補骨脂抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀

張郴++張小東++趙佳

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.07.193

[摘要] 補骨脂為豆科補骨脂屬植物，具有多種藥理活性，其在抗腫瘤作用方面逐漸被人們關(guān)注。該文從細胞增殖、細胞周期、細胞凋亡、細胞遷移和侵襲、逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性等方面揭示補骨脂的抗腫瘤作用，為進一步開發(fā)補骨脂作為抗腫瘤藥物提供依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 補骨脂；腫瘤；天然植物

[中圖分類號] R282 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）03（a）-0193-03

Research Status of Semen Psoraleae Anti-tumor Effect

ZHANG Chen， ZHANG Xiao-dong， ZHAO Jia

Honghe Health Vocational College， Mengzi， Yunnan Province， 661100 China

[Abstract] Semen psoraleae， as the plant in the leguminosae， has many pharmacological activities， gradually concerned by people， and the paper reveals the anti-tumor effect of semen psoraleae from the aspects of cell proliferation， cell cycle， apoptosis， cell migration and invasion and tolerance of reversed tumors thus providing basis for the further development of semen psoraleae as the anti-tumor drugs.

[Key words] Semen psoraleae； Tumor； Natural plant

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將腫瘤分為良性和惡性腫瘤，惡性腫瘤常稱為癌癥，是嚴重威脅人類健康的常見多發(fā)慢性病。目前對于惡性腫瘤的三大主要治療方法分別是藥物治療、放射治療和外科手術(shù)治療[1]，雖然抗腫瘤藥或抗癌藥在腫瘤的綜合治療中占有非常重要的地位，但存在兩大主要障礙：毒性反應(yīng)和產(chǎn)生耐藥性[2-3]。其中毒性反應(yīng)是由于抗腫瘤藥對腫瘤細胞缺乏足夠的選擇性，在殺滅腫瘤細胞的同時，對正常組織的細胞也產(chǎn)生不同程度的損傷，因此毒性反應(yīng)成為化療藥物用量受限的主要因素[4-5]；此外，化學(xué)治療過程當(dāng)中腫瘤細胞對藥物產(chǎn)生了耐藥性是化療失敗的重要原因，因此是目前臨床上腫瘤化療急需解決的難題[6-8]。

近些年來天然藥用植物以其毒性低、安全范圍廣、資源豐富等優(yōu)點越來越受到人們的關(guān)注[9-10]，從天然藥用植物中尋找高效低毒的活性成分已成為抗腫瘤藥物研發(fā)的熱點之一[11-12]。其中補骨脂在抗腫瘤方面因其潛在的抗腫瘤活性而被進一步研究，該文著重介紹補骨脂在腫瘤治療方面的研究進展及其可能的機制，為其進一步的研究提供線索和科學(xué)依據(jù)。

1 抑制腫瘤細胞的增殖

腫瘤作為機體細胞異常增殖而形成的新生物，最常見的表現(xiàn)是機體局部的異常腫塊；而細胞的異常增殖是腫瘤的重要特征之一，從而導(dǎo)致機體的不協(xié)調(diào)，損害機體的各大系統(tǒng)。郭江寧等[13]對補骨脂通過前期處理并用不同比例石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫后，分離得到補骨脂素和異補骨脂素，然后通過MTT法測定它們對人胃癌細胞BGG-823的毒性作用，發(fā)現(xiàn)補骨脂素和異補骨脂素可抑制BGG-823的增殖，且抑制作用和藥物濃度呈正相關(guān)。補骨脂酚（bakuchiol）作為補骨脂的單萜類成分，近年來在抗腫瘤作用方面?zhèn)涫荜P(guān)注，周昆等[14]將不同濃度的補骨脂酚作用于肝癌細胞HepG2，實驗結(jié)果表明，當(dāng)藥物的作用時間為2 h時，對細胞增殖的影響并不顯著；但隨著作用時間的延長，補骨脂酚呈現(xiàn)明顯的增殖抑制作用，且在62.5-187.5 μmol/L的藥物濃度范圍內(nèi)呈一定的量效關(guān)系。同樣是從補骨脂中分離的化合物補骨脂乙素（isobavachalcone， IBC）也具有較好的抗腫瘤活性，有研究報道，隨著IBC濃度的遞增和給藥時間的延長，其對舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞的增殖抑制作用逐漸加強，增殖抑制率逐漸增加，呈時間-濃度依賴性[15]。

2 干擾腫瘤細胞的周期

腫瘤細胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束的過程稱為細胞周期，此間經(jīng)歷G1期 （DNA合成前期）、S期 （DNA合成期）、G2期 （DNA合成后期）和M期 （有絲分裂期）4個時相，抗腫瘤藥物通過影響或調(diào)控細胞周期而使腫瘤細胞產(chǎn)生細胞毒作用從而延緩細胞周期的時相過渡。補骨脂可作用于腫瘤的細胞周期從而抑制或延緩腫瘤細胞的增殖。譚敏等[16-17]運用流式細胞術(shù)檢測補骨脂素對乳腺癌MCF-7細胞的周期變化，實驗結(jié)果顯示，與對照組相比，不同濃度的補骨脂素作用24 h后，S期細胞的比例均減少，G1期和G2期細胞的比例增加。同樣是補骨脂素作用于乳腺癌MCF-7細胞，沈麗霞等[18]的實驗結(jié)果顯示，10 μmol/L和30 μmol/L的補骨脂素可顯著增加S期細胞的比例（P<0.05），表明補骨脂素將MCF-7細胞周期由G1期向S期推進。補骨脂素和異補骨脂素是一對同分異構(gòu)體，通過流式細胞術(shù)檢測二者對肝癌細胞HepG2周期的影響，觀察給藥組和對照組各時期的細胞數(shù)占細胞總數(shù)的百分比，發(fā)現(xiàn)濃度為50 μg/mL的補骨脂素和異補骨脂素對HepG2細胞的G2期―M期有明顯的阻滯作用[19]。

3 誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡

實體腫瘤的細胞主要有壞死和凋亡兩種死亡形式，從細胞生物學(xué)的角度講，藥物誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡可發(fā)揮抗腫瘤作用。目前認為，抑制細胞凋亡比抑制細胞過度增殖在惡性腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用更為重要。閆偉偉等[20]用不同濃度（50、30、25、20 μg/mL）的補骨脂素作用于人胃癌BGC-803細胞48 h后，通過流式細胞術(shù)測定細胞凋亡的情況，隨著藥物濃度的增加，細胞早期凋亡率分別是8.34%、9.47%、28.13%、60.16%，且與空白對照組的3.11%相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），究其作用機制可能是引起了BGC-803細胞骨架蛋白F-actin的解聚。袁小芬等[21]在異補骨脂素對人急性早幼粒細胞HL-60周期的影響實驗當(dāng)中，發(fā)現(xiàn)異補骨脂素并不會引起細胞周期的阻滯，而是誘導(dǎo)HL-60細胞的早期凋亡，通過RT-PCR和蛋白印跡法的檢測結(jié)果表明，異補骨脂素可以導(dǎo)致促凋亡蛋白Bax上調(diào)和抗凋亡蛋白Bcl-2下調(diào)，從而影響mRNA和蛋白水平的表達。此外，補骨脂乙素可誘導(dǎo)人肝癌HepG2細胞的凋亡[22-23]，且藥物濃度和凋亡率呈一定的量效關(guān)系，當(dāng)濃度為7 mg/mL時凋亡率達到了94.57%，最后通過Western印跡法檢測促凋亡蛋白Bax和Bid、抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表達，實驗結(jié)果顯示，隨著給藥濃度的遞增Bax和Bid的表達明顯增加，Bcl-2的表達減少，而Bcl-xl無顯著差異。

4 抑制腫瘤細胞的遷移和侵襲

侵襲與轉(zhuǎn)移是腫瘤最致命的特征，占到了腫瘤相關(guān)死亡率的90 %以上，而遷移又是腫瘤細胞轉(zhuǎn)移過程中的重要一環(huán)[24]。據(jù)報道，胞質(zhì)蛋白（如MMP-2、MMP-9）可被異常活化的Akt信號通路激活，從而促進腫瘤細胞的遷移和侵襲[25]。史毅等[26]研究發(fā)現(xiàn)，補骨脂乙素能以濃度相關(guān)性下調(diào)MMP-2、MMP-9蛋白及其上游磷酸化Akt的蛋白表達從而抑制了舌癌細胞Tca8113的遷移和侵襲能力，為進一步的藥物研發(fā)和臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。此外，高、中、低劑量（0.75、0.5、0.25 mg/mL）的補骨脂和蔻仁組成的復(fù)方作用于胃癌SGC7901細胞24 h后，其侵襲抑制率分別為60.79%、38.81%、8.7%；其中高、中濃度的侵襲細胞數(shù)都低于對照組（P<0.01）[27]。

5 降低腫瘤細胞的粘附能力

腫瘤細胞的粘附特性在維持細胞的外形、調(diào)節(jié)細胞的分裂等功能中起著非常重要的作用，而粘附又是腫瘤細胞侵襲的開始步驟[28]。吳堅等[29]將補骨脂復(fù)方設(shè)成高（0.75 mg/mL）、中（0.5 mg/mL）、低（0.25 mg/mL）三個劑量組，作用于胃癌SGC7901細胞30、60、90、120 min后，用MTT法檢測其對腫瘤細胞的粘附能力的影響，實驗結(jié)果顯示，高濃度的補骨脂復(fù)方在每個時段均有明顯的腫瘤粘附抑制作用（P<0.05），中濃度的補骨脂復(fù)方在90 min后有抑制腫瘤細胞粘附的作用（P<0.05），而低濃度的抑制作用出現(xiàn)在120 min的給藥時間（P<0.05），實驗結(jié)果表明補骨脂復(fù)方可明顯降低胃癌細胞SGC7901的粘附能力。

目前一系列的研究結(jié)果證實，補骨脂在抗腫瘤方面具有良好的功效。其抗腫瘤的作用廣泛且具有多靶點的特點，涉及到腫瘤生長繁殖的多個過程，無論是單獨使用還是聯(lián)合用藥，都表現(xiàn)出很好的抗腫瘤活性。但是，其明確的作用機制和作用靶點仍未完全闡明，目前的研究報道多局限于體外的腫瘤細胞，缺乏大量的臨床實際研究。因此，有必要對其確切的作用機制、作用靶點及臨床應(yīng)用做進一步研究。此外，除了補骨脂最常見的抗腫瘤活性成分補骨脂素、補骨脂乙素、異補骨脂素外，其他化學(xué)成分的抗腫瘤作用的研究甚少，研究者可以對補骨脂素、補骨脂乙素、異補骨脂素進行衍生物的合成和抗腫瘤活性的研究，以期發(fā)現(xiàn)活性更好、專一性更強、毒副作用和耐藥性更小的化合物，為補骨脂在抗腫瘤作用方面提供更多更有說服力的研究。

[參考文獻]

[1] 顧明，楊華，傅榮.影響抗腫瘤藥物合理選用的因素[J].臨床合理用藥雜志，2015，8（10）：120-122.

[2] 祝天慧，李裕鑫，游松.鉑類抗腫瘤藥物的研究進展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2016，33（6）：512-518.

[3] 孫陽，周錢梅，蘇式兵.中藥配伍對癌癥治療的研究進展[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，10（10）：1476-1480.

[4] 狄文.化療對年輕惡性腫瘤患者卵巢功能的影響[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2016，32（9）：908-910.

[5] 張華.我國研發(fā)出腫瘤可視化靶向治療新技術(shù)[J].首都食品與醫(yī)藥，2016（9）：49.

[6] 劉敏.順鉑聯(lián)合電離輻射在肺癌細胞殺傷作用機制的研究[D].長春：吉林大學(xué)，2014.

[7] 趙楠.鴉膽子油乳及其聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細胞體內(nèi)外生長抑制作用的研究[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2015.

[8] 孔易，胡占鋒，胡瑞云，等.多種耐藥蛋白的表達與大腸癌多藥耐藥的相關(guān)性研究進展[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014，31（3）：243-245.

[9] 呂夢.葛根素藥理學(xué)活性及分離純化的研究進展[J].廣東化工，2016，43（12）：108-109.

[10] 方春生，楊燕軍.酸漿苦素B的體外抗腫瘤活性研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2015，32（4）：652-655.

[11] 張晶，李曉芳，劉昱，等.腫瘤流行病學(xué)現(xiàn)狀及抗腫瘤中藥的研究進展[J].山東化工，2015，44（12）：42-44.

[12] 趙楠.鴉膽子油乳及其聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細胞體內(nèi)外生長抑制作用的研究[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2015.

[13] 郭江寧，吳侯，翁新楚，等.補骨脂中活性成分的提取分離與抗癌實驗研究[J].中藥材，2003，26（3）：185-187.

[14] 周昆，王安紅，柴麗娟，等.補骨脂酚對HepG2的細胞毒性及BSEP、NTCP、FXR、CYP7A1的影響[J].毒理學(xué)雜志，2015， 29（3）：193-196.

[15] 史毅，金曉紅，吳偉忠，等.補骨脂乙素對舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞增殖的抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用及其機制[J].吉林大學(xué)學(xué)報，2016，（4）：725-730.

[16] 譚敏，孫靜，賓曉農(nóng)，等.補骨脂素對乳腺癌MCF-7細胞的體外抗腫瘤作用[J].廣東醫(yī)學(xué)，2008，29（11）：1817-1819.

[17] 譚敏，孫靜，趙虹，等.補骨脂素對乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細胞體外作用的比較研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2009，26（4）：359-362，427.

[18] 沈麗霞，趙丕文，牛建昭，等.補骨脂素對人類乳腺癌細胞增殖作用的影響[J].中國藥理學(xué)通報，2007，23（11）：1448-1451.

[19] 劉繼新，高慶劍，陸鋮，等.同分異構(gòu)體補骨脂素和異補骨脂素對HepG2細胞及細胞色素P450酶的影響[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2014，30（5）：438-441.

[20] 閆偉偉，章永紅，劉軍樓，等.補骨脂素對胃癌細胞株BGC-803增殖和凋亡的影響及其機制[J].吉林中醫(yī)藥，2015，35（10）：1064-1067.

[21] 袁小芬，孫亞梅，張之勇，等.異補骨脂素對HL-60細胞增殖和凋亡影響及其機制探討[J].中華腫瘤防治雜志，2015， 22（21）：1675-1679，1687.

[22] 王安紅，盧國彥，周昆，等.補骨脂乙素誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡及對Bcl-2家族表達的影響[J]. 中藥藥理與臨床，2012，28（5）：23-25.

[23] 張羽，孟憲生.補骨脂藥材的HPLC指紋圖譜研究[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)， 2011，8（2Z）：14.

[24] Jin X， Zhu Z， Shi. Metastasis mechanism and gene/protein expression in gastric cancer with distant organs metastasis[J]. Bull Cancer， 2014， 101（1）： 1-12.

[25] Cheng CY， Heieh HL， Hsiao LD， et al. PI3-K/Akt/JNK/NF-kappaB is essential for MMP-9 expression and outgrowth in human limbal epithelial cells on intact amniotic membrane[J]. Stem Cell Res， 2012， 9（1）： 9-23.

[26] 史毅，吳偉忠，霍安，等.補骨脂乙素對Tca8113細胞遷移及侵襲的抑制作用及其機制[J].中國藥理學(xué)通報，2015，31（12）：1741-1745.

[27] 張冠軍，王春寶，梁華，等.腎細胞癌NDRG-1和E-cadherin表達及其與臨床病理因素、MVD及預(yù)后的關(guān)系[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，19（9）：1697-1701.

[28] 趙萬忠，程凱，王曉紅，等.補骨脂素逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞多藥耐藥的進展[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志，2016， 10（7）：1012-1015.

[29] 吳堅，劉沈林，鄒璽，等.補骨脂復(fù)方對胃癌細胞SGC7901生物行為學(xué)的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志，2012，39（4）： 609-612.

（收稿日期：2016-12-09）