干化學(xué)酶法在陰道炎診斷中的應(yīng)用價值

摘要：目的：探討干化學(xué)酶法檢測在陰道炎臨床診斷中的應(yīng)用價值。方法：對8000例患者的陰道分泌物同時進(jìn)行常規(guī)手工鏡檢和干化學(xué)酶法檢測，對結(jié)果進(jìn)行對比分析。結(jié)果：以顯微鏡檢查法為“標(biāo)準(zhǔn)”，干化學(xué)酶法對乳酸桿菌分析的敏感性為85%，特異性為91%，陰性預(yù)測值為80.3%，陽性預(yù)測值為93.3%；對白細(xì)胞分析的敏感性為80%，特異性為93%，陰性預(yù)測值為71.4%，陽性預(yù)測值為95.5%；對BV診斷的敏感性為84%，特異性為90%，陰性預(yù)測值為96.5%，陽性預(yù)測值為62.3%；對念珠菌分析的敏感性80%，特異性為85%，陰性預(yù)測值為96.0%，陽性預(yù)測值為48.6%；對滴蟲分析的敏感性88%，特異性為88%，陰性預(yù)測值為99.8%），陽性預(yù)測值為7.8%。結(jié)論：干化學(xué)酶法作為一種快速簡便的陰道炎過篩方法，對分泌物中的病原菌檢查是有幫助的，與標(biāo)準(zhǔn)方法比較敏感性特異性較好。

關(guān)鍵詞：陰道炎；干化學(xué)酶法；診斷；敏感性；特異性

陰道分泌物常規(guī)檢查是婦科常見的一種檢查，通過陰道的PH值，清潔度，陰道微生物等檢查來判斷女性健康情況，是一項(xiàng)有關(guān)女性生理衛(wèi)生的身體檢查。正常情況下，陰道內(nèi)以陰道桿菌為主，還有少量厭氧菌等，這些菌群形成了一種生態(tài)平衡。但當(dāng)人體免疫力低下，內(nèi)分泌激素發(fā)生改變或外來因素如組織損失，破壞了陰道的生態(tài)平衡時，這些常住菌群會變成致病菌，沖破陰道屏障而引起感染。大部分患者無明顯臨床癥狀或臨床癥狀較輕，起病緩慢，自覺癥狀不明顯，其主要臨床表現(xiàn)為外陰灼熱感、瘙癢，魚腥臭味的白帶[1]。這些疾病主要根據(jù)分泌物成分做出判斷，而分泌物檢查常規(guī)主要依賴實(shí)驗(yàn)室的人工顯微鏡檢查，這方法操作較繁瑣，對人員的要求高。近年來，基于干化學(xué)酶法的研究成果—陰道炎五聯(lián)檢，結(jié)合pH，可間接反映陰道分泌物中乳酸桿菌、白細(xì)胞、厭氧菌、念珠菌和滴蟲等的狀況。但該法能否作為各種陰道炎傳統(tǒng)手工檢驗(yàn)方法的的替代方法，還有待進(jìn)一步論證。為此，我們對干化學(xué)酶法陰道炎五聯(lián)檢與常規(guī)鏡檢法檢測陰道分泌物的結(jié)果進(jìn)行比較 現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象與材料 2011年1月～2012年12月間在我院門診就診患者，共8000例，年齡19～60歲。用無菌拭子收集的患者陰道后穹窿分泌物。

1.2 檢測試劑和儀器 陰道炎五聯(lián)檢試劑盒（鄭州安圖綠科生物工程有限公司），OLYMPUS顯微鏡。

1.3 方法

1.3.1 鏡檢方法 以常規(guī)鏡檢法作為金標(biāo)準(zhǔn)。陰道分泌物涂濕片，顯微鏡下觀察清潔度、乳酸桿菌、白細(xì)胞、線索細(xì)胞、滴蟲、念珠菌，并通過革蘭染色進(jìn)行確認(rèn)。

1.3.2 干化學(xué)酶法陰道炎五聯(lián)檢試劑盒購自鄭州安圖綠科公司，同時檢測過氧化氫、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶等5項(xiàng)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1 顯微鏡鏡檢判定標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀：乳酸桿菌，革蘭陽性長桿菌< 6個/HP為陰性，革蘭陽性長桿菌≥6個/HP為陽性；白細(xì)胞，≥15個/HP 為陽性，< 15個/HP為陰性；細(xì)菌性陰道炎（ BV），每視野線索細(xì)胞<20%為陰性，≥20%為陽性；念珠菌，隨機(jī)鏡檢10個高倍鏡視野，未見念珠菌孢子或菌絲為陰性，有念珠菌孢子及或菌絲為陽性；滴蟲，隨機(jī)鏡檢10個高倍鏡視野，未見滴蟲為陰性，有滴蟲為陽性[3]。

1.4.2 干化學(xué)酶法五聯(lián)檢方法判定標(biāo)準(zhǔn)。按說明書提供的判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判讀。具體為，正常：所有指標(biāo)均陰性；BV：唾液酸苷酶陽性和（ 或） 脯氨酸氨基肽酶陽性，乙酰氨基葡萄糖苷酶陰性；念珠菌性陰道病：pH≤4.6，乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性；滴蟲性陰道病：pH≥4.8，乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性。細(xì)菌性念珠菌或滴蟲性以外的陰道炎：過氧化氫陽性，白細(xì)胞酯酶陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用診斷陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值、診斷敏感性和診斷特異性。

2 結(jié) 果

2.1 干化學(xué)酶法與手工鏡檢法檢測乳酸桿菌的結(jié)果分析 與手工鏡檢法比較，過氧化氫酶法對乳酸桿菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預(yù)測值為80.3%（2929/3646），陽性預(yù)測值為93.3%（4065/4354）。見表1。

2.2 干化學(xué)酶法與手工鏡檢法檢測白細(xì)胞的結(jié)果分析 與手工鏡檢法比較，白細(xì)胞脂酶法對乳酸桿菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預(yù)測值為71.4%（2597/3639），陽性預(yù)測值為95.5%（4166/4361）。見表2。

2.3 干化學(xué)酶法與手工鏡檢法檢測線索細(xì)胞的結(jié)果分析 與手工鏡檢法比較，唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶及乙酰氨基葡萄糖苷酶聯(lián)合判斷對線索細(xì)胞（或BV）的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預(yù)測值為96.5%（5976/6194），陽性預(yù)測值為62.3%（1142/1806）。見表3。

2.4干化學(xué)酶法與手工鏡檢法檢測念珠菌的結(jié)果分析 與手工鏡檢法比較，乙酰氨基葡萄糖苷酶及PH值聯(lián)合判斷對念珠菌的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預(yù)測值為96.0%（5779/6019），陽性預(yù)測值為48.6%（962/1981）。見表4。

2.5干化學(xué)酶法與手工鏡檢法檢測陰道毛滴蟲的結(jié)果分析 與手工鏡檢法比較，乙酰氨基葡萄糖苷酶聯(lián)合PH值對陰道毛滴蟲的檢測敏感度為85%（4065/4781），特異性91%（2929/3219），陰性預(yù)測值為99.8%（6960/6971），陽性預(yù)測值為7.8%（80/1029）。見表5。

3 討 論

陰道分泌物稱白帶是女性陰道正常的分泌物，它是由前庭大腺、子宮頸腺體、子宮內(nèi)膜的分泌物和陰道粘膜的滲出液、脫落的陰道上皮細(xì)胞混合而成。白帶常規(guī)檢查是婦科常見的一種檢查，通過陰道的PH值，清潔度，陰道微生物等檢查來判斷女性健康情況，是一項(xiàng)有關(guān)女性生理衛(wèi)生的身體檢查[4-6]。正常情況下，陰道內(nèi)以陰道乳酸桿菌為主，還有少量厭氧菌及其它寄生菌等，這些菌群形成了一種生態(tài)平衡。當(dāng)感染等因素打破這種菌群平衡，菌群之間的互相制約作用消失，乳酸桿菌失去優(yōu)勢從而氫離子減少使得pH升高，病理菌得以繁殖，就產(chǎn)生癥狀[5-7]。

育齡婦女是陰道炎發(fā)病最常見的人群，主要通過實(shí)驗(yàn)室顯微鏡檢查分泌物的檢查發(fā)現(xiàn)其相關(guān)成分改變或量的改變而診斷。但該技術(shù)操作比較繁瑣，對檢驗(yàn)人員技術(shù)要求高，不容易統(tǒng)一規(guī)范。目前推出的陰道炎五聯(lián)檢技術(shù)，而其所使用的原理是干化學(xué)酶法。該法不需鏡檢，操作簡便快速。其主要通過檢測過氧化氫濃度、白細(xì)胞酯酶活性、唾液酸苷酶活性、脯氨酸氨基肽酶和氨基葡萄糖苷酶活性等成分改變來判斷分泌物里的病原菌。本文以顯微鏡檢查法為標(biāo)準(zhǔn)，干化學(xué)酶法對乳酸桿菌分析的敏感性為85%，特異性為91%；對白細(xì)胞分析的敏感性為80%，特異性為93%；對BV診斷的敏感性為84%，特異性為90%；對念珠菌分析的敏感性80%，特異性為85%，對滴蟲分析的敏感性88%，特異性為88%；與夏東[8]報道的特異性相近。干化學(xué)酶法作為一種方法，若以其作為過篩標(biāo)準(zhǔn)，乳酸桿菌、念珠菌和滴蟲的敏感性分別為85%、80%和88%，會漏掉部分陽性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)血性標(biāo)本會干擾干化學(xué)酶法的檢測，就是所有的結(jié)果必須排除干擾，必須經(jīng)過人工輔助判別后，才能與傳統(tǒng)的顯微鏡檢查結(jié)果相符合。如果不加輔助判別，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的敏感性和特異性將會明顯降低。

本文的干化學(xué)酶法陽性預(yù)測值的結(jié)果顯示，陰道毛滴蟲陽性預(yù)測值為7.8%，念珠菌陽性預(yù)測值為48.6%，細(xì)菌性陰道病（BV）陽性預(yù)測值為62.3%，白細(xì)胞陽性預(yù)測值為95.5%。提示婦女陰道炎發(fā)病的病因以線索細(xì)胞及念珠菌感染為主，陰道毛滴蟲引起發(fā)病的機(jī)率在減少。

綜上所述，干化學(xué)酶法具有操作簡便易于掌握，耗時短，結(jié)果直觀，試劑可室溫保存等優(yōu)點(diǎn)，但其作為過篩方法需要與傳統(tǒng)顯微鏡結(jié)果相結(jié)合，該法敏感性特異性較好值得進(jìn)一步推廣。

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