2012～2015年西寧市職業(yè)暴露人群血清學(xué)和環(huán)境高致病性禽流感病毒監(jiān)測(cè)分析

李紅，盧囡囡，于娟，趙生倉，姜雙應(yīng)，石燕，徐莉立，趙金華

(青海省疾病預(yù)防控制中心，西寧810007)

2012～2015年西寧市職業(yè)暴露人群血清學(xué)和環(huán)境高致病性禽流感病毒監(jiān)測(cè)分析

李紅，盧囡囡，于娟，趙生倉，姜雙應(yīng)，石燕，徐莉立，趙金華

(青海省疾病預(yù)防控制中心，西寧810007)

目的了解西寧市職業(yè)暴露人群高致病性禽流感病毒感染情況和環(huán)境中高致病性禽流感病毒污染狀況。方法2012～2015年共采集職業(yè)暴露人群的血清標(biāo)本485份，采用馬紅細(xì)胞血凝抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)H5N1、H7N9、H5N6禽流感抗體；在活禽市場(chǎng)采集環(huán)境標(biāo)本879份，采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)禽流感病毒核酸FluA，陽性標(biāo)本進(jìn)行H5、H7和H9亞型核酸檢測(cè)。結(jié)果職業(yè)暴露人群血清H5N1、H5N6和H7N9抗體檢測(cè)結(jié)果均為陰性。879環(huán)境份標(biāo)本中檢出FluA陽性159份(18.09%)，其中2012～2015年Flu A陽性檢出率依次為9.55%、3.05%、20.82%、34.04%(P<0.01)；活禽零售市場(chǎng)Flu A陽性檢出率為25.24%，高于活禽批發(fā)市場(chǎng)的0.40%(P<0.01)。Flu A陽性檢出率禽類新鮮糞便8.78%、禽類飲水26.67%、籠具表面19.87%、宰殺或者擺放禽類肉案板32.10%、清洗禽類的污水40.00%，不同種類標(biāo)本檢出率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；Flu A陽性標(biāo)本亞型分析，僅H5陽性51例、僅H9陽性27例、H5和H9均陽性81例，未檢測(cè)到H7亞型。結(jié)論西寧市活禽交易市場(chǎng)中高致病性禽流感病毒陽性檢出率呈逐年增高趨勢(shì)，普遍存在著H5/H9雙重污染；西寧市職業(yè)暴露人群尚無人感染禽流感。

禽流感；職業(yè)暴露；活禽交易市場(chǎng)；病毒學(xué)監(jiān)測(cè)；西寧市

人禽流行性感冒(AHI)是由禽甲型流感病毒中某些亞型的毒株引起的急性呼吸道傳染病，感染禽類并致病的通常是H5、H7和H9亞型。中國香港特別行政區(qū)1997年首次文獻(xiàn)報(bào)道H5N1禽流感病毒由禽類傳播到人，直接感染人類發(fā)病[1]；中國大陸2005年湖南省確診第1例感染H5N1禽流感病毒病例[2]，2013年上海、江蘇、安徽、浙江四省市發(fā)生人感染H7N9禽流感疫情[3]，2014年陸續(xù)報(bào)道了人感染禽流感H5N6病例[4,5]。2009～2013年，全國29個(gè)省93個(gè)地市活禽市場(chǎng)環(huán)境標(biāo)本中檢出禽流感病毒[6]。2012年1月～2015年12月，我們?cè)谖鲗幨谢钋菔袌?chǎng)地區(qū)開展了相關(guān)監(jiān)測(cè)工作，以及時(shí)掌握禽流感病毒的感染和變化規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集 同期在西寧市選擇有代表性的家禽批發(fā)(2家)和零售市場(chǎng)(3家)，根據(jù)《2011年全國職業(yè)暴露人群血清學(xué)和環(huán)境高致病性禽流感監(jiān)測(cè)方案》，每年至少采集70份職業(yè)暴露人群血清標(biāo)本，每月從各監(jiān)測(cè)點(diǎn)采集15～20份環(huán)境標(biāo)本。共采集職業(yè)暴露人群血清標(biāo)本283份，男184例，女99例；年齡16～60歲，平均36.19歲。共采集環(huán)境標(biāo)本879份，其中2012年178份、2013年197份、2014年269份、2015年235份，標(biāo)本來自活禽零售市場(chǎng)626份、活禽批發(fā)市場(chǎng)25份，取自禽類新鮮糞便148份、禽類飲水15份、籠具表面156份、宰殺或者擺放禽類肉案板150份、清洗禽類的污水145份。

1.2 標(biāo)本檢測(cè) 采集的標(biāo)本由專業(yè)人員按照國家生物安全的規(guī)定，在4 ℃保存條件下24 h內(nèi)送至青海省疾控中心流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。青海省疾控中心流感實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后，采用馬血球血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)血清H5N1(2012～2015年)、H7N9(2013～2015年)和H5N6(2014～2015年)抗體；采用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)環(huán)境標(biāo)本中的禽流感病毒核酸Flu A，F(xiàn)lu A陽性標(biāo)本進(jìn)一步檢測(cè)H5、H7、H9亞型核酸。陽性標(biāo)本經(jīng)國家疾控中心復(fù)核。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2趨勢(shì)檢驗(yàn)或行×列表檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 職業(yè)暴露人群血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果 均未檢出H5N1(2012～2015年)、H7N9(2013～2015年)和H5N6(2014～2015年)抗體陽性。

2.2 活禽市場(chǎng)環(huán)境標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果 879份環(huán)境標(biāo)本中，檢出高致病性禽流感病毒Flu A陽性159份(18.09%)，其中2012～2015年Flu A陽性檢出率依次為9.55%、3.05%、20.82%、34.04%，呈上升趨勢(shì)(χ2=62.311，P<0.01)；活禽零售市場(chǎng)Flu A陽性檢出率為25.24%，高于活禽批發(fā)市場(chǎng)的0.40%(χ2=75.060，P=0.000)，活禽批發(fā)市場(chǎng)僅2012年度在1份禽類新鮮糞便標(biāo)本中檢出。

2.3 活禽零售市場(chǎng)不同環(huán)境標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果 Flu A陽性檢出率禽類新鮮糞便8.78%、禽類飲水26.67%、籠具表面19.87%、宰殺或者擺放禽類肉案板32.10%、清洗禽類的污水40.00%，不同標(biāo)本檢出率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=44.419，P<0.01)。

2.4 Flu A陽性標(biāo)本中不同亞型檢測(cè)結(jié)果 159份Flu A陽性標(biāo)本中,僅H5陽性51例、僅H9陽性27例、H5和H9均陽性81例，未檢測(cè)到H7亞型。

3 討論

調(diào)查顯示，2009～2013年全國城鄉(xiāng)活禽市場(chǎng)環(huán)境樣本A型禽流感病毒檢測(cè)核酸陽性率為6.47%，南方活禽市場(chǎng)環(huán)境樣本禽流感病毒核酸陽性率高于北方[6]。西寧市2012～2015年活禽交易市場(chǎng)外環(huán)境標(biāo)本禽流感病毒陽性率為18.09%，高于我國北方的新疆喀什、寧夏、天津地區(qū)[7～9]，低于我國南方的廈門、南寧、十堰地區(qū)[10～12]。本調(diào)查結(jié)果顯示，禽流感病毒核酸陽性標(biāo)本集中在活禽零售市場(chǎng)。這是因?yàn)榛钋菖l(fā)市場(chǎng)相對(duì)開闊，空氣流通較好；而活禽零售市場(chǎng)相對(duì)狹窄、攤位較為密集且相對(duì)集中，以活禽宰殺販賣為主，宰殺廢棄物隨意堆放等。因此，活禽零售市場(chǎng)是感染禽流感病毒的高風(fēng)險(xiǎn)場(chǎng)所。

與我國部分地區(qū)活禽市場(chǎng)外環(huán)境檢出禽流感病毒H7亞型[13,14]不同，西寧市活禽市場(chǎng)外環(huán)境僅檢出H5、H9兩種亞型，未檢出H7亞型。2015年1～6月西寧活禽屠宰場(chǎng)采集的雞口腔、泄殖腔棉拭子和雞血清標(biāo)本禽流感H7亞型的病原學(xué)和血清血標(biāo)本均為陰性，說明西寧市禽類市場(chǎng)并未有H7 的自然感染[15]。本調(diào)查結(jié)果顯示，西寧市活禽零售市場(chǎng)普遍存在H5和H9的雙重感染，說明活禽市場(chǎng)外環(huán)境交叉污染比較嚴(yán)重。活禽零售市場(chǎng)不同環(huán)境標(biāo)本中清洗禽類的污水中陽性檢出率最高，提示從事禽類宰殺、販賣等職業(yè)高危暴露人群接觸污水時(shí)感染禽流感的危險(xiǎn)性較高。

西寧市密切接觸人群血清標(biāo)本中未檢出H5N1、H7N9和H5N6禽流感抗體陽性，尚未發(fā)現(xiàn)人感染禽流感病例。但西寧市活禽市場(chǎng)存在禽流感病毒感染，禽流感病毒陽性檢出率從2012年的9.55%上升到2015年的34.04%。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，從事活禽交易的職業(yè)暴露人群普遍存在衛(wèi)生習(xí)慣差、徒手直接接觸和宰殺活禽、自我保護(hù)意識(shí)缺乏、屠宰廢棄物隨意堆放的現(xiàn)象，存在人感染禽流感的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)當(dāng)引起足夠的重視。今后應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)外環(huán)境禽流感病毒和職業(yè)暴露人群監(jiān)測(cè)，加強(qiáng)活禽市場(chǎng)的消毒和監(jiān)管，并采取有效防控措施。

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