星斑川鰈無水保活運輸技術研究

徐中平

摘 要：該文研究了星斑川鰈無水保活運輸技術方法及在無水?；钐幚碇械膽し磻＝Y果表明，星斑川鰈在低溫麻醉狀態下空氣暴露處理65 h存活率為100%，處理84 h存活率達90%；血清皮質醇濃度在0～35 h和48～65 h時間段分別升高2～3倍和20-24倍，顯示星斑川鰈的應激反應程度隨脅迫進程呈現為階梯狀特點；血糖濃度變化趨勢基本與血清皮質醇水平變化相對應。以上結果顯示，星斑川鰈進行無水?；钸\輸在該實驗條件下可安全跨時35 h，且有可能跨時65 h，并保持100%存活。

關鍵詞：星斑川鰈 無水?；?空氣暴露 皮質醇

中圖分類號：S917.4 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2017）02（a）-0075-02

魚類無水?；钸\輸具有顯著降低運輸成本，避免設備腐蝕，加快運輸速度，縮減運輸用時等優點，同時也是人們努力突破的運輸方式。星斑川鰈（Platichthys stellatus）屬鰈形目、鰈科、星鰈屬，為一種大型鲆鰈底棲性魚類，由于該魚營養價值高，口感獨特，在國內外市場上深受歡迎，特別是歐洲、日本、韓國，在市場上與鮭鱒魚類相媲美。自2006年實現全人工規模化育苗以來，星斑川鰈養殖規模逐步擴大，已成為替代大菱鲆、牙鲆等重要的海水魚養殖種類，并實現出口韓國和日本。

星斑川鰈的無水?；钸\輸及應激生理反應，目前未見報道。該實驗將星斑川鰈商品魚長時間無水?；钐幚?，統計了存活率，觀測了其間星斑川鰈對空氣暴露處理應激反應特點，為星斑川鰈無水?；钸\輸技術開發應用提供了數據參考。

1 材料與方法

1.1 材料

星斑川鰈（415±53）g由日照市星斑川鰈良種場提供。供試魚從養殖池撈出，放于小池（3 m×3 m）暫養，養殖用水為砂濾海水，鹽度28‰，水溫18 ℃，連續充氣增氧，停食2 d后，進行實驗處理。

皮質醇放射免疫分析藥盒購于北方生物技術研究所，其他藥品均為國產分析純。

1.2 方法

1.2.1 低溫與空氣暴露處理和回水復活實驗

逐漸向暫養池加冰降低水溫（5 ℃/h）至4 ℃，觀察魚呼吸明顯減慢、觸及反應十分微弱后撈出，平放于自制塑料盒（23 cm×35 cm×13 cm）內的懸空塑料網片上（1尾/盒），然后裝入塑料袋內（1盒/袋），再放入空氣保濕材料和CO2吸收藥包，將塑料袋內空氣趕出，沖入氧氣，扎緊后放置于4 ℃冷室，模擬無水?；钸\輸柜進行處理。處理結束后將存活魚從塑料袋中取出，轉入冷室外盛有同溫海水的水箱中（增氧），24 h后再轉入暫養池中繼續觀察至8 d，統計存活率。

1.2.2 觀察與記錄

每間隔約7 h觀察一次，確定處理魚的存活狀況，并隨機抽樣3尾采集血液制備血清。魚鰓蓋仍能均勻張合呼吸則認為存活，反之，停止張合、反復刺激無反應則視為死亡。

1.2.3 血清制備

抽樣魚迅速浸入含麻醉劑M-222（20 mg/L）的海水（4 ℃）中，使之處于深度昏迷狀態，用注射器收集其尾部動靜脈血液注入離心管內，于冰箱（4 ℃）靜置24 h后收集血清，離心（10 000 g，4 ℃）10 min，取上清液，分裝于1.5 mL離心管，-20 ℃凍存備用。

1.2.4 血清皮質醇測定

按照皮質醇放射免疫分析藥盒提供的使用操作方法，由山東大學核醫學研究所測定。

1.2.5 血糖測定

采用鄰甲苯胺法[1]進行血糖測定。

2 結果

2.1 無水?；钐幚磉^程中的魚存活情況

經加冰降溫麻醉的星斑川鰈魚入充氧袋內進行無水?；钐幚?。處理65 h內未發現有魚死亡，處理84 h發現處理魚死亡兩尾，處理實驗結束，存活率為90%。將存活魚15尾回水復活，5～17 min后回水魚呼吸頻率逐漸加快，30 min后觸動全部有反應，24 h后再轉入暫養池繼續觀察7 d，全部回水魚體色、呼吸、觸及反應和游泳姿態均未見異常，且有攝食行為，復活率為100%。

2.2 無水?；钐幚磉^程中血清皮質醇水平的變化

由圖1顯示，魚經過低溫海水麻醉后血清皮質醇濃度比未處理對照升高約0.5倍。將麻醉后的魚進行無水保活處理，在0～65 h的處理時期內，魚血清皮質醇濃度繼續升高，呈階梯狀特點。在0～35 h階段，血清皮質醇測定值比未處理對照魚升高2～3倍，在48～65 h期間，處理魚血清皮質醇水平上升比未處理對照魚升高20～24倍。這些數據表明，處理前35h，應激反應相對平緩，處理48 h后，應激反應則明顯加劇。將處理84 h的存活魚放回海水中進行復活，3 d后測定的血清皮質醇水平與未處理對照測定值相當，從血清皮質醇水平上看，長時無水保活處理的星斑川鰈回水后能夠恢復到正常靜息狀態。

2.3 低溫與無水?；钐幚磉^程中血糖濃度的變化

如圖2所示，低溫處理使星斑川鰈血糖濃度顯著升高約1倍，進一步的空氣暴露處理使星斑川鰈血糖水平繼續升高，并隨處理時間的延長而逐漸增大升高的幅度，在48 h觀測點達到峰值，在處理48～65 h期間血糖濃度維持高位水平。糖濃度的變化態勢基本與血清皮質醇濃度變化相對應?？諝獗┞短幚?4 h實驗魚回水復活處理72 h后，血糖濃度基本恢復到未處理對照水平。以上結果進一步佐證了2.2部分血清皮質醇觀測結果所得出的結論。

3 討論

該研究將經低溫麻醉星斑川鰈商品魚入充氧袋內進行空氣暴露處理，來模擬無水?；钸\輸，并觀測處理魚應激生理反應。血液皮質醇水平的升高常被看作是魚類應激的靈敏信號[2]。在脅迫條件下，魚類腎上腺皮質系統活動加強，皮質醇分泌量大大增加，引發一系列的應激生理反應，如加速糖異生，抑制外周組織葡萄糖利用，血糖升高等，血糖升高亦常被作為可靠的生理應激指標之一[3]。因此，測定無水?；钐幚磉^程中的血清皮質醇和血糖水平變化，對于了解星斑川鰈無水?；钸\輸過程中的生理變化具有重要意義。

星斑川鰈經低溫麻醉和無水保活處理，處理65 h存活率為100%，處理84 h存活率為90%。在0～35 h和48～65 h在階段血清皮質醇和血糖水平呈現出階梯狀升高特點（如圖1，圖2）。基于這些觀察結果，本研究推測，在0～35 h階梯期，星斑川鰈應處于應激反應的警告期和抵抗期，而在48～65 h階梯期則處于應激反應的疲憊期。這一推斷結合存活率的觀測提示，星斑川鰈無水?；钸\輸在35 h以內對于存活是相對安全平穩的，在48～65 h處理時長內處理魚雖處于應激反應的疲憊期，但?；钸\輸是有可能實現的，而超過65 h，星斑川鰈可能因過度應激反應造成不可逆轉傷害而死亡。

參考文獻

[1] 洪磊，張秀梅.環境脅迫對許氏平鮋和花鱸血糖、血沉降的影響[J].中國水產科學，2005，12（4）：414-418.

[2] Wendelaar B S E.The stress response in fish[J].Physiological Reviews，1997，77（3）：59l-625.

[3] 盧玉標，游翠紅，王樹啟，等.淺水應激后黃斑藍子魚生理指標變化及?；撬岬目箲ぷ饔肹J].水生生物學報，2014，38（1）：68-73.