氣相色譜-質(zhì)譜法測定糧食中甲基毒死蜱的殘留量

◎張艷艷 韋石 李麗

氣相色譜-質(zhì)譜法測定糧食中甲基毒死蜱的殘留量

◎張艷艷 韋石 李麗

采用氣相色譜法-質(zhì)譜聯(lián)用技術和固相萃取前處理方法，建立了甲基毒死蜱農(nóng)藥殘留的檢測方法。樣品采用乙腈萃取目標組分，經(jīng)固相萃取柱凈化，并由HP-5MS柱（30m×0.25mm×0.25μm）進行分離，利用選擇性離子監(jiān)測（SIM）的方式，內(nèi)標法定量。分別對小米、大米、高粱、小麥、玉米、燕麥、大麥七種樣品進行0.0125mg/kg（檢出限）、0.0375mg/kg、0.0625mg/ kg、0.125mg/kg四個水平的加標回收試驗，回收率均在85.3～104.2%之間，RSD均在0.9～5.0之間。試驗證明該方法穩(wěn)定可靠，樣品前處理方法更加簡單，分析時間短，靈敏度和準確度高，可以滿足甲基毒死蜱農(nóng)藥殘留分析的要求。

目前測定農(nóng)藥殘留的分析方法主要為氣相色譜法，氣相色譜-質(zhì)譜法，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。氣相色譜法因為靈敏度較好，儀器成本低，一直以來被廣泛的使用，但是氣相色譜法分析時容易被樣品基質(zhì)中的干擾物質(zhì)對目標組分產(chǎn)生干擾，而氣相色譜-質(zhì)譜法可以很好的解決這一問題，通過對目標物質(zhì)的離子進行選擇性的監(jiān)測，使得干擾物質(zhì)造成的影響大大降低，再配合前處理中的固相萃取法，可以得到很好的測定效果。

材料與方法

材料與試劑。小米、大米、高粱、小麥、玉米、燕麥、大麥，用粉碎機打磨成粉狀后，過20目篩；甲基毒死蜱、外環(huán)氧七氯標準品；乙腈、甲苯、正己烷，HPLC（賽默飛世爾科技）；丙酮、無水硫酸鈉；Sep-Pak NH2柱：3mL，500mg；

儀器與設備。氣相色譜-質(zhì)譜儀7890A-7000C（Agilent）、固相萃取儀、離心機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、振蕩器。

方法

標準溶液配制。甲基毒死蜱標準溶液，丙酮定容至100μg/mL的標準儲備液，再準確吸取0.1mL標準儲備液，轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，得質(zhì)量濃度為1μg/mL的中間液，再根據(jù)需要逐步稀釋中間液，得相應的工作液。

將購買的質(zhì)量濃度為100μg/mL，規(guī)格為1mL的外環(huán)氧七氯內(nèi)標溶液全部轉(zhuǎn)移。

樣品處理

樣品的提取。稱取10g樣品（精確至0.01g），加入50mL乙腈，200r/min震蕩30min，而后全部轉(zhuǎn)移至離心管中，渦旋混合1min，8000r/min離心10min，取上清液25mL，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，待凈化。

樣品的凈化。在Sep-Pak NH2柱上端加入約2cm高無水硫酸鈉，用4mL乙腈-甲苯（3+1）溶液預洗，棄去流出液，用2mL乙腈-甲苯（3+1）溶液洗滌樣液瓶，重復3次，再用25mL淋洗Sep-Pak NH2柱，收集流出液，40℃水浴濃縮至1mL，加入50uL內(nèi)標液，混勻，上機測定。

儀器條件

色譜條件。色譜柱：HP-5MS（30m× 0.25mm×0.25μm）；程序升溫條件為100℃保持1min，50℃/min升至150℃，5℃/mihn升至240℃，保持5min，后運行300℃，3min；載氣流速1mL/min；進樣口溫度：250℃；分流模式：不分流；傳輸線溫度：280℃；進樣量1uL。

質(zhì)譜條件。質(zhì)譜掃描模式：選擇性離子掃描（SIM）；離子源為電子轟擊源（EI），離子源溫度：230℃；電子轟擊源：70eV；溶劑延遲：3.5min。甲基毒死蜱及外環(huán)氧七氯定性離子和定量離子的選擇見表1。

名稱保留時間定量離子定性離子甲基毒死蜱12.638286288（70）、197（5）外環(huán)氧七氯15.455353355（79）、351（52）

結(jié)果與分析

凈化條件。依據(jù)國家標準GB/T 19649 -2006的方法檢測甲基毒死蜱，本方法中，對凈化步驟進行了簡化，將提取液濃縮至少量體積后，直接過Sep-Pak NH2進行凈化，如樣品顏色較重，則在提取時加入少量石墨化炭黑（因活性炭對多種農(nóng)藥有很強的吸附作用，固使用石墨化炭黑）去除，減少了凈化的步驟，提高了回收率，使甲基毒死蜱在各種基質(zhì)中各個添加水平的回收率均達到了85%以上，并同樣有效地降低了目標物的干擾。

儀器條件

本方法選擇了弱極性的HP-5MS柱，修改了原標準中的升溫程序，使每次進樣的分析時間大大縮減，利用后運行，將可能存在的污染降至最低。

當樣品的目標物保留時間與標準品保留時間相差±0.05min，同時組分中定量離子與定性離子的豐度比滿足：相對豐度＞50%時，允許±10%偏差；相對豐度在20～50%時，允許±15%偏差；相對豐度在10%～20%時，允許±20%偏差；相對豐度≤10%時，允許±50%偏差；即可定性為目標物質(zhì)。

方法的線性范圍及檢出限。分別將小米、大米、高粱、小麥、玉米、燕麥、大麥等7種樣品，每種樣品分成24份平行樣品,線性范圍設定的濃度為0.05～1.00μg/mL時，線性方程為y=3.819189x+0.069975，R2=0.99998819，滿足檢測需求。對檢出限濃度0.0125mg/kg的空白加標測定，進行6次平行試驗，測定結(jié)果均大于10倍信噪比，符合檢測需求。

方法精密度和準確度。為了對本方法進行驗證，對小米、大米、高粱、小麥、玉米、燕麥、大麥等7種樣品分別進行0.0125mg/ kg（檢出限）、0.0375 mg/kg、0.0625 mg/ kg和0.125 mg/kg這4個水平的添加，每種樣品每個添加水平進行6次平行試驗，計算其加標回收率和相對標準偏差（RSD）。實驗結(jié)果表明，7種樣品的4個添加水平的回收率均在85～105%，RSD≤10%，滿足分析測定的要求。其具體的精密度和準確度數(shù)據(jù)見表2。

表2 甲基毒死蜱回收率及相對標準偏差（n=6）

本文通過乙腈振蕩提取糧谷中的甲基毒死蜱，并利用固相萃取凈化技術去除樣品基質(zhì)中的干擾物質(zhì)，利用氣相色譜-質(zhì)譜儀選擇性離子掃描，成功的建立了糧谷中甲基毒死蜱的分析方法。通過對小米、大米、高粱、小麥、玉米、燕麥、大麥等7種樣品進行4水平添加，并用內(nèi)標法進行定量，所建立的方法回收率，相對標準偏差（RSD）滿足精密度和準確度需要，能夠?qū)Z谷中的甲基毒死蜱含量進行很好的定性、定量分析。

（作者單位：遼寧通正檢測有限公司）