基層動(dòng)物抗體監(jiān)測采樣注意事項(xiàng)

袁明婭

摘要：對基層動(dòng)物抗體監(jiān)測采樣注意事項(xiàng)進(jìn)行了介紹，包括采血前的準(zhǔn)備，采樣的時(shí)效性，采樣操作方法，采樣樣品的質(zhì)與量分析，樣品的標(biāo)記，樣品的保存與運(yùn)送及樣品生物安全防范措施等。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物抗體監(jiān)測；采樣；注意事項(xiàng)

中圖分類號：S851 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）10-0029-02

抗體監(jiān)測是對免疫工作的一個(gè)檢驗(yàn)，標(biāo)志著免疫工作的成敗，也是指導(dǎo)養(yǎng)殖場（戶）制定科學(xué)合理的免疫程序的一個(gè)重要依據(jù)，是動(dòng)物疫病防控的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，而高質(zhì)量有代表性的樣品是抗體監(jiān)測的基礎(chǔ)。鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心技術(shù)員直接承擔(dān)著動(dòng)物樣品采集的任務(wù)。本文對采血前的準(zhǔn)備，采樣的時(shí)效性，采樣操作方法，采樣樣品的質(zhì)與量分析，樣品的標(biāo)記以及樣品的保存與運(yùn)送和樣品生物安全防范措施等整個(gè)流程進(jìn)行了詳細(xì)的介紹，希望給養(yǎng)殖場（戶）制定科學(xué)合理的免疫程序提供依據(jù)。

1 采樣前準(zhǔn)備

（1）器械樣品采集前應(yīng)準(zhǔn)備好采血器、鑷子、酒精棉、碘酒棉、注射器及針頭等。注意采樣器具和樣品容器須無菌。

（2）記錄用品。標(biāo)簽、簽字筆、記號筆、采樣單、采樣登記表等。

（3）人員防護(hù)用具。口罩、防護(hù)鏡、一次性手套、乳膠手套、防護(hù)服、防護(hù)帽、膠靴等。

2 采樣的時(shí)效性

在做抗體檢測時(shí)，樣品采集時(shí)間與免疫日期須有規(guī)定的間隔。疫苗接種畜禽后，在畜禽體內(nèi)產(chǎn)生抗體并達(dá)到穩(wěn)定水平需要時(shí)間和過程。一般情況下，新城疫、禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫苗在免疫21 d后采集樣品，豬繁殖與呼吸綜合征疫苗在免疫28 d后采集樣品。

3 采樣操作方法

（1）采樣的消毒。采血前用75%乙醇局部螺旋消毒，以避免因采血而引起局部感染或污染樣品。對于采血后容易形成血腫的畜禽，采血完畢要及時(shí)做好止血工作，即用干棉球輕壓采血部位，防止血流過多。

（2）采血方法。根據(jù)采樣對象、目的、數(shù)量選擇合適的方法。作免疫抗體監(jiān)測采血，豬可選耳緣靜脈采血；牛、羊等大家畜可選用頸靜脈采血或心臟采血，家禽采血常用翅靜脈采血。心臟采血多用于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備等時(shí)的無菌采血。

4 樣品的質(zhì)與量

（1）高質(zhì)量樣品采集的前提。鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心采血目的多用于疫苗注射后的抗體效價(jià)監(jiān)測，采血前選擇適當(dāng)?shù)牟课弧Σ裳课幌尽凑諛悠凡杉椒▏?yán)格無菌操作等是保證獲得高質(zhì)量血清的前提。

（2）樣品的放置與分離。血液在室溫下傾斜放置2～4 h（防止暴曬），放入加有冰袋的保溫箱中24 h內(nèi)（長時(shí)間會(huì)有溶血現(xiàn)象）帶到實(shí)驗(yàn)室，待血液凝固有血清自然析出后，經(jīng)1 500～2 000 r/min離心5 min，分離血清。

（3）樣品的量。在基層采集樣品主要是為了做抗體效價(jià)的監(jiān)測，一份血清有可能做幾種病的抗體效價(jià)檢測，另外，有的很可能需要復(fù)查，所以血樣的量一定要保證。一般情況下，群體采集量為存欄量的10%左右，個(gè)體采集如豬、雞等的采血量每頭（羽）不少于3 mL，保證血清分離量不少于1 mL。

（4）樣品的質(zhì)。抽樣檢測的結(jié)果代表的是整群，從樣品的抗體合格率來反應(yīng)整群的抗體合格率。在同群中要進(jìn)行隨機(jī)采樣，不要挑著采，更不要一份樣品分為多份樣品，會(huì)導(dǎo)致樣品不能代表整群，監(jiān)測結(jié)果就沒有意義。

5 對樣品的標(biāo)記

（1）試管的標(biāo)記。采血完畢，立即用標(biāo)記筆在盛有樣品的試管寫上標(biāo)記，并與采樣畜禽對應(yīng)，同時(shí)填寫采樣單一式三份，并隨樣品送實(shí)驗(yàn)室。

（2）采樣單的填寫。采樣單是對采樣群基本情況的一個(gè)簡要記錄，一定要認(rèn)真填寫。因疫苗在畜禽體內(nèi)產(chǎn)生的抗體有一個(gè)消長規(guī)律，根據(jù)免疫和采樣時(shí)間來推測畜禽應(yīng)該達(dá)到的抗體水平，根據(jù)抗體檢測結(jié)果分析，可以更好指導(dǎo)區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖業(yè)，降低養(yǎng)殖成本。

6 樣品的保存與運(yùn)送

（1）保存。一般情況下，血液樣品分離血清后移到EP管中，蓋緊蓋子防漏，封口，標(biāo)記、整理、歸類保存。分離后的血清24 h內(nèi)監(jiān)測可冷藏保存，若需長時(shí)間保存則將血清置-20 ℃以下保存，但要盡量避免反復(fù)凍融。

（2）運(yùn)送所采集的樣品。以最快最直接的途徑送往實(shí)驗(yàn)室，能在采集后24 h內(nèi)送抵實(shí)驗(yàn)室，則可放在4 ℃左右的容器中運(yùn)送。若在24 h內(nèi)不能將樣品送往實(shí)驗(yàn)室，可在血清中加入青霉素、鏈霉素防腐敗。并在不致影響檢驗(yàn)結(jié)果的情況下才可把樣品冷凍，并以此狀態(tài)運(yùn)送。根據(jù)試驗(yàn)需要決定送往實(shí)驗(yàn)室的樣品是否放在保存液中運(yùn)送。

7 生物安全

（1）人員安全。一是采血人員、保定人員要做好個(gè)人防護(hù)工作，穿戴好防護(hù)用品，嚴(yán)格消毒，嚴(yán)防人畜共患病的發(fā)生；二是要做好采樣、檢測過程中的廢棄物處理、無害化處理等，保護(hù)環(huán)境安全，否則都可能引起散毒。

（2）畜禽安全。要做好大家畜的保定工作，防止踢傷、咬傷等意外事故的發(fā)生。采集血樣時(shí)應(yīng)先采集規(guī)模養(yǎng)殖戶，后采集散養(yǎng)戶，防止畜禽疾病的傳播。

8 小結(jié)

抗體監(jiān)測是動(dòng)物疫病防控的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，所以要求技術(shù)員認(rèn)真遵循上述操作程序，為免疫工作提供高質(zhì)量的樣品。也為養(yǎng)殖場（戶）制定科學(xué)合理的免疫程序提供重要依據(jù)。