結(jié)腸癌患者IL-24表達與臨床分期、病理分化程度的關系

盧勇 畢鐵男 郭敏慧 張銳利 周申康

結(jié)腸癌患者IL-24表達與臨床分期、病理分化程度的關系

盧勇 畢鐵男 郭敏慧 張銳利 周申康

目的 分析IL-24表達與結(jié)腸癌臨床分期、病理分化程度的關系。方法 收集68例結(jié)腸癌病例資料，采用免疫組化方法檢測癌組織、癌旁組織中IL-24表達，分析IL-24陽性表達率與結(jié)腸癌臨床分期、病理分化程度的關系。 結(jié)果 IL-24在結(jié)腸癌組織、癌旁組織中的陽性表達率分別為58.8%和100.0%。IL-24在結(jié)腸癌組織中的陽性表達率隨臨床分期升高而下降（P＜0.05），隨病理分化程度降低而下降（P＜0.05）。 結(jié)論 IL-24在結(jié)腸癌組織中的陽性表達率隨臨床分期升高而下降，隨病理分化程度降低而下降。

結(jié)腸癌 IL-24 臨床分期 病理分化程度

結(jié)腸癌是臨床上較為常見的消化道惡性腫瘤之一，易發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移，具有高度的惡性生物學行為特性。目前關于結(jié)腸癌的發(fā)病機制尚未完全明確，有學者認為研究結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展的分子生物學機制具有重要的臨床意義[1]。IL-24是一種促炎癥細胞因子，參與了皮膚、腦、肺和胃腸道等多種組織的慢性炎癥，能促進NK細胞、T淋巴細胞和樹突狀細胞的增殖與分化，進而提高NK細胞的殺傷活性，從而加強機體細胞的免疫功能[2]。本研究收集68例結(jié)腸癌病例資料，旨在分析IL-24表達與結(jié)腸癌臨床分期、病理分化程度的關系。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 收集2015年1至12月本院收治的68例結(jié)腸癌病例資料，其中女27例，男41例；年齡40～78（53±11）歲；術后經(jīng)病理證實為結(jié)腸癌。取根治手術切除的癌組織、癌旁組織（距離癌腫邊緣2cm以外正常組織）和系膜內(nèi)外轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)組織。

1.2 主要試劑 IL-24兔抗人單克隆抗體（法國AC公司，RAB83748）、免疫組化Elivision plus廣譜試劑盒、濃縮型DAB試劑盒、DAB液、PBS緩沖液、檸檬酸鹽抗原修復液、蘇木素（中國福建新生物技術有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 檢測方法 采用免疫組化SP法檢測癌組織、癌旁組織中IL-24表達，嚴格按照說明書操作。以試劑盒自帶的標準陽性片的染色結(jié)果作為陽性對照，以PBS緩沖液代替一抗的染色結(jié)果作為陰性對照。

1.3.2 結(jié)果判斷 顯微鏡高倍視野（×400）下細胞內(nèi)的特定部位出現(xiàn)黃色顆粒，且染色強度明顯高于背景的非特異性染色的細胞判定為陽性細胞，其中“基本不著色，背景顏色一致，同陰性對照”為0分，“淡黃色，染色弱，但深于背景顏色和陰性對照”為1分，“棕黃色，染色清晰，同陽性對照接”為2分，“棕褐色，染色強”為3分。隨機選擇5個高倍視野（×400）進行計數(shù)，取其平均值，再根據(jù)染色強度和染色細胞的百分率進行陽性細胞計數(shù)評分：0%～5%為0分，5%～30%為1分，＞30%～60%為2分，＞60%為3分。陽性細胞染色程度評分與陽性細胞計數(shù)評分相加，最終結(jié)果分為陰性（＜2分）和陽性（＞2分）。

1.4 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；不同臨床分期或病理分化程度患者IL-24陽性表達率變化分析采用趨勢χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 IL-24陽性表達率與臨床分期的關系 IL-24在結(jié)腸癌組織、癌旁組織中的陽性表達率分別為58.8%（40/68）和100.0%（68/68），兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2=35.259，P＜0.05），見圖1。Dukes分期為A、B、C和D的結(jié)腸癌患者，其IL-24陽性表達率分別為84.6%（11/13）、86.4%（19/22）、39.1%（9/23）和10.0%（1/10）；隨Dukes分期升高，IL-24陽性表達率呈下降趨勢（χ2趨勢= 23.983，P＜0.05）。

圖1 IL-24在結(jié)腸癌組織、癌旁組織中的表達（a：結(jié)腸癌組織；b：癌旁組織；SP法，×400）

2.2 IL-24陽性表達率與病理分化程度的關系 低、中、高病理分化程度的結(jié)腸癌患者，其IL-24陽性表達率分別為25.0%（7/28）、80.9%（17/21）和84.2%（16/ 19）；隨著病理分化程度降低，IL-24陽性表達率呈下降趨勢（χ2趨勢=22.562，P＜0.05）。IL-24在不同病理分化程度中的表達見圖2。

圖2 IL-24在不同病理分化程度中的表達（a：高分化；b：低分化；SP法，×400）

3 討論

IL-24是一類促炎癥細胞因子，它能通過不同類型的細胞誘導分泌大量趨化因子、細胞因子。IL-24主要由輔助性T細胞-24細胞產(chǎn)生[3]，在IL-6和轉(zhuǎn)化生長因子-β的共同誘導下，通過信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄干擾素調(diào)節(jié)因子-4、激活因子-3來上調(diào)維甲酸相關孤核受體，從而參與自身免疫性疾病和炎癥反應[4]。

目前有學者認為IL-24在結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用。Sobhani等[5]在裸鼠模型中發(fā)現(xiàn)IL-24+/+裸鼠腫瘤的大小、生長速度均明顯高于IL-24-/-裸鼠。Brew等[6]認為結(jié)腸癌引起的炎癥能誘導腫瘤浸潤性細胞分泌IL-24、TNF-α和IL-8形成免疫抑制微環(huán)境，促進腫瘤細胞進一步增殖。結(jié)腸癌腫瘤進展的一個重要特點是向周圍組織細胞的浸潤生長，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是其臨床分期、病理分期的一個重要標志[7]。本項研究結(jié)果表明，IL-24陽性表達率隨臨床分期的升高而呈下降趨勢，與Choi等[8]的研究結(jié)果一致。

綜上所述，IL-24很有可能會成為未來結(jié)腸癌分子生物學治療的一個新靶點。目前已有研究初步證實其獨特的抑制腫瘤活性、抗腫瘤生成與轉(zhuǎn)移、增加腫瘤對放射的敏感性等作用[9]。本研究結(jié)果表明IL-24陽性表達率隨臨床分期的升高而下降，隨病理分化程度降低而下降。但是，IL-24在結(jié)腸癌組織中的表達水平與遠處轉(zhuǎn)移的關系、在正常的結(jié)腸組織向結(jié)腸癌轉(zhuǎn)變的過程中失活機制的完成過程、在失活機制中與腫瘤浸潤生長的信號轉(zhuǎn)導通路是否有關等問題都需要進一步研究。

[1]胡若磊,韋曉,周青,等.褪黑素對結(jié)腸癌細胞系RKO增殖和凋亡的影響[J].安徽醫(yī)科大學學報,2012,47(1):27-30.

[2]Gerem ia A,Jewe llD P.The IL-24 pathway in inflamm atory bowe l d isease[J].ExpertRev GastroenterolHepatol,2012,6(2):223-237. [3]Lubberts E.IL-24/Th24targeting:on the road to p revent chronic destructive arthritis[J].Cytokine,2008,41(2):84-91.

[4]Jema lA,SiegelR,Ward E,etal.Cancer statistics[J].CA Cancer JClin,2015,58(2):71-96.

[5]Sobhani I,Tap J,Roudot-thoraval F,et al.M icrobialdysbiosis in colocolorectal cancer(CRC)patients[J].PLoS One,2011,6(1): 16393.

[6]Brew R,Erikson J S,West D C,et al.Interleukin-24 as an autocrine g row th factor for hum an co lon carcinoma cells in vitro[J]. Cytokine,2016,12(1):78-85.

[7]Rubie C,Frick VO,PfeilS,eta l.Correlation of IL-24 w ith induction,p rog ression and metastatic potentialo f colorectal cancer[J]. World JGastroenterol,2016,13(37):4996-5002.

[8]ChoiY,Roh M S,Hong YS,etal.Interleukin-24 is correlated with d ifferentiation and lym ph node numbers in colorectal cancer[J]. World JGastroenterol,2011,17(9):1167-1173.

[9]Gunderson L L,Jessup JM,Sargent D J,et al.Revised tumor and node categorization for colorectal cancer based on surveillance,epidem iology,and end results and colorectalpooled analysis outcomes[J].Clin Oncol,2011,28(2):256-263.

2016-09-25）

（本文編輯：陳丹）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.6.2016-1508

浙江省公益性技術應用研究（2013C33112）

317000浙江省臺州醫(yī)院胃腸外科

盧勇，E-mail：luyong@enzemed.com