干化學酶法在陰道炎診斷中的應用價值

摘要：目的：探討干化學酶法檢測在陰道炎臨床診斷中的應用價值。方法：對8000例患者的陰道分泌物同時進行常規手工鏡檢和干化學酶法檢測，對結果進行對比分析。結果：以顯微鏡檢查法為“標準”，干化學酶法對乳酸桿菌分析的敏感性為85%，特異性為91%，陰性預測值為80.3%，陽性預測值為93.3%；對白細胞分析的敏感性為80%，特異性為93%，陰性預測值為71.4%，陽性預測值為95.5%；對BV診斷的敏感性為84%，特異性為90%，陰性預測值為96.5%，陽性預測值為62.3%；對念珠菌分析的敏感性80%，特異性為85%，陰性預測值為96.0%，陽性預測值為48.6%；對滴蟲分析的敏感性88%，特異性為88%，陰性預測值為99.8%），陽性預測值為7.8%。結論：干化學酶法作為一種快速簡便的陰道炎過篩方法，對分泌物中的病原菌檢查是有幫助的，與標準方法比較敏感性特異性較好。

關鍵詞：陰道炎；干化學酶法；診斷；敏感性；特異性

陰道分泌物常規檢查是婦科常見的一種檢查，通過陰道的PH值，清潔度，陰道微生物等檢查來判斷女性健康情況，是一項有關女性生理衛生的身體檢查。正常情況下，陰道內以陰道桿菌為主，還有少量厭氧菌等，這些菌群形成了一種生態平衡。但當人體免疫力低下，內分泌激素發生改變或外來因素如組織損失，破壞了陰道的生態平衡時，這些常住菌群會變成致病菌，沖破陰道屏障而引起感染。大部分患者無明顯臨床癥狀或臨床癥狀較輕，起病緩慢，自覺癥狀不明顯，其主要臨床表現為外陰灼熱感、瘙癢，魚腥臭味的白帶[1]。這些疾病主要根據分泌物成分做出判斷，而分泌物檢查常規主要依賴實驗室的人工顯微鏡檢查，這方法操作較繁瑣，對人員的要求高。近年來，基于干化學酶法的研究成果—陰道炎五聯檢，結合pH，可間接反映陰道分泌物中乳酸桿菌、白細胞、厭氧菌、念珠菌和滴蟲等的狀況。但該法能否作為各種陰道炎傳統手工檢驗方法的的替代方法，還有待進一步論證。為此，我們對干化學酶法陰道炎五聯檢與常規鏡檢法檢測陰道分泌物的結果進行比較 現報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象與材料 2011年1月～2012年12月間在我院門診就診患者，共8000例，年齡19～60歲。用無菌拭子收集的患者陰道后穹窿分泌物。

1.2 檢測試劑和儀器 陰道炎五聯檢試劑盒（鄭州安圖綠科生物工程有限公司），OLYMPUS顯微鏡。

1.3 方法

1.3.1 鏡檢方法 以常規鏡檢法作為金標準。陰道分泌物涂濕片，顯微鏡下觀察清潔度、乳酸桿菌、白細胞、線索細胞、滴蟲、念珠菌，并通過革蘭染色進行確認。

1.3.2 干化學酶法陰道炎五聯檢試劑盒購自鄭州安圖綠科公司，同時檢測過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶等5項指標。實驗操作嚴格按說明書進行。

1.4 判定標準

1.4.1 顯微鏡鏡檢判定標準。結果按以下標準進行判讀：乳酸桿菌，革蘭陽性長桿菌< 6個/HP為陰性，革蘭陽性長桿菌≥6個/HP為陽性；白細胞，≥15個/HP 為陽性，< 15個/HP為陰性；細菌性陰道炎（ BV），每視野線索細胞<20%為陰性，≥20%為陽性；念珠菌，隨機鏡檢10個高倍鏡視野，未見念珠菌孢子或菌絲為陰性，有念珠菌孢子及或菌絲為陽性；滴蟲，隨機鏡檢10個高倍鏡視野，未見滴蟲為陰性，有滴蟲為陽性[3]。

1.4.2 干化學酶法五聯檢方法判定標準。按說明書提供的判定標準進行結果判讀。具體為，正常：所有指標均陰性；BV：唾液酸苷酶陽性和（ 或） 脯氨酸氨基肽酶陽性，乙酰氨基葡萄糖苷酶陰性；念珠菌性陰道病：pH≤4.6，乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性；滴蟲性陰道病：pH≥4.8，乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性。細菌性念珠菌或滴蟲性以外的陰道炎：過氧化氫陽性，白細胞酯酶陽性。

1.5 統計學分析 采用診斷陰性預測值、陽性預測值、診斷敏感性和診斷特異性。

2 結 果

2.1 干化學酶法與手工鏡檢法檢測乳酸桿菌的結果分析 與手工鏡檢法比較，過氧化氫酶法對乳酸桿菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預測值為80.3%（2929/3646），陽性預測值為93.3%（4065/4354）。見表1。

2.2 干化學酶法與手工鏡檢法檢測白細胞的結果分析 與手工鏡檢法比較，白細胞脂酶法對乳酸桿菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預測值為71.4%（2597/3639），陽性預測值為95.5%（4166/4361）。見表2。

2.3 干化學酶法與手工鏡檢法檢測線索細胞的結果分析 與手工鏡檢法比較，唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶及乙酰氨基葡萄糖苷酶聯合判斷對線索細胞（或BV）的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預測值為96.5%（5976/6194），陽性預測值為62.3%（1142/1806）。見表3。

2.4干化學酶法與手工鏡檢法檢測念珠菌的結果分析 與手工鏡檢法比較，乙酰氨基葡萄糖苷酶及PH值聯合判斷對念珠菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預測值為96.0%（5779/6019），陽性預測值為48.6%（962/1981）。見表4。

2.5干化學酶法與手工鏡檢法檢測陰道毛滴蟲的結果分析 與手工鏡檢法比較，乙酰氨基葡萄糖苷酶聯合PH值對陰道毛滴蟲的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預測值為99.8%（6960/6971），陽性預測值為7.8%（80/1029）。見表5。

3 討 論

陰道分泌物稱白帶是女性陰道正常的分泌物，它是由前庭大腺、子宮頸腺體、子宮內膜的分泌物和陰道粘膜的滲出液、脫落的陰道上皮細胞混合而成。白帶常規檢查是婦科常見的一種檢查，通過陰道的PH值，清潔度，陰道微生物等檢查來判斷女性健康情況，是一項有關女性生理衛生的身體檢查[4-6]。正常情況下，陰道內以陰道乳酸桿菌為主，還有少量厭氧菌及其它寄生菌等，這些菌群形成了一種生態平衡。當感染等因素打破這種菌群平衡，菌群之間的互相制約作用消失，乳酸桿菌失去優勢從而氫離子減少使得pH升高，病理菌得以繁殖，就產生癥狀[5-7]。

育齡婦女是陰道炎發病最常見的人群，主要通過實驗室顯微鏡檢查分泌物的檢查發現其相關成分改變或量的改變而診斷。但該技術操作比較繁瑣，對檢驗人員技術要求高，不容易統一規范。目前推出的陰道炎五聯檢技術，而其所使用的原理是干化學酶法。該法不需鏡檢，操作簡便快速。其主要通過檢測過氧化氫濃度、白細胞酯酶活性、唾液酸苷酶活性、脯氨酸氨基肽酶和氨基葡萄糖苷酶活性等成分改變來判斷分泌物里的病原菌。本文以顯微鏡檢查法為標準，干化學酶法對乳酸桿菌分析的敏感性為85%，特異性為91%；對白細胞分析的敏感性為80%，特異性為93%；對BV診斷的敏感性為84%，特異性為90%；對念珠菌分析的敏感性80%，特異性為85%，對滴蟲分析的敏感性88%，特異性為88%；與夏東[8]報道的特異性相近。干化學酶法作為一種方法，若以其作為過篩標準，乳酸桿菌、念珠菌和滴蟲的敏感性分別為85%、80%和88%，會漏掉部分陽性。實驗發現血性標本會干擾干化學酶法的檢測，就是所有的結果必須排除干擾，必須經過人工輔助判別后，才能與傳統的顯微鏡檢查結果相符合。如果不加輔助判別，實驗結果的敏感性和特異性將會明顯降低。

本文的干化學酶法陽性預測值的結果顯示，陰道毛滴蟲陽性預測值為7.8%，念珠菌陽性預測值為48.6%，細菌性陰道病（BV）陽性預測值為62.3%，白細胞陽性預測值為95.5%。提示婦女陰道炎發病的病因以線索細胞及念珠菌感染為主，陰道毛滴蟲引起發病的機率在減少。

綜上所述，干化學酶法具有操作簡便易于掌握，耗時短，結果直觀，試劑可室溫保存等優點，但其作為過篩方法需要與傳統顯微鏡結果相結合，該法敏感性特異性較好值得進一步推廣。

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