甲狀腺激素的免疫學檢測方法及進展

任 可，李 桐

（1.包頭醫學院，內蒙古 包頭 014040；2.包頭市動物衛生監督所，內蒙古 包頭 014040）

臨床檢測甲狀腺激素的方法多為免疫標記法，測定患者血液中的激素含量[2]。放射免疫分析法（RIA）的建立為激素等超微量物質分析史的重大技術性的突破，使過去難以精確定量的極微量物質得以確定，大大推進了我國生命科學的進步與發展[3]。隨著我國免疫學檢測技術的不斷進步與發展，技術的發展，電化學發光免疫分析技術相繼的誕生，其檢測更具敏感性、特異性、快速性及準確性，可在短時間內準確的檢測出血液內各種激素的準確水平[4]。

1 方法學進展

RIA技術的發展共經歷了5代。第一代為 Yalow 與Berson共同創建的具有競爭性的抑制免疫反應為原理的檢測方法，開辟了檢驗史上新思路；第二代的標記為游離標記抗原分離技術和抗原-抗體復合物；第三代的標志為半抗原制備抗體技術的運用及建立；第四代的標志是單克隆技術的建立。第五代的標志則為抗體固磁性微粒子，極大簡化檢測操作的程序，縮短檢測用時，為實現檢測技術的全自動分析奠定了良好的基礎。在RIA檢測技術的基礎上，相繼發展了化學發光免疫分析技術（CLIA）、酶聯免疫分析（EIA）等，使檢測的特異性及靈敏性得到進一步提升。

2 免疫學檢測方法

2.1 RIA

RIA 是由美國科學家Yallow建立的，RIA的建立使定量分析取得了劃時代的進步，使微量生物的樣品最小檢出量由之前的微克提升至皮克級的水平，為臨床檢測實踐及生物醫學的基礎理論提供了新的方法及思路，為推動世界生物醫學的發展做出了巨大的貢獻。RIA的檢測原理是運用放射性的核素標記激素中的抗體及抗原，將待測抗體或者抗原與特異性做結合而形成復合物展開檢測的的先進分析方法。目前我國多數實驗室運用該方法測定血清中的游離甲狀腺素（FT4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）及促甲狀腺激素（TSH），上述檢測項目使用的試劑均為RIA的試劑盒。

2.2 CLIA

CLIA是1977年誕生的，在RIA原理的基本上，將高靈敏化學發光和特異性強的免疫反應進行結合，是檢測微量抗體及抗原的一種非放射的免疫分析方法。早期的 CLIA顯示的特異性和RIA極為相似，但因其光信號的持續時間較短，因此在靈敏度方面低于RIA，難以滿足臨床檢測需求。上個世紀90年代初，英國Amersham公司率先在過氧化物酶催化Luminol 發光反應中將微量碘酚加入其中，將其作為發光的穩定劑，檢測發光信號結果顯示，發光信號持續了20至30分鐘，然后進行了試劑盒研究，研制了相應的試劑盒，標志著CLIA正式運用以臨床檢測。

2.3 EIA

EIA 技術誕生以上個世紀60年代，有醫學研究者將酶的催化作用和抗原抗體的特異性免疫反應進行了結合，運用特定的酶作為抗體及抗原的標記，使其成為示蹤活性性能的免疫酶，定性及定量測定的標準是根據免疫酶中催化底物的顯色，建立EIA免疫檢測方法。EIA長期存在的過程中不會生產放射性的污染，還具有操作簡單、設備安全的優勢。但由于酶的穩定性還存在一定限制，在比色法及偏振光技術中其測量范圍較窄、靈敏度較差加上定量較為困難，因此運用該方法進行檢測漏診及假陽性的發生率較高，限制了其在臨床的使用及推廣。

3 總 結

RIA技術的發展歷史悠久，該技術的不斷發展與突破為實現檢測技術的全自動分析奠定了良好的基礎，為推動世界生物醫學的發展做出了巨大的貢獻。在RIA檢測技術的基礎上，相繼發展了化學發光免疫分析技術（CLIA）、酶聯免疫分析（EIA）等檢測技術，CLIA早期的 CLIA顯示的特異性和RIA極為相似，但因其光信號的持續時間較短，因此在靈敏度方面低于RIA，難以滿足臨床檢測需求，EIA檢測技術具有不會生產放射性的污染，還具有操作簡單、設備安全的優勢，但其受到酶的穩定性的影響，測量范圍較窄，靈敏度也較差。

王程強,李勝聯,歐超燕,陳 筠,宋家樂.低水平母源性十溴聯苯醚暴露對子鼠學習記憶能力和甲狀腺激素影響[J/OL].中國職業醫學,2017,(05):547-551.

[2] 陳 瑤,韓 艷,黃 錕,嚴雙琴,任玲玲,徐葉清,盛 杰,陶芳標.馬鞍山育齡婦女孕早期和孕中期甲狀腺激素參考值隊列研究[J/OL]. 中國公共衛生,2017,10(23):1-3.

[3] 左衛星,張志飛,劉志民,王超群.參與下丘腦-垂體-甲狀腺軸負反饋調控的分子元件研究進展[J/OL].生物技術進展,2017,09(26):1-6

[4] 郭獻山,耿秀琴,趙建林,陳玉風.2型糖尿病合并不同水平高血壓患者甲狀腺激素水平變化及其相關性研究[J/OL].中國現代醫學雜志,2017,09(14):1-5.