茶多酚對抗精神病藥物奧氮平誘致肥胖大鼠作用與機制研究

鐘滿群　呂俊華

[摘要]目的探討茶多酚對抗神經病藥物奧氮平誘致肥胖大鼠的作用以及機制。方法本次研究選取64只健康的雌性大鼠作為研究對象，對其進行茶多酚對抗神經病藥物奧氮平治療，觀察其對大鼠肥胖的作用以及機制。結果模型對照組和正常組進行比較，發現大鼠在體重、食物的攝取量、Lees指數、脂肪系數、脂肪濕重、5-HT、DA、DOPAC含量、血清瘦素含量、FFA含量方面均有所增加，夜晚距離和平均速度、脂聯素含量明顯降低，相比差異具有統計學意義（P<0.05）；飲水量、白天自主行為、夜晚慢速運動時間和快速運動時間及休息時間、Tc、TG、LDL-C、HDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、SOD活性、MDA含量無明顯變化，相比差異均無統計學意義（P>0.05）；高劑量和低劑量組與模型對照組相比，在體重、飲食量、飲水量、白天休息時間、Lees指數、脂肪系數、脂肪濕重、DA、DOPAC含量、FFA含量、LDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、MDA含量方面均有所減少，相比差異具有統計學意義（P<0.05）；5-HT含量、血清瘦素含量無明顯變化，相比差異均無統計學意義（P>0.05）；白天時距離和快速運動時間及平均速度、夜晚距離和平均速度、5-HIAA、NA含量、脂聯素含量、SOD活性明顯增加，相比差異具有統計學意義（P<0.05）；其中低劑量組夜晚快速運動的時間顯著增加，并且休息的時間相對減少，體內TC含量降低，相比差異具有統計學意義（P<0.05）。結論茶多酚能夠有效的抑制肥胖大叔的食物攝取量，減少了它的飲水和進食量，引導肥胖大鼠多進行自主活動，縮短了其休息時長，增加在黑暗時的運動量以及運動速度，促進下丘腦遞質對5-HT的誘導分泌，拉升5-HIAA和NA水平，降低DA的水平，抑制食欲提高了運動量，通過脂肪細胞因子的調節，體內血清脂聯素的含量增加，并且體美高脂肪酸的氧化程度和能量消耗更多，脂代謝速度加快，體內FFA、LDL-C和TC的含量明顯降低，在提升SOD活性的同時，降低MDA的含量，達到提升機體抗氧化能力的效果。

[關鍵詞]茶多酚；神經病藥物；奧氮平；肥胖大鼠

[中圖分類號]R977.9

[文獻標識碼]A

[文章編號]2095-0616（2017）03-34-04

肥胖癥與體內脂肪不正常和堆積過多有著直接的關系，受內分泌疾病、遺傳、運動和飲食的直接影響。肥胖癥的顯著特點為體重過重，并與高脂血癥、高血壓、腦血管疾病、冠心病和糖尿病等發生過程相互影響。大量的臨床試驗證明，長時間服用抗精神病藥物會導致肥胖和體重增加，給患者治療的依從性造成一定的影響。國外學者系統的研究了抗精神病藥誘發的肥胖問題，并使用奧氮平等藥物創建了大鼠肥胖模型。綠茶的主要活性成分就是茶多酚（TP），茶多酚（TP）的主要作用為抗衰老、預防癌癥、預防心腦血管疾病和抗氧化性，能夠調節食物攝入和脂肪代謝，從而使肥胖逆轉和體重減輕。因此，本次研究選取64只健康的雌性大鼠作為研究對象，對其進行茶多酚對抗神經病藥物奧氮平治療，觀察其對大鼠肥胖的作用以及機制，現報道如下。

1材料與方法

1.1材料

本組資料共計64只，均為本次研究隨機選取健康的雌性大鼠，由廣州市某實驗室所提供，體重160～280g，平均（205±15）g。

1.2模型建立及分組

大鼠在晝夜規律的模擬環境中生活1d，依據體重將其劃分成兩組，造模組為57只，正常對照組為7只。在造模的時間里，大鼠自由攝取水分和普通飼料，造模組在天黑前進行奧氮平（1.2mg/kg）灌胃。2d稱重一次，連續喂養2周以后將體重增長不合格和死亡的大鼠剔除。最后，造模組中的模型共有37只，其中，模型對照組11只，高劑量組9只，低劑量組8只，陽性藥物組9只，所有大鼠均無死亡情況。

1.3給藥

天黑之前對高劑量組、茶多酚低組、鹽酸西布曲明組和模型對照組進行奧氮平（1.2mg/kg）灌胃，將等容量的蒸餾水給予正常對照組；第2天上午，茶多酚低組灌胃150mg/kg、高劑量組灌胃300mg/kg、鹽酸西布曲明灌胃2.5mg/kg，將等容量的蒸餾水給予模型對照組和正常對照組，按照此計量連續喂養5周進行宰殺，宰殺前12h內禁食禁水。

1.4檢測方法

（1）在藥物干預治療以前，對大鼠的體重每周監測2次，連續監測2周左右；藥物干預治療以后，對大鼠的體重每周監測1次，連續監測5周左右。（2）對大鼠白天和黑夜的自主活動情況進行測定時，使用SMART video-tracking system進行監測。實驗裝置使用的是有底正方形鐵箱，底面各邊的長度為1米，高度為半米。大鼠每隔45min給藥一次，連續給藥3d，將大鼠放在實驗裝置的中心位置，適應時間為系統默認的時間，大鼠自主活動的客觀靈敏指標包括快運動時間、慢運動時間、休息時間、路程和平均速度。（3）對大鼠下丘腦中的5-HIAA（5-羥吲哚乙酸）、DOPAC（3，4-二羥基苯乙酸）、5-HT（5-羥色胺）、DA（多巴胺）和NE（去甲腎上腺素）的含量情況使用HPLC-ECD（高效液相色譜一電化學檢測）進行測定。大鼠麻醉時采取腹腔注射的方法，使用的藥物為3%戊巴比妥鈉（40mg/kg），麻醉后立即斷頭并迅速將全腦取出，將下丘腦分離后，使用冷卻的生理鹽水進行漂洗，將水分瀝干以后進行稱重，將其放入到圓形的離心管中，加入300mL的生理鹽水之后進行攪拌再借助勻漿機進行研磨，設置2000r/min的速度進行15min離心處理，將上清液取出后將高氯酸去蛋白液（300mL）注入其中。流速為0.7mL/min，柱溫控制在37°C。

1.5統計學處理

選擇SPSS20.0進行數據統計，計量數據采用（x±s）的形式表示，進行t檢驗，P<0.05表示差異具有統計學意義。

2.結果

2.1大鼠體重、飲食量、飲水量的變化

模型組和正常對照組的大鼠在體重方面均有所增加，但是模型組的大鼠體重增長更明顯，飲食量增加顯著，飲水量無顯著變化（P>0.05），模型對照組大鼠在體重方面增加明顯，而高劑量組和低劑量組大鼠在體重、飲食量、飲水量均出現明顯降低情況，相比差異有統計學意義（P<0.05），見表1～2。

2.2大鼠白天和夜晚自主行為的變化

白天，模型對照組中大鼠的自主行為方面無顯著變化（P>0.05），相比較而言，高劑量組、低劑量組大鼠在距離、快速運動時間、平均速度方面明顯增加，但其休息時間相對減少，相比差異有統計學意義（P<0.05）。夜晚時，模型對照組大鼠在距離和平均速度方面均有減少的趨勢，但是大鼠在慢速運動時間、快速運動時間、休息時間方面無顯著變化（P>0.05），相比較而言，高劑量組、低劑量組大鼠在距離和平均速度方面顯著增加，其中低劑量組的快速運動時間增加，休息時間減少，相比差異有統計學意義（P<0.05）。

2.3奧氮平誘致大鼠肥胖的各項指標比較

模型對照組與正常對照組相比，大鼠體內的Lees指數、脂肪系數、脂肪濕重、5-HT、DA、DOPAC含量、血清瘦素含量、FFA含量方面都有顯明的增加趨勢，但是體內的脂聯素含量呈下降趨勢，相比差異有統計學意義（P<0.05），TC、TG、LDL-C、HDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、SOD活性、MDA含量無明顯變化（P>0.05），高劑量和低劑量組與模型對照組相比，在Lees指數、脂肪系數、脂肪濕重、DA、DOPAC含量、FFA含量、LDL-C含量、血糖、胰島素含量、ALT、AST、MDA含量方面均有所減少，相比差異有統計學意義（P<0.05），5-HT含量、血清瘦素含量無明顯變化，5-HIAA、NA含量、脂聯素含量、SOD活性明顯增加，其中低劑量組TC含量明顯減少，相比差異有統計學意義（P<0.05）。

3.討論

活動量太少或者飲食過多均會導致肥胖，主要是下丘腦來對其進行控制和調節。下丘腦在對飲食量進行操控時，主要起調節作用的物質是細胞所分泌的5-HT和DA等神經遞質。奧氮平是一種非典型性抵抗神經性疾病的藥物，能夠有效的阻斷5-HT和DA等神經遞質的分泌，從而大大降低神經遞質5-HT和DA對動物系統功能的影響，但是，患者在長期服用此類藥物的過程中，會出現鮮明的體重增加或者肥胖的現象。

通過實驗可以看出，奧氮平能夠明顯的增大鼠的食欲，使得大鼠的自主活動減少，并且提高飼料的轉化率，導致大鼠出現肥胖癥狀。在黑暗條件在進行飼養，發現大鼠的平均速度、路程明顯減少，并且大鼠身體上脂肪的重量和脂肪系數顯著增加。由此可以看出，奧氮平是通過增加大鼠食物的攝取量，減少大鼠的自主活動來引發大鼠肥胖的。與此同時，通過實驗可以發現，肥胖大鼠下丘腦組織中，5-HT、DA、DOPAC含量顯著增加，由此可見，奧氮平能夠有效的阻斷5-HT、DA受體的產生，從而減弱5-HT、DA對系統功能的影響，增強大鼠的食物攝取量，從而出現肥胖癥狀。大鼠細胞內血清瘦素的含量也在不斷的增加，但是細胞內脂聯素的含量卻在下降。由此可以看出，肥胖的大鼠可以分泌出抵抗血清瘦素的物質，降低瘦素信號傳導的功能，引起大鼠肥胖。

本次試驗，以鹽酸西布曲明為陽性藥物來進行實驗。鹽酸西布曲明是一種能夠降低動物食欲的藥物，其中，抑制藥物是5-HT和NA，這兩種藥物能夠有效的降低動物對食物的攝取量，減輕自身的體重。奧利司是國家認可的可以用來治療肥胖癥的藥物，但是對藥物的價格和使用量進行考慮之后，決定采用鹽酸西布曲明來作為陽性藥物進行動物實驗。實驗結果顯示，鹽酸西布曲明能夠有效的降低大鼠的飲水量、食物的攝取量、體重、脂肪系數等，加大大鼠的活動量，由此可以看出，鹽酸西布曲明能夠起到減肥的功效。

5-HT能夠有效的調節動物對食物的攝取量，作用在不同的受體上，所產生的作用不完全相同。但是，從總體來言，5-HT能夠有效的抑制動物對食物的攝取量。奧氮平是5-HT受體的拮抗劑，通過實驗可以觀察發現，奧氮平減弱了受體5-HT的作用，使得動物對食物的攝取量增加，從而引發肥胖。

成熟脂肪細胞可以自身進行瘦素激素蛋白的分泌，一旦體內的營養物質聚集，體內就會自動分泌出瘦素來進行抵抗，從而出現人體肥胖的現象。瘦素抵抗是引入動物或者人體肥胖癥的關鍵，在實驗中，模型對照組的大鼠采用奧氮平進行灌胃處理之后，發現大鼠對食物的攝取量增加，活動量減少，腹部的脂肪不斷的堆積，血液中瘦素含量增加，從而出現肥胖癥。大鼠進行茶多酚處理之后，與模型對照組進行比對，發現大鼠的體重呈現明顯的下降趨勢，血液中瘦素的含量基本持平，由此可見，奧氮平引發動物肥胖與血清中瘦素的含量無明顯的關系。

脂聯素基因在白色脂肪組織中體現，脂聯素是由脂肪細胞分泌的激素蛋白。實踐證明，脂聯素的功效體現在以下幾個方面：能夠增強動物對葡萄糖的攝取，加快脂肪酸氧化速率、提高動物的胰島素抵抗力等。通過研究發現，這有可能有肥胖者體內脂肪組織分泌的腫瘤壞死因子有關。因此，有專家認為，動物體內脂聯素含量降低主要是由于脂肪含量增加后反饋制約調節所產生的結果。

與對照組進行比較之后發現，模型對照組大鼠體內的血清脂聯素水平在不斷的降低，由此可以看出，脂聯素在肥胖癥患者體內具有一種負向的反饋形式。采用茶多酚對大鼠進行處理之后，與模型對照組對比，茶多酚低劑量組血清脂聯素水平微微有所緩和。

胰島素抵抗也是造成肥胖的又一因素，胰島素抵抗會代償性增加胰島素分泌。數據顯示，對大鼠進行灌胃奧氮平處理之后，大鼠體內的胰島素水平和血糖水平并沒有受到任何的影響；肥胖大鼠進行茶多酚處理之后，體內的胰島素水平和血糖水平并沒有鮮明的變化。

奧氮平處理之后的大鼠，肝功能會有一定的損傷，肝細胞壞死之后，體內的AST會相應的增高，其增高的水平和肝細胞受到損傷的水平成正比，也就是最常見的肝功能檢測指標。通過實驗發現，模型對照組與對照組相比，其并沒有顯著的變化。大鼠經過茶多酚處理之后，與模型對照組相比，稍微有所下降。

一種能夠清除超氧陰離子的抗氧化酶，會對奧氮平誘導出來的肥胖大鼠的抗氧化能力產生重要影響。這種酶存在于細胞液中，能夠微妙地影響機體的氧化與抗氧化之間的平衡性，進而使得機體不會受到超氧陰離子的損害，并且動物體內酶的活性和含量也直接反映出細胞的抗氧化能力。并且由于它也是脂質過氧化的反應結果，所以它的含量也代表著機體內脂質過氧化的水平。

綜上所述，茶多酚能夠增加肥胖大鼠的血清活性，可以提高機體抗氧化能力，改善機體在低氧狀態以及應激狀態的炎癥反應，所以茶多酚能夠有效的減肥。