異位性皮炎患兒不同過敏原檢測方法的應用價值

曹 偉, 徐 婷, 王小媛, 翟曉艷, 朱小英, 王穎娟, 林鳳萍, 馮玉婷

(陜西省寶雞市中心醫院 皮膚科, 陜西 寶雞, 721008)

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異位性皮炎患兒不同過敏原檢測方法的應用價值

曹 偉, 徐 婷, 王小媛, 翟曉艷, 朱小英, 王穎娟, 林鳳萍, 馮玉婷

(陜西省寶雞市中心醫院 皮膚科, 陜西 寶雞, 721008)

異位性皮炎; 過敏原; 點刺試驗; 斑貼試驗; 血清IgE檢測

異位性皮炎(AD)是一種慢性、瘙癢性、復發性皮膚炎癥性疾病。患者及其家屬有“遺傳性過敏體質”[1], 中國的發病率為3%[2]。過敏反應在該病皮膚炎癥啟動及加重過程起重要作用[3], 臨床常用血清IgE檢測AD過敏原分布情況。但AD發病機制復雜, IgE所代表的Ⅰ型過敏反應不能全面反映過敏情況。本實驗通過點刺試驗、斑貼實驗及血清IgE檢測這三種方法對AD患兒過敏原進行分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

隨機選取寶雞市中心醫院2013年3月—2016年3月門診確診[1]并行過敏原檢測的AD患兒194例，男105例，女89例，平均年齡10.9歲。其中點刺試驗共93例，男53例，女40例; 斑貼試驗共55例，男20例，女35例; 血清IgE檢測46例，男24例，女22例。對照組為健康同齡患兒。排除標準: ① 已知明確致病原因及不能配合操作的AD患兒; ② 試驗前2周內使用過糖皮質激素、免疫調節劑, 1周內用過抗組胺藥的患者; ③ 伴脂溢性皮炎、銀屑病等其他皮膚病患兒。

1.2 檢測方法

1.2.1 點刺試驗方法：生理鹽水陰性對照、組胺陽性對照、一次性變應原及點刺針均由Allergop-hanna公司提供。過敏原品種選擇25種最常見的過敏原，分別為法桐禾本科艾蒿等。取兩前臂屈側為皮試部位，用水、酒精清潔試驗部位皮膚，待皮膚干燥、皮溫恢復正常后，從左臂外側由下而上垂直點刺皮試液，每點計量為0.02 mL, 每點間距4 cm, 25種過敏原分別排列于兩側前臂, 5 min后逐個擦去皮試液, 20 min后觀察皮試結果。測試經培訓的醫生專人操作。以變應原風團平均直徑大于或等于組胺之平均直徑者判定為陽性。

1.2.2 斑貼試驗方法：采用北京百億怡達科技開發有限公司提供的皮膚斑貼試驗診斷試劑盒。所測致敏物19種，包括氯化鈷硫酸鎳基混合物等。按照斑貼試驗診斷試劑盒的說明書進行操作。每例患者均以標準方法將受試抗原貼敷在背部脊柱兩側, 48 h除去，判讀結果。斑貼試驗期間局部切忌濕水，抓撓。

1.2.3 IgE檢測方法: IgE檢測采用德國敏篩定量過敏原檢測系統(德國MEDIWISS公司)，免疫印跡法檢測血清總IgE及過敏原18種，包括戶塵螨屋塵矮豚草等。抽取靜脈血2 mL, 3 000 r/min離心15 min, 以1∶25稀釋，洗勻器上室溫孵育45 min, 清洗后加入250 μL堿性磷酸酶標記的鏈霉親和素，室溫孵育20 min, 加入250 μL底物，室溫孵育20 min, 沖洗后終止反應。干燥后, 在Rapidreader上根據著色深淺讀出結果, >0.35 IU/mL為陽性。

2 結 果

93例AD患兒點刺試驗結果見表1。93例患兒點刺試驗檢測發現，在25項檢測項中陽性率高達40%。與正常對照相比，吸入性過敏原中艾蒿、楊樹、雜草、粉塵螨、屋塵螨、霉菌陽性率顯著增高，食物性過敏原中牛肉、花生、鱈魚陽性率顯著增高(P<0.05)。55例AD患兒斑貼試驗結果見表2。55例患兒斑貼試驗發現陽性率高達42%。與正常對照相比，硫酸鎳、巰基混合物、重鉻酸鉀、甲醛、溴硝丙醇、芳香混合物、黑橡膠混合物、對苯二胺基質敏感陽性率顯著增高(P<0.05)。46例AD患兒IgE檢測結果見表3。46例患兒血清IgE檢測發現陽性率為21%。與正常對照組比較，總IgE顯著增高，吸入性過敏原中戶塵螨、貓毛狗毛陽性率顯著增高，食物性過敏原中僅牛、羊肉兩項陽性率較對照顯著增高(P<0.05)。

表1 AD點刺檢測比較表[n(%)]

與AD陽性比較, *P<0.05, **P<0.01。

3 討 論

AD的發病機制尚不清楚，可能與遺傳、環境、免疫及皮膚屏障功能缺陷等因素有關。目前大部分研究[4]認為，過敏反應在AD的發病中起著重要作用，臨床也發現患兒血清IgE增高及嗜酸細胞增多是普遍存在的現象，因此上述兩種檢驗已成為AD的常規檢測項目。但理論上認為IgE介導是Ⅰ型過敏反應，而AD往往表現為Ⅲ、Ⅳ過敏反應介導的濕疹樣改變，那么臨床常用的點刺試驗及斑貼過敏原檢測能否對AD的過敏原體系進行有益的補充，國內外學者已進行了一些探索。鐘韓榮等[5]認為皮膚點刺試驗和血清slgE差異無統計學意義，兩者相關性好。Calabria等[6]報道，血清slgE檢測過敏原和皮膚點刺試驗陽性率無顯著差異。邵依等[7]卻發現點刺試驗與血清IgE檢測無明顯的相關性。關于斑貼實驗在AD患兒中的應用研究目前仍較少。

表2 AD斑貼檢測比較[n(%)]

與AD陽性比較, *P<0.05, **P<0.01。

表3 AD血清IgE檢測比較[n(%)]

與AD陽性比較, *P<0.05, **P<0.01。

本實驗發現, AD患兒男女比例無顯著差異，大部分患兒均能接受這三種過敏原檢測方法。點刺試驗在AD患兒中過敏原陽性種類比例達40%, 特別是對艾、霉菌等吸入性過敏原及牛肉、鱈魚、花生等食入性過敏原較敏感，這可能和患者本身處于高敏狀態有關，這些過敏性物質在AD過敏體質的基礎上可能會進一步加重病情。血清IgE檢測過敏原陽性種類比例占21%, AD患兒總IgE明顯增高，陽性率超過60%, 這與大部分的臨床研究[8]一致。吸入性過敏原中戶塵螨、貓毛/狗毛陽性率增高，食物中僅牛、羊肉兩項增高。這說明屋塵、動物毛發有可能誘發AD, 與臨床表現相符。

斑貼試驗對接觸相關過敏性疾病有較高的診斷價值，主要反映了Ⅲ、Ⅳ型變態反應的情況，在AD患兒中較少應用，相關研究更少。本實驗發現斑貼實驗的過敏原陽性種類比例達42%。在諸多過敏性物質中硫酸鎳、巰基混合物、重鉻酸鉀、甲醛等陽性率較高，其中硫酸鎳見于金屬佩物、不銹鋼等含鎳物品，巰基混合物多應用于橡膠產品中。重鉻酸鉀用于制造火柴、鉻顏料，并供鞣革、電鍍、有機合成等方面。甲醛廣泛應用在日常生活中，作為消毒劑及防腐劑在化妝品、建筑材料、服裝、衣料中均有添加，它不但容易引發過敏，使用劑量超標更會引發中毒及慢性皮炎類疾病。溴硝丙醇在香波、香酯和霜劑的加工過程中使用，主要起到防腐、抗菌作用，在以往的試驗中較少檢出。作者發現它的陽性率也較高，對苯二胺具有強烈的致敏作用，多用于染發劑中，李林峰[9]認為對苯二胺是誘發面部過敏的重要原因。芳香混合物作為香料普遍添加于護膚品、日化產品中，也是報道較多的致敏物[10], 僅次于硫酸鎳，本研究也證明陽性率高達50.9%。

通過本次系統的過敏原檢測研究，作者發現三種不同的檢驗方法中點刺試驗和血清IgE檢測陽性率高，過敏原種類不但有重復現象，而且點刺試驗發現的過敏原種類更多，這可能和患兒皮膚較敏感，作為體內試驗的點刺試驗更能反映即時的過敏狀態。

[1] 陳艷, 郝飛. 特應性皮炎研究現狀[J]. 國外醫學皮膚性病學分冊, 2005, 31(2): 84-86.

[2] 張秀欽, 程波, 羅麗平, 等. 特應性皮炎的發病機制新進展[J]. 中國醫藥指南, 2012, 26(10): 65-66.

[3] Zhang H, Guo Y, Wang W, et al. Mutations in the filaggrin gene in Han Chinese patients with atopic dermatitis[J]. Allergy, 2011, 66(3): 420-427.

[4] Kumar M K, Singh P K, Patel P K. Clinico-immunological profile and their correlation with severity of atopic dermatitis in Eastern Indian children[J]. J Nat Sci Biol Med, 2014, 5(1): 95-100.

[5] 鐘韓榮, 余曉娟, 壺少芝, 等. 血清特異性IgE水平與標準化皮試在哮喘患兒特異性診斷中的應用探討[J]. 中國醫師雜志, 2006, 8(11): 1565-1566.

[6] Calabria C W, Dietrich J, Hagan L. Comparison of serum-specific IgE (ImmunoCAP) and skin-pricktest results for 53 inhalant allergens in patients with chronic rhinitis [J]. Allergy Asthma Porc, 2009, 30(4): 86-96.

[7] 邵依, 李紅文, 張江安, 等. 特應性皮炎患者過敏原兩種檢測方法的相關性[J]. 中國皮膚性病學雜志, 2012, 26(7): 615-616.

[8] 余碧娥, 田潤梅, 康克非, 等. 特應性皮炎患者血清lgE測定及其臨床意義[J]. 中華皮膚科雜志, 2000, 33(4): 227-228.

[9] 李林峰. 接觸性皮炎與皮膚變態反應[M]. 北京: 北京大學醫學出版社, 2012: 752-753.

[10] 黎偉珍, 張弘. 106例面部皮炎斑貼試驗結果分析[J]. 中國麻風皮膚病雜志, 2012, 28(10): 752-753.

2017-01-11

陜西省寶雞市衛生局科研立項課題(2012-15)

馮玉婷, E-mail: id_caowei@sina.com

R 753.2

A

1672-2353(2017)09-152-03

10.7619/jcmp.201709045