本通過FLISA的檢測。第一，運用FDTA-K2（5 mL）抗凝真空實時血管采樣血液標本，并將其保存在溫度大約為2至8℃的環(huán)境中，并通過24小時實施離心分離的方式將血漿分離開來，然后運用ELISA的方法實施檢測，通過離心十五分鐘之后分離5000 g，吸取剩下的血漿大約1.5 mL的無RNA酶在EP管當中，并保存在零下40℃的環(huán)境中，采用單人份的NAT檢測；第二，根據(jù)相關(guān)要求而進行操作[3]，把ULTRO的試劑用在HBV、HIV和HCV進行聯(lián)檢并作出分析，然后樣本進行重復分析，例如采用ULTRO兩次實施聯(lián)檢都為陽性則可以確定NAT為陽性；第三，對這些陽性樣本實施HBV-NDA、HIV-RNA和HCNRNA鑒別并最終確定屬于哪一種病毒。

2 結(jié) 果

采用熒光定量的方法檢測，其中132份屬于陽性，而IDNAT檢出陽性為32份，所占陽性比例是24.24%，而153份HCV標本中，陽性為21份，陽性比例為13.73%。實施TMA的檢測方式中，4000份樣本中，陽性541份（13.53%），抗-HCV陽性為328份（8.20%），抗-HIV的陽性為88份（2.20%）。單人份的檢測中，NAT陽性和ELISA陰性為32份（0.80%），ELISA陽性/NAT陽性323份（8.01%）。

3 討 論

對血液篩查中采用核酸檢測的技術(shù)，主要運用是通過聚合酶鏈反應的基礎(chǔ)之上而擴展，目前，此方法在許多國家都得到廣泛運用，而在我國血站中的運用ELISA方法所出現(xiàn)的問題，即存在漏檢的情況，這就導致病毒滴度以及病毒變異的因素而導致的HIV和HBV的情況[4]，對輸血的安全性帶來重要的影響。通過核酸檢測的技術(shù)檢測，極大降低輸血中發(fā)生病毒感染的情況，同時也有效提升輸血的安全性。在本次研究中結(jié)合我血站的情況而證實此方法的效果，即熒光定量的方法檢測，ID-NAT檢出陽性為32份（24.24%），而153份HCV標本中，陽性為21份（13.73%）。TMA的檢測方式中，陽性541份（13.53%），抗-HCV陽性為328份（8.20%），抗-HIV的陽性為88份（2.20%）。單人份中NAT陽性和ELISA陰性0.80%，ELISA陽性/NAT陽性8.01%。

[1] 李莉華,王素玲,馬印圖,等.單人份核酸檢測在降低輸血感染人類免疫缺陷病毒殘余風險中的應用[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2017,29(02):107-110.

[2] 別立莉.河南省漢族獻血者HBV基因突變及抗原檢測在輸血前血液篩查中的應用臨床分析[J].中國實用醫(yī)刊,2017,44(14):36-39.

[3] 伍曉菲.2011-2014年中國國際輸血感染預防和控制(CITIC)項目血液篩查核酸檢測室間質(zhì)評結(jié)果分析[J].中國輸血雜志,2015,28(11):1410-1413.

[4] 王立林,盧 亮,聶冬梅,等.2種核酸篩查系統(tǒng)對血清學陽性獻血者檢測結(jié)果的分析[J].中國輸血雜志,2015,28(09):1090-1093.

R446.6

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ISSN.2095-8242.2017.062.12123.01

王雨辰