基于花生四烯酸代謝通路研究水飛薊素對脂多糖誘導炎癥模型影響

麥旦提, 楊 嬋, 薛 蕓, 王 彥, 閻 超

(上海交通大學藥學院, 上海 200210)

研究論文

基于花生四烯酸代謝通路研究水飛薊素對脂多糖誘導炎癥模型影響

麥旦提, 楊 嬋, 薛 蕓, 王 彥*, 閻 超*

(上海交通大學藥學院, 上海 200210)

以脂多糖類似物(KLA)誘導的RAW264.7細胞為研究對象,采用代謝組學研究手段,研究水飛薊素對脂多糖誘導炎癥模型中花生四烯酸代謝通路的影響。以超高效液相色譜-三重四極桿質譜聯用為平臺,對不同濃度水飛薊素作用下KLA誘導RAW264.7炎癥細胞分泌的類二十烷酸代謝物進行定量分析,通過考察主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判別分析(OPLS-DA)的VIP值和Kruskal-Wallis秩和檢驗結果顯著性差異(P)值篩選代謝標記物。建立了59種類二十烷酸(含15種同位素內標)在5 min內實現快速分離的液相色譜-質譜聯用方法;確定了細胞存活率在58%～80%的水飛薊素濃度為50～150 μmol/L;篩選出數據處理結果同時滿足變異權重參數(VIP)值>1且結果P值<0.05的類二十烷酸代謝標記物12-OxoLeukotriene B4(12-OxoLTB4);通過分析柱狀圖和炎癥信號通路,確定水飛薊素借助其抗氧自由基特性發揮抗炎作用,通過抑制脂氧合酶-5 (5-LOX)的活性及阻斷5-LOX代謝通路中產生氧自由基的脂質過氧化反應來減少氧自由基及過氧化物的形成。綜上所述,所建立的方法能快速準確地定量分析多種類二十烷酸,并從代謝組學角度解釋了水飛薊素的抗炎機制。

超高效液相色譜-串聯質譜;類二十烷酸;同位素內標;水飛薊素;代謝組學;炎癥

炎癥是人類多種疾病中最常見的一種病理過程,在機體的任何部位和任何組織均有可能發生,而花生四烯酸代謝網絡是產生炎癥介質的主要網絡。類二十烷酸(eicosanoids),也稱類花生酸,是一大類由二十碳的多不飽和脂肪酸氧化產生的具有生物活性的物質。類二十烷酸是體內重要的炎癥因子,參與機體免疫及炎癥反應過程,并在許多疾病的病理生理過程中起著重要的作用。

中藥因其具有抗炎效果好、不良反應少、來源豐富等優勢,在抗炎藥物的開發中越來越受到人們的重視。水……