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文冠木中蘆丁的微波萃取研究

2017-04-19 05:22:04王銀虎秦學
今日健康 2016年8期

王銀虎+秦學

【摘 要】 本文用正交試驗方法優選了微波輔助萃取文冠木中蘆丁工藝中的溶劑用量、輻射時間、微波功率等條件,并對提取溶劑進行篩選,試驗結果表明,提取溶劑為PH=12水溶液,用量為15倍,微波功率為350W是,文冠木中蘆丁的提取率為最高。

【關鍵詞】 文冠木 蘆丁 微波萃取

文冠木[1](Xanthoceras sorbiflia Bunge)為無患子科文冠木屬植物文冠果的枝條或莖干的木部。文冠果生于干旱丘陵地區,分布于華北、東北、西北、華南等地,主產于內蒙古?!侗静菥V目》和《救荒本草》中有記載,收于1977年版《中國藥典》,現為蒙醫常用藥材,蒙古族藥名為希拉森登,具有祛風濕、消腫止痛、斂干黃水的功效,主要用于風濕性關節炎、風濕內熱、皮膚風濕的治療。

蘆丁[2]是文冠木的主要成份,具有抗菌抗炎作用、抗輻射,調節毛細管壁的滲透,降低血管脆性,防止血管破裂且具有抑制醛糖還原酶的作用。臨床上蘆丁主要用于高血壓病的輔助治療和用于防治因蘆丁缺乏所致的其他出血癥。國內外醫藥工業中用蘆丁作原料生產多維葡萄糖羥乙基蘆丁、槲皮素、二乙胺基甲基蘆丁、二乙胺基乙基蘆丁、蘆丁鎂絡鹽、羥乙基槲皮素、鹽酸鎂蘆丁絡鹽、對氯苯氧異丁酸鎂蘆丁絡鹽及維腦路通等心血管藥物,在食品工業中蘆丁用作著色劑。因此蘆丁在國內外市場上需求量較大,由于蘆丁合成耗資較大,因此研究文冠木中蘆丁的提取工藝具有現實意義。

微波萃?。∕icrowaveExtraction,ME)[3]是微波和傳統的溶劑萃取法相結合而成的一種萃取方法。1986年等首先在分析化學制樣(天然萃取成分的提?。┘夹g中應用了微波萃取法。此技術操作方便、省時、節能,廣泛用于食品、化學合成、分析、環保、冶金、日化等領域。近年來,微波提取技術開始應用于天然產物的提取,本文用微波萃取法對文冠木中蘆丁的提取進行了研究,結果報道如下。

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

Waters600高效液相色譜儀(配有2996光電二極管檢測器,717自動進樣器,Waters600泵,Empower色譜工作站);MilliQAcademic型超純水系統(美國Millipore公司);電子天平(上海天平儀器廠);2200LH超聲波提取儀(上??茖С晝x器有限公司)。

蘆?。≧utin)對照品(由中國藥品生物制品鑒定所提供),甲醇、乙酸(美國Fisher公司)為色譜純,實驗用水為三蒸水。

1.1.1 正交實驗優選微波萃取條件

分別用溶劑用量、輻射時間、微波功率為三個因素,進行了三個因素水平正交試驗設計,各因素水平見表1如下:

因為RC>RB>RA,說明微波功率是第一影響因素,三種因素影響提取程度大小順序為:功率>輻射時間>溶劑用量.

因 對因素A:I3>I2>I1

對因素B: I3>I2>I1

對因素C:I3>I2>I1

因此,最佳條件為A3B3C3

1.1.2 提取溶劑篩選

分別精密稱取文冠木0.1g,在上述試驗條件下,分別用甲醇、乙醇70%乙醇、PH=12的水溶液作為提取溶劑進行了微波提取、離心、微孔濾膜過濾,進樣10,HPLC測試,結果見表如下:

結果表明PH=12水溶液的提取效率最好。

*利用PH=12的NaOH進行萃取,同時加入0.04g的硼砂。由于蘆丁中具有鄰二酚羥基,易發生氧化,尤其在堿液中,加入硼砂將鄰二酚羥基保護起來而有利于蘆丁的提取。再用0.1M鹽酸調制PH為6的提取液進行測試。

1.1.3 工作曲線

把標準溶液分別2、4、6、8、10進樣,在2.1項條件下測定,以進樣量(μg)為橫坐標,峰面積積分值為縱坐標,繪制工作曲線,結果蘆丁的回歸方程式:Y=4.12×106X-2.46×105,r=0.9998,線性范圍為0.4~2.0。

1.1.4 HPLC分析法

保護柱:Waters Symmetry C18(5μm,20mm×39mm);分析柱Waters Nova-pakC18(4μm,3.9×150mm),流動相:甲醇—水—乙酸(V:V:V=80:5:15),流速:0.8ml/min;檢測波長:紫外254nm,柱溫25℃。在該色譜條件下進樣后1.80分鐘時得到蘆丁的尖銳而對稱的色譜峰。

1.1.5 不用功率條件下提取率的比較

分別精密稱取文冠木0.1g,加入PH=12水溶液作為提取劑,在不同功率條件下對文冠木進行了微波提取,結果見下表:

由上表可知,隨著微波功率的增大,蘆丁產率先增加而后下降,這是由于微波功率小時,提取劑在規定時間內達不到沸騰。功率越高,提取劑在規定時間內能沸點,是提取液沸騰,提取效果反而差。微波功率為350W是提取率最高。

1.1.6 微波萃取法的可靠性評價

1.1.6.1 微波萃取實驗精密度

取6份粉碎后的文冠木藥材,在相同的微波萃取最佳條件下萃取,測定其蘆丁含量,6次測定結果的RSD為3.9%。

1.1.6.2 穩定性實驗

每隔1小時對同一文冠木供試液進行測試,結果表明供試液在6小時內穩定。

1.1.6.3 加樣回收實驗

在4份相同的文冠木樣品中加入4中不同體積的蘆丁標準溶液,在最佳微波萃取條件下處理后進行HPLC測定,計算蘆丁的回收率,蘆丁的平均回收率為97.6%,RSD為2.3%(n=4).

2 結論

微波萃取被譽為“綠色分析化學”,是因為微波萃取試劑用量少,節能、省時、污染小。使用很少的溶劑,更快的時間,更好的回收,更高的效率。通過以上實驗結果:表明微波提取法提取文冠木中的蘆丁是,PH=12水溶液作為提取液,溶劑用量為15倍,萃取時間為10min,微波功率為350W時蘆丁的提取率為最高。

參考文獻

[1]王額爾敦;蒙藥學[M];遼寧:遼寧民族出版社,2000:211-212.

[2]崔承彬,陳英杰,姚新生等.文冠木活血成分的化學研究[J].中草藥,1987,18(7):9-10

[3]韓增,張德華,寧平。微波萃取天然物活性組分[J].云南化工,2008,35(05):69-72.

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