龍血竭對急性心肌梗死家兔左心功能的保護研究

程初勇 梁麗梅 劉燕 李志樂++李克拉 劉文靜 張倬華 黃照河

【摘要】目的探討龍血竭對急性心肌梗死家兔左心功能的保護作用。

方法將30只家兔隨機分為三組，假手術組、心肌梗死組、龍血竭干預組，每組10只。采用左冠狀動脈前降支結扎法，建立急性心肌梗死模型。觀察HE染色的心肌組織結構變化，測量心率、左心室收縮末壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內壓最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室內壓最大下降速率（-dp/dtmax）。

結果龍血竭干預組心肌組織結構明顯好于心肌梗死組；心肌梗死組和龍血竭干預組其心率較假手術組明顯減慢，龍血竭干預組心率減慢更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組、龍血竭干預組與假手術組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預組下降更明顯，差異有統計學意義（P<0.01）。

結論龍血竭對急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護作用。

【關鍵詞】龍血竭；急性心肌梗死；左心功能；保護

中圖分類號：R542.2+2文獻標識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.004

A study on protection effect of Resina Draconis on left ventricular function of acute myocardial infarction rabbits

[HJ1*2][HJ]

CHENG Chuyong1，LIANG Limei2，LIU Yan3，LI Zhile3，LI Kela3，LIU Wenjing1，ZHANG Zhuohua1，HUANG Zhaohe3▲

（1.Graduate School， 2. Department of Laboratory Medicine of Affiliated Hospital， 3.Department of Cardiology of Affiliated Hospital， Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000， China）

[HJ1*2][HJ]

【Abstract】ObjectiveTo study protection effect of Resina Draconis on left ventricular function of acute myocardial infarction rabbits.

Methods30 rabbits were randomly divided into sham operation group， myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group with 10 rabbits in each group. Acute myocardial infarction model was established by left anterior descending coronary artery ligation method. The changes of myocardial tissue structure were observed by HE staining， and heart rate， left ventricular end systolic pressure（LVSP）， left ventricular end diastolic pressure（LVEDP）， maximum rise rate of left ventricular pressure（+dp/dtmax） and maximum descending rate of left ventricular pressure （-dp/dtmax） were measured.

ResultsThe structure of myocardium in the Resina Draconis intervention group was significantly better than that in the myocardial infarction group. Heart rates of myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group significantly slowed down compared with that of the sham operation group， and that of the Resina Draconis intervention group decreased more significantly（P<0.05 or 0.01）. Compared with that of the sham operation group， LVSP of both myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group significantly decreased， while LVEDP significantly increased，and LVSP of the myocardial infarction group decreased more significantly， and LVEDP increased more significantly than those of the Resina Draconis intervention group（P<0.05 or 0.01）. In addition， the +dp/dtmax and -dp/dtmax of the myocardial infarction group and Resina Draconis intervention group decreased more significantly than those of the sham operation group， and those of the myocardial infarction group decreased more significantly than those of the Resina Draconis intervention group， difference was statistically significant（P<0.01）.

ConclusionResina Draconis has good protective effect on left ventricular function in acute myocardial infarction rabbits.

【Key words】Resina Draconis； acute myocardial infarction； left ventricular function； protection

隨著經濟快速發展和人們的生活水平不斷提高，人們的生活方式也發生了明顯改變，心血管疾病的發病率也逐年攀升，特別是急性心肌梗死的發生率更是快速增長，2014年中國急性心肌梗死死亡率城市為55.32/10萬，農村為68.6/10萬[1]。雖然近年來一些新的診療技術得到廣泛應用，但急性心肌梗死后心功能不全仍是其重要的死亡原因。如何保護急性心肌梗死后患者心功能、降低其死亡率已成為當今國內外學者研究的熱點。本實驗予龍血竭對急性心肌梗死家兔進行干預，觀察其對急性心肌梗死家兔左心功能的保護作用，為進一步改善急性心肌梗死后心功能不全探索新的防治思路和新的理論依據。

1材料與方法

1.1動物

家兔30只，雌雄各一半，體重為2.0～30 kg。右江民族醫學院實驗動物中心提供，動物生產許可證號：SCXK桂20120003。

1.2設備

V100小型動物呼吸機（上海玉研科學儀器有限公司），BL420E+生物機能實驗系統（成都泰盟科技公司），ECG6511心電圖機（上海光電醫用電子儀器有限公司），MICROM EC3501組織包埋機（Thermo scientifi，德國），Shandon Varistain Gemini ES全自動染色機（Thermo scientific，德國），HM315切片機（Thermo scientific，德國），ASP300S自動組織脫水機（Leica，德國）。

1.3藥物與試劑

龍血竭（桂林三金藥業藥品研究所提供，紅褐色粉末狀），20%氨基甲酸乙酯（成都市科龍化工試劑廠），10%中性福爾馬林固定液（無錫市江原實業技貿總公司）。

1.4分組及給藥

將30只家兔隨機分成三組：假手術組、心肌梗死組、龍血竭干預組。每組10只，雌雄各半，假手術組與心肌梗死組每天正常飲食，龍血竭干預組用龍血竭180 mg·kg-1·d-1加玉米淀粉做成飼料形狀，觀察家兔完全進食，手術前連續給藥7天。

1.5家兔心肌梗死模型的制備

手術前禁食12小時，按1.0 g·kg-1應用20%氨基甲酸乙酯耳緣靜脈注射麻醉家兔，仰臥位固定手術臺上，四肢皮下連接心電圖機，監測動物心電圖，剪去頸部毛發，切開皮膚，暴露氣管，行氣管插管，連接小型動物呼吸機（呼吸頻率：45～50次/分鐘，潮氣量16～20 ml，呼吸比1∶1）。于胸骨左側2～3 cm切開皮膚，鈍性分離肌肉，剪斷左側第3～5肋骨，暴露心臟，小心剪開心包膜，于左心耳處找到左冠狀動脈前降支，從前降支下方1～2 mm進針，牽引出30號縫合絲線，假手術組不結扎；心肌梗死組和龍血竭干預組均在前降支上墊放約1.0 cm長PE塑料細管結扎30分鐘后，剪去縫合線，開放血管2小時。造模過程中，Ⅱ導聯ST段弓背抬高，心肌組織變為暗紅色為造模成功（心電圖見圖1）。

圖1三組家兔造模過程心電圖

1.6測量家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax

所有實驗動物均剪去前降支結扎線使心肌再灌注2小時后，動脈測壓管連接15 G注射針頭，另一頭再連接到生物機能實驗系統，直接從心尖部將注射針頭插入左心室，測量心率、左心室收縮末壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內壓最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室內壓最大下降速率（-dp/dtmax）。

1.7心肌組織HE染色

將以上各組家兔心臟分離出體外，選用左心室前壁心肌組織，10%中性福爾馬林固定，進行HE常規染色。

1.8統計學方法

應用SPSS 17.0統計學軟件進行統計學分析，正態分布的計量資料用（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD方法，檢驗水準：α=0.05，雙側檢驗。

2結果

2.1龍血竭對心肌組織的影響

假手術組：心肌組織HE染色心肌纖維結構層次清晰，細胞排列整齊有序，細胞核清晰可見，染色濃淡均勻一致（圖2A）；心肌梗死組：心肌組織HE染色顏色變深變濃，細胞核清晰欠佳，細胞間紅細胞滲出，心肌纖維排列紊亂，可見纖維斷裂現象（圖2B）；龍血竭干預組：心肌組織HE染色胞漿濃染輕，結構比較規則，心肌纖維較為清晰，細胞核染色均勻，細胞間可見紅細胞少量滲出（圖2C）。

A：假手術組；B心肌梗死組；C：龍血竭干預組。

圖2 心肌梗死后心肌組織壞死肉眼觀及三組家兔心肌組織HE染色（10×40倍）

2.2龍血竭對急性心肌梗死家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax的影響

實驗中發現心肌梗死組和龍血竭干預組其心率較假手術組明顯減慢，龍血竭干預組心率減慢更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組、龍血竭干預組與假手術組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預組下降更明顯（均P<0.01）。詳見表1。

表1三組家兔心率、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax（n=10，±s）

分組心率（次/分） LVSP（mmHg）LVEDP（mmHg） +dp/dtmax（mmHg/ms）-dp/dtmax（mmHg/ms）

假手術組291.90±28.25110.86±7.58-15.86±5.221.97±0.12-2.04±0.14

心肌梗死組272.50±2.72a44.84±5.71b16.15±1.48b0.56±0.11b-0.60±0.08b

龍血竭干預組240.50±4.53bc71.12±6.12bc-12.48±3.15ac1.28±0.93bc-1.29±0.14bc

F24.48259.68235.38418.71329.20

P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

注：與假手術組比較，aP<0.05，bP<0.01；與心肌梗死組比較，cP<0.01。

3討論

急性心肌梗死發生后，冠狀動脈堵塞導致心肌細胞嚴重持久缺血缺氧，心肌細胞壞死，心肌纖維斷裂溶解，從而出現明顯的心功能不全，這是導致急性心肌梗死患者死亡的重要因素之一。另外，當急性心肌梗死發生時，很多炎癥因子如TNFα、IL10、ICAM1等參與其病理生理過程，使心室重構，進一步加重心功能的惡化[2～3]。我們從本次實驗心肌組織HE染色結果圖中不難看出，假手術組家兔心肌組織結構清晰，肌節明顯，染色濃淡均勻（如圖2A），而心肌梗死組心肌組織HE染色中可見染色顏色明顯加深，肌纖維水腫明顯，排列結構明顯紊亂，符合心肌梗死后心肌組織改變圖像（如圖2B）。龍血竭干預組心肌組織的HE染色中可見組織染色顏色濃淡較均勻，纖維結構比較清晰，肌纖維水腫不明顯，明顯好于心肌梗死組（如圖2C）。這提示龍血竭對急性心肌梗死家兔心肌組織起到很好的保護作用，能明顯提高心肌纖維耐受缺血缺氧的能力。

LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax都是反映心臟功能狀態的指標，其中+dp/dtmax較好地反映心臟收縮功能，而-dp/dtmax較好反映心臟舒張功能，LVSP水平高體現左心室收縮功能好，LVSP水平低體現左心室收縮功能下降，而LVEDP水平高體現左心舒張功能下降，LVEDP水平低體現左心舒張功能好[4]。當發生急性心肌梗死時，左心室功能會明顯下降，LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax均明顯降低，而LVEDP會明顯升高[5]。本次實驗中我們也應用LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax等指標來評價急性心肌梗死家兔左心功能的變化情況。研究發現，心肌梗死組、龍血竭干預組與假手術組比較，其LVSP均明顯下降、LVEDP均明顯升高，而心肌梗死組與龍血竭干預組比較，其LVSP下降更明顯、LVEDP升高更明顯（P<0.05或0.01）。心肌梗死組和龍血竭干預組其+dp/dtmax和-dp/dtmax均較假手術組明顯下降，且心肌梗死組較龍血竭干預組下降更明顯（均P<0.01）。說明急性心肌梗死后左心功能均有明顯下降，左心收縮功能和舒張功能均受到不同程度的影響，但龍血竭干預組其左心收縮和舒張功受影響明顯減小，這提示龍血竭對急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護作用。我們的研究還發現，心肌梗死組和龍血竭干預組其心率較假手術組明顯減慢，而龍血竭干預組心率減慢更明顯，兩兩比較均有統計學意義（P<0.05或0.01），其具體機制尚不明確，有待進一步深入研究。

龍血竭是廣西傳統名貴中藥，從百合科植物劍葉龍血樹分泌樹脂中提取得到，具有改善微循環、增加冠狀動脈血流、抑制血小板聚集及降低血液黏滯度等作用[6]。鮑文菁等研究發現[7]，服用復方龍血竭膠囊治療急性心肌梗死，可以縮小左心室末徑。Foroogh Namjoyan等學者進行的隨機雙盲觀察研究發現[8]，龍血竭能明顯縮短治療傷口的愈合時間。Nian Xin等學者在大鼠局灶性腦缺血模型中發現[9]，龍血竭能夠提高大鼠的抗氧化活性，去除過多的自由基，并減少脂質過氧化。林洪瑞等研究也發現[10]，龍血竭能減輕皮瓣中性粒細胞的聚集，促進血管新生，改善血液供應，能提高隨意皮瓣的成活率。以上這些研究表明，龍血竭藥理作用機理較為復雜，可能從活血化瘀、清除氧自由基、減少炎癥反應等多方面發揮其藥理作用，而我們的研究發現其對急性心肌梗死家兔左心功能具有較好的保護作用。

綜上所述，我們認為龍血竭對急性心肌梗死家兔心肌組織起到很好的保護作用，能明顯提高心肌纖維耐受缺血缺氧的能力，從而對急性心肌梗死左心功能具有更好的保護作用，對急性心肌梗死的防治具有較高的臨床應用價值，但其機理尚未明確，值得我們廣大學者進一步去深入研究和探索，為心血管疾病的防治提供新的思路和理論依據。

參考文獻

[1]陳偉偉，高潤霖，劉力生，等.《中國心血管病報告2015》摘要[J].中國循環雜志，2016，31（6）：521528.

[2]梁麗梅，黃照河，藍景生，等.急性心肌梗死并全身炎性反應綜合征TNFα和CRP表達的臨床研究[J].右江醫學，2011，39（6）：727728.

[3]劉雪巖，李成花，楊萍.炎癥反應在心梗后心衰發病過程中的作用研究進展[J].分子影像學雜志，2017，40（1）：8184.

[4]李云霞.心肌力學和心肌收縮性能的評定[J].生理科學進展，1980，11（3）：212219.

[5]呂志偉.有氧運動協同骨髓干細胞動員對心肌梗死后心電圖和血流動力學指標的影響[J].中國組織工程研究，2015，19（19）：29592964.

[6]曾令榜，張金平.傳統中藥材龍血竭藥性藥理及臨床應用探討[J].亞太傳統醫藥，2014，10（3）：4344.

[7]鮑文菁，吳洪斌，方靜.復方龍血竭膠囊輔助西藥治療急性心肌梗死患者40例臨床觀察[J].中醫雜志，2015，56（2）：140142.

[8]Namjoyan F，Kiashi F，Moosavi ZB，et al.Efficacy of Dragons blood cream on wound healing：A randomized，doubleblind，placebocontrolled clinical trial[J].J Tradit Complement Med，2015，6（1）：3740.

[9]Xin N，Yang FJ，Li Y，et al.Dragons blood dropping pills have protective effects on focal cerebral ischemia rats model[J].Phytomedicine，2013，21（1）：6874.

[10]林洪瑞，畢佳琦，韓福軍，等.龍血竭對大鼠皮瓣存活影響的實驗研究[J].中華手外科雜志，2016，32（3）：225227.

（收稿日期：2016-12-04修回日期：2017-02-09）

（編輯：潘明志）