整合素αvβ3在食管腫瘤中的表達及意義

李丹丹,張 斌,張赫恂，李長鋒,王學菊,韓志峰

(1.吉林大學中日聯誼醫院 a.內鏡中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 長春130033;2.延邊大學醫學院)

整合素αvβ3在食管腫瘤中的表達及意義

李丹丹1a,張 斌1a,張赫恂2，李長鋒1a,王學菊1b,韓志峰1c*

(1.吉林大學中日聯誼醫院 a.內鏡中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 長春130033;2.延邊大學醫學院)

目的 探討整合素αvβ3在不同食管腫瘤中的表達及其意義。方法 分別收集10例正常食管組織標本、10例食管平滑肌瘤標本及30例食管癌標本，分為3組，應用免疫組織化學方法對標本中整合素αvβ3的表達進行分析。結果 食管癌組織中可見整合素αvβ3呈明顯陽性表達；正常食管組織及食管平滑肌瘤組織則不表達或弱表達。食管癌組整合素αvβ3的表達與正常食管組和食管平滑肌瘤組差異具有統計學意義(P<0.05)，而正常食管組與平滑肌瘤組之間則無明顯差異(P>0.05)。食管癌組整合素αvβ3的表達與腫瘤的浸潤深度無關(P>0.05)，而與腫瘤分化程度及淋巴結轉移相關(P<0.05)。結論 整合素αvβ3的表達可作為判斷食管癌惡性程度及預后的重要生物學指標。

整合素αvβ3；食管癌；預后

(ChinJLabDiagn,2017,21:0571)

惡性腫瘤的生長、侵襲、轉移受多種因素的影響，其中整合素作為細胞粘附分子在其中起著重要的調節作用，它參與細胞-細胞之間、細胞-細胞外基質的相互作用[1]。多項研究證實整合素αvβ3在多種惡性腫瘤中高表達，且與其惡性行為密切相關。為進一步研究整合素αvβ3與食管癌生物學行為的關系，我們采用免疫組化方法對食管良性及惡性腫瘤組織標本進行檢測，探討整合素αvβ3與食管癌的侵襲、轉移及其對預后評價的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集我院外科食管癌手術標本共30例，其中男23例，女7例，年齡范圍40-79歲，平均年齡60.6歲，體重45-73 kg，平均體重65 kg。并于距腫物大于5.0 cm的陰性切緣部位取材食管正常組織10例，外科及內鏡食管平滑肌瘤手術標本10例作為對照組。

1.2 試劑與方法

50例標本均經4%甲醛固定、石蠟包埋、4 μm連續切片，行常規HE染色確定取材的食管組織性質。采用免疫組化SP法，一抗選用抗整合素αvβ3多克隆抗體(美國Abbiotec公司)，具體操作按說明書步驟進行。根據免疫組化染色結果判定整合素αvβ3在食管正常組織和腫瘤組織中的表達。

1.3 結果判定

整合素αvβ3表達陽性時，鏡下可見細胞膜和細胞漿內黃色顆粒，且染色強度高于背景。其陽性結果的判定需將染色強度及陽性細胞占腫瘤細胞總數的百分比綜合計分。染色強度的評分：無色(-)為0分，淡黃色(+)為1分，棕黃色(++)為2分，深棕色(+++)為3分。陽性細胞的百分數評分：在高倍鏡(400倍)下對每張切片隨機選取5個視野，每個視野計數200個細胞，共記錄每1000個細胞中所含的陽性細胞數，然后計算百分比。0為0分，≤25%為1分，26%-50%為2分，51%-75%為3分，76%-100%為4分。當染色強度的評分與陽性細胞百分數評分之和≥3，即為免疫組化陽性。

1.4 統計學分析

2 結果

經HE染色病理組織學檢查確定30例食管癌標本均為食管鱗癌。于腫瘤陰性切緣留取的10例正常食管組織HE染色未見異型腫瘤細胞，且整合素αvβ3免疫組化染色結果顯示無色或淡黃色。食管平滑肌瘤染色呈淡黃色。食管癌組織中可見腫瘤細胞及血管內皮細胞的細胞膜和細胞漿內著色程度不一的黃色、棕黃色或棕褐色顆粒，細胞核不著色，間質淡染(見圖1，2)。經兩兩比較發現，食管癌組織中的整合素αvβ3陽性表達率顯著高于正常食管組織和食管平滑肌瘤(P<0.001)，見表1。

a：正常食管；b：食管平滑肌瘤；c：食管癌

圖1 不同食管組織整合素αvβ3免疫組化染色結果

a：HE染色圖片(×400)示食管中分化鱗癌；b：免疫組化染色示腫瘤細胞及新生血管內皮細胞膜和細胞漿內見整合素αvβ3表達(×400)。

圖2 食管癌組織HE染色及整合素αvβ3免疫組化染色

表1 整合素αvβ3在食管組織中的表達及相關性

注釋：* FISHER精確概率法；a：與正常食管組織相比，P<0.05；b：與食管平滑肌瘤相比，P<0.05。

對30例食管癌標本整合素αvβ3表達與臨床病理分期的關系進行研究，發現整合素αvβ3的表達與腫瘤組織的浸潤程度無關，而與其分化程度相關(P<0.05)。在有或者無淋巴結轉移者中整合素αvβ3的表達差異顯著(P<0.05)，見表2。

3 討論

多項研究證實，不同組織來源的惡性腫瘤細胞和血管內皮細胞的表面都存在整合素αvβ3的高表達[2-8]，這與多種腫瘤的不良預后以及早期轉移密切相關。除此之外，多種基于上述結論的惡性腫瘤整合素αvβ3受體顯像特異性靶向示蹤劑的研究也如火如荼的開展起來[9-12]，從而進一步證實了整合素αvβ3在腫瘤新生血管形成及侵襲轉移中的作用。

在本研究中，食管癌組織中整合素αvβ3在癌細胞和血管內皮細胞呈現過量表達，而在正常食管組織和平滑肌瘤中幾乎不表達或微量表達，有統計學差異(P<0.05)。有研究報道整合素αvβ3的表達在惡性程度不同的同一種腫瘤細胞中也不一致，隨著癌組織分化程度的降低，整合素αvβ3的表達率呈現上升趨勢[8,13-15]。在本研究中同樣發現食管癌組織分化越差整合素αvβ3的表達越高，而分化程度越高，表達則越低，且差異有統計學意義(P<0.05)，提示癌細胞分化程度越差，對血液供應的要求越高，其浸潤程度可能越明顯，預后可能就越差。

表2 整合素αvβ3表達與食管癌患者病理參數的比較

*陽性細胞百分率

有研究證實肺癌腦轉移和骨轉移組織中整合素αvβ3的陽性表達強度均高于原發肺癌組織[8,16]，均提示整合素αvβ3參與腫瘤的侵襲轉移。本研究發現發生淋巴結轉移的食管癌組織中整合素αvβ3的表達明顯高于無淋巴結轉移者，與上述研究結果相符，對于腫瘤的預后評估有一定的指導意義。

綜上所述，整合素αvβ3的表達與食管癌的惡性程度及淋巴結轉移密切相關，可作為臨床上判斷預后的一項重要生物學指標。另外，食管癌組織中整合素αvβ3的高表達可為臨床上食管癌的治療提供新的思路。

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Expression and significant of integrin αvβ3 in esophageal tumor

LIDan-dan,ZHANGBin,ZHANGHe-xun,etal.

(EndoscopyCenter,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To investigate the expression and significant of integrin αvβ3 in different esophageal tumors.Methods 10 normal esophageal tissues,10 leimyoma tissues and 30 esophageal carcinoma tissues were collected.Pathological and immunohistochemical methods were used to study the expression of integrin αvβ3.Results The immunohistochemical staining results showed that integrin αvβ3 expressed in the tissues of esophageal carcinoma.None or only faint yellow grain could be seen in the normal esophageal tissues and leimyoma esophageal tissues,with statistical significance to carcinomas (P<0.05).The expression of integrin αvβ3 had relevance to the differentiated degree and lymphatic metastasis of the tumor (P<0.05),but no relevance to the invasive depth(P>0.05).Conclusion Integrin αvβ3 can be used as an important biological indicator to estimate the severity and prognosis of the esophageal carcinomas.

integrin αvβ3；esophageal carcinoma；prognosis

吉林省科技發展計劃項目(白求恩專項20160101064JC);吉林大學第三臨床醫學院優青培養計劃支持經費(419080500365)

1007-4287(2017)04-0571-03

R735.1

A

2016-07-18)

*通訊作者