在線液相色譜-二極管陣列檢測器-串聯質譜法檢測野生菌中鵝膏毒肽和鬼筆毒肽

徐小民, 張京順, 蔡增軒, 張 晶, 黃百芬, 許嬌嬌, 陳 苘

(浙江省疾病預防控制中心, 浙江 杭州 310051)

研究論文

在線液相色譜-二極管陣列檢測器-串聯質譜法檢測野生菌中鵝膏毒肽和鬼筆毒肽

徐小民*, 張京順, 蔡增軒, 張 晶, 黃百芬, 許嬌嬌, 陳 苘

(浙江省疾病預防控制中心, 浙江 杭州 310051)

建立了在線液相色譜-二極管陣列檢測器-串聯質譜技術(LC-DAD-MS/MS)同時測定野生菌中多肽類蘑菇毒素(鵝膏毒肽和鬼筆毒肽)的分析方法。樣品經甲醇提取,水稀釋后,在堿性條件下用XBridgeTMBEH C18柱(150 mm×3.0 mm, 2.5 μm)分離,并先后用DAD和MS/MS檢測。使用堿性流動相能夠實現5種多肽類蘑菇毒素在15 min內達到基線分離,同時又能有效抑制質譜加鈉峰[M+Na]+的響應信號,保證檢測的穩定性和靈敏度。5種蘑菇毒素在0.05～500 mg/kg范圍內線性關系良好,相關系數(r)>0.99;檢出限為0.005～0.02 mg/kg。通過實際樣品檢測,證明該法操作簡單、快速，靈敏度高,寬的定量檢測線性范圍能滿足實際樣品中蘑菇毒素含量變化大的特點。

在線液相色譜-二極管陣列檢測器-串聯質譜法;寬線性范圍定量;蘑菇毒素;鵝膏毒肽;鬼筆毒肽；野生菌

鵝膏毒肽(amanitins)和鬼筆毒肽(phallotoxins)屬于致命的環狀多肽類蘑菇毒素,小鼠半數致死量(LD50)分別為0.3～0.7 mg/kg和1.5～3 mg/kg[1],前者主要包括α-鵝膏毒肽(α-amanitin)、β-鵝膏毒肽(β-amanitin)和γ-鵝膏毒肽(γ-amanitin),后者主要包括羧基二羥鬼筆毒肽(phallacidin)和二羥鬼筆毒肽(phalloidin)。我國野生菌資源豐富,已報道的有3 800種以上,而有毒的有435種[2]。近年來,我國因有毒蘑菇引起的突發中毒事件頻繁發生,2004～2014年的病死率高達21.24%[3],主要由能引起肝腎功能衰竭的多肽類蘑菇毒素引起。