妊娠晚期婦女陰道假絲酵母菌感染情況及其耐藥性分析

魏寒松+馬春紅+李立旻+馬慶敏+李會敏

摘要：目的 觀察妊娠晚期婦女假絲酵母菌感染的病原菌類型分布及其對抗真菌藥的敏感性。方法 收集產科住院患者陰道拭子，接種沙保羅葡萄糖瓊脂平板。使用Vitek 2 compact微生物鑒定系統進行菌種鑒定，ATB-FUNGUS 3進行藥敏試驗。所有數據采用WHONET5.6進行統計分析。 結果 妊娠晚期陰道真菌感染以白假絲酵母菌為主（83.23%），其次為光滑假絲酵母菌（14.93%），其它假絲酵母菌占1.84%。白假絲酵母菌、光滑絲酵母菌對5種常用抗真菌藥耐藥率均低于10%。其它假絲酵母菌對唑類藥物耐藥率較高。結論 白假絲酵母菌對常見抗真菌藥敏感性較高，其它假絲酵母菌耐藥性高于白假絲酵母菌。治療假絲酵母菌感染時應結合菌種鑒定及藥敏試驗結果合理選擇抗真菌藥物。

關鍵詞： 妊娠；假絲酵母菌；真菌藥敏試驗

Infection of Candida Vaginalis in Women with Late Pregnancy and its Drug Resistance

WEI Han-song，MA Chun-hong， LI Li-min，MA Qing-min，LI Hui-min

（Department of Clinical Laboratory，Ninghe Tianjin Hospital，Tianjin 301500，China）

Abstract：Objective To observe the effect of late pregnancy women in Candida infection of pathogenic bacteria types distribution and antifungal drug sensitivity.Methods Collected obstetric hospitalized patients vaginal swab，inoculation of glucose agar.Sandy Paull strains were identified using Vitek 2 compact microbial identification system，ATB-FUNGUS 3 susceptibility test.All the data were analyzed by WHONET5.6 statistical analysis.Results Candida albicans were mainly infected with Candida albicans（83.23%），followed by Candida glabrata（14.93%）and Candida albicans accounted for 1.84%.Candida albicans，Smoothe yeast resistance to five commonly used antifungal agents were less than 10%.Other Candida strains have higher resistance to azole drugs.Conclusion Candida albicans is more sensitive to common antifungal agents，and other Candida strains are more resistant to Candida albicans.Treatment of Candida infection should be combined with the identification of bacteria and drug susceptibility test results reasonable choice of antifungal drugs.

Key words：Pregnancy；Candida；Fungal susceptibility test

20%～30%健康無癥狀非妊娠婦女陰道內可以分離到假絲酵母菌屬，大多數為白假絲酵母菌。如果隨訪時間超過1年，則分離率可超過70%[1]。當酵母樣真菌與宿主之間寄生的平衡被暫時干擾，它們能夠引起外陰陰道假絲酵母菌病（vulvovaginal candidasis ， VVC），并伴隨炎癥等臨床特征。VVC常常與某些已知的危險因素有關，例如，妊娠、不恰當使用抗生素引起微生物菌群失調和免疫抑制劑的使用等[2]。

多數VVC患者在沒有明確診斷的前提下就給予OTC藥物治療，因此，其準確發病率不明。據估算，約有75%的女性在育齡期至少有過1次VVC發作，其中約半數會復發。在美國關于VVC發病率的描述只有兩項以發病人群為基礎的研究[3]。

本研究通過形態學及體外培養研究等方法，調查分析妊娠晚期婦女陰道假絲酵母菌感染情況，及其對常用抗真菌藥物的耐藥情況。為該疾病的流行病學研究和臨床醫師抗感染治療提供理論依據。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1標本來源于我院 2014年1月～12月的產科住院患者，從陰道后穹窿分別用無菌棉拭子和一次性轉運拭子取分泌物做涂片顯微鏡檢查和真菌培養。直接涂片鏡檢可見真菌孢子及菌絲，培養發現假絲酵母菌生長者納入到本實驗中。

1.1.2 儀器與試劑 哥倫比亞血瓊脂平板、沙保羅葡萄糖培養基購自梅里埃上海生物制品有限公司。Vitek 2 compact 全自動微生物鑒定系統、ATB-FUNGUS3酵母樣真菌藥敏試劑盒（微量稀釋法）購自法國生物梅里埃公司。MJX-250BⅢ霉菌培養箱購自天津泰斯特儀器有限公司。

1.2方法

1.2.1所有標本同時接種哥倫比亞血瓊脂平板和沙保羅葡萄糖瓊脂平板，35℃有氧環境培養24～72 h。使用VITEK 2 Compact 全自動微生物鑒定系統YST鑒定卡對純培養菌落進行鑒定。使用梅里埃ATB-FUNGUS 3藥敏試劑盒進行藥敏試驗。結果判斷參照試劑盒說明書。參照鑒定儀器與藥敏試劑盒推薦的質控菌株ATCC 2950光滑假絲酵母菌、ATCC6258 柔假絲酵母菌對細菌鑒定與藥敏進行質控。質控結果在控的情況下記錄試驗結果。

1.2.2所有數據采用WHONET 5.6 軟件進行統計分析。

2結果

2.1假絲酵母菌種類、患者年齡分布 從2627份產科住院患者陰道拭子中分離到假絲酵母菌489株，分離率18.61%。其中白假絲酵母菌407株占83.23%，光滑假絲酵母菌73株占14.93%，其它假絲酵母菌9株占1.84%，以白假絲酵母菌為主，其次為光滑假絲酵母菌。從年齡分布來看，感染人群以21～30歲（77.10%）為主，其次為31～40歲（13.10%），其它年齡段占9.8%。見表1。

2.2假絲酵母菌對5種抗真菌藥物的敏感性 本研究中發現有2例（0.5%）白假絲酵母菌對兩性霉素B耐藥；有3例（0.7%）白假絲酵母菌，1例光滑假絲酵母菌對5-氟胞嘧啶呈現劑量依賴性敏感（SDD）。未發現其它酵母菌對上述兩種藥呈現耐藥。所分離到的酵母菌對唑類抗真菌藥物都呈現出不同程度的耐藥性，光滑假絲酵母菌要略高于白假絲酵母菌，但二者要明顯低于其它假絲酵母菌，見表2。

3討論

假絲酵母菌屬在女性VVC患者中的分布與地區和種群相關。通常在單純性或復雜性VVC的患者中，同一份陰道拭子只能分離到一種假絲酵母菌；但是，也有少數患者（2～5%）發現同時存在兩種或兩種以上假絲酵母菌感染[4]。本試驗中，未發現存在兩種或以上假絲酵母菌感染的情況。其原因可能由于假絲酵母菌在沙保羅平板上菌落形態差別較小，未使用顯色培養基。因此，不排除有漏檢的可能。

與歐美相比，非白假絲酵母菌在亞非國家更為常見。在土耳其、印度和尼日利亞，光滑假絲酵母菌所致VVC比例占30～37%[5-6]。但是，我們觀察到所有非白假絲酵母菌占比為16.77%。這與國內其它研究及美國的報道非常相似[7]。

研究表明，依照美國CLSI M27-A檢測陰道分離酵母菌對氟康唑的敏感性，提示大約21.1%菌株對氟康唑耐藥[1]。也有研究表明，陰道酵母菌對氟康唑和氟胞嘧啶耐藥性較低分別為（3.7% 和3.0%）[8]。在本研究中，白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌對5種抗真菌藥物的耐藥率都處于較低水平。其中，兩性霉素B耐藥率低于1%，5-氟胞嘧啶未發現耐藥株，氟康唑耐藥率低于3%，伊曲康唑耐藥率低于6%，伏立康唑耐藥率低于3%。在不同菌株中，氟康唑MIC值升高僅見于克柔假絲酵母菌（R：75.0%，SDD：25%，主要考慮存在天然耐藥）。耐藥率低的原因可能是試驗對象身體狀況良好、無慢性病病史、無長期使用抗真菌藥物史。因此，從該人群中分離到的酵母菌大多數為野生型菌株。

本研究還發現，部分感染患者陰道內分離的非白色假絲酵母菌，體外藥敏試驗對吡咯類抗真菌藥不敏感。但是，使用氟康唑治療該耐藥株表現出良好的臨床療效。我們推測其可能與減少陰道真菌數量、緩解陰道負荷有關。

由于條件的限制，很少有醫院將真菌藥敏試驗用于對VVC患者的管理和動態監測。但是，我們認為在頑固性VVC或突破性真菌感染患者優化治療時，藥敏試驗具有較大的指導意義。本研究提示我們，治療假絲酵母菌感染時應結合菌種鑒定及藥敏試驗結果合理選擇抗真菌藥物。

參考文獻：

[1]Ragunathan L，Poongothai GK，Sinazer AR，et al.Phenotypic Characterization and Antifungal Susceptibility Pattern to Fluconazole in Candida species Isolated from Vulvovaginal Candidiasis in a Tertiary Care Hospital[J].J Clin Diagn Res，2014，8（5）：DC01-04.

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[5]Asticcioli S，Sacco L，Daturi R，et al.Trends in frequency and in vitro antifungal susceptibility patterns of Candida isolates from women attending the STD outpatients clinic of a tertiary care hospital in Northern Italy during the years 2002-2007[J].New Microbiol，2009，32（2）：199-204.

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