垂體腺瘤組織缺氧誘導因子-1α、白細胞分化抗原147表達及其與血管內皮生長因子的關系

李深譽 陽永東 黃蕃俊 陳 前 羅朗昭 嚴 峻

(桂林醫學院第二附屬醫院神經外科，廣西 桂林 541000)

垂體腺瘤組織缺氧誘導因子-1α、白細胞分化抗原147表達及其與血管內皮生長因子的關系

李深譽 陽永東 黃蕃俊 陳 前 羅朗昭 嚴 峻

(桂林醫學院第二附屬醫院神經外科，廣西 桂林 541000)

目的 檢測垂體腺瘤中缺氧誘導因子(HIF)-1α和白細胞分化抗原(CD)147的表達，關注二者與血管內皮生長因子(VEGF)的相關性。方法 經病理確診的垂體腺瘤手術患者48例為觀察組，6例尸檢中留取的垂體(腺垂體)為對照組，均留取術后石蠟包埋組織。應用免疫組化方法檢測兩組HIF-1α、CD147和VEGF的表達。結果 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達的陽性率明顯高于對照組(均P<0.05)，觀察組HIF-1α、CD147和VEGF的表達與是否為侵襲性垂體腺瘤、Ki67的表達密切相關(均P<0.05)，而三者均與是否為功能性的腺瘤無關(均P>0.05)。線性相關分析顯示觀察組HIF-1α、CD147和VEGF的表達呈正相關。結論 垂體腺瘤中HIF-1α、CD147和VEGF表達升高可能與腫瘤侵襲性生長有關。HIF-1α、CD147均與VEGF有一定的協同作用。

垂體腺瘤；缺氧誘導因子-1α；白細胞分化抗原147；血管內皮生長因子

垂體腺瘤是鞍區最常見的腫瘤，部分腫瘤在生長過程中可表現為侵襲性，手術較難完全切除，術后復發率高〔1〕。研究認為垂體腺瘤的間質富于血管〔2〕。缺氧誘導因子(HIF)-1α在局部組織缺氧時產生，對腫瘤的侵襲、轉移及血管生成均有重要促進作用〔3〕。白細胞分化抗原(CD)147是跨膜糖蛋白的一種，在腫瘤組織中表達升高，可以引起腫瘤細胞增殖，同時其對血管生成可能有一定作用〔4〕。本研究檢測垂體腺瘤中HIF-1α、CD147的表達，關注二者與血管內皮生長因子(VEGF)的關系，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年1月至2016年2月桂林醫學院第二附屬醫院進行手術治療并經病理證實為垂體腺瘤患者48例為觀察組，其中男23例，女25例，年齡40～76(平均58.6)歲。均符合世界衛生組織(WHO)中的診斷標準，患者臨床資料完整。其中侵襲性20例，非侵襲性28例。術前均行內分泌學檢查及術后免疫組化檢查分型，其中無功能型18例，有功能型30例(泌乳素腺瘤7例，生長激素腺瘤6例，卵泡刺激素腺瘤5例，促皮質激素腺瘤4例，促甲狀腺激素腺瘤3例，混合性腺瘤5例)。術前均未進行任何放、化療。6例尸檢中檢取的垂體(腺垂體)作為對照組，其中男3例，女3例，年齡45～64(平均51.3)歲。兩組性別、年齡無顯著差異(P>0.05)。

1.2 兩組HIF-1α、CD147和VEGF的檢測 組織常規取材后均應用石蠟包埋、切片，HIF-1α、CD147和VEGF的檢測應用免疫組化SP法，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，按說明書進行操作，做好質控工作。

1.3 HIF-1α、CD147和VEGF的判定 HIF-1α、CD147和VEGF的表達部位均為細胞質，以細胞質中出現棕黃色顆粒樣物質為陽性反應細胞。在低倍鏡下染色較為典型區域進行觀察，然后選擇5個400倍視野進行計數，取平均值，以陽性細胞≤5%為陰性，>5%為陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗及Pearson相關性分析。

2 結 果

2.1 兩組HIF-1α、CD147和VEGF陽性率比較 對照組HIF-1α、CD147均無表達。觀察組HIF-1α、CD147和VEGF陽性率明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組HIF-1α、CD147和VEGF陽性率比較〔n(%)〕

2.2 觀察組不同臨床特征中HIF-1α、CD147和VEGF陽性率比較 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達與侵襲性垂體腺瘤、Ki67的表達密切相關(均P<0.05)，而與是否為功能性腺瘤無關(均P>0.05)。見表2。

表2 觀察組不同臨床特征中HIF-1α、 CD147和VEGF陽性率的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達的相關性 觀察組HIF-1α和VEGF呈正相關(r=0.49,P=0.030 6)，CD147和VEGF呈正相關(r=0.46,P=0.042 3)。

3 討 論

垂體腺瘤是發生在蝶鞍的腫瘤，主要來源于腺垂體細胞。部分患者表現為侵襲性生物學行為，通常指突破包膜生長并侵犯鄰近結構的垂體腺瘤，常向鞍外生長，侵犯鄰近硬膜、顱骨、海綿竇和包繞頸內動脈。此種患者手術時的風險較高，術后復發率高〔5,6〕。垂體腺瘤形成過程涉及細胞增殖、血管生成的各個環節〔7〕。本研究結果提示HIF-1α、CD147和VEGF三種蛋白高表達是促進垂體腺瘤形成的重要促進因素，三者高表達時腫瘤呈侵襲性的狀態。三者高表達可以在一定程度上促進腫瘤細胞的增殖，這與三者均為腫瘤促進基因的特征性一致。HIF-1α、CD147均可以在一定程度上促進VEGF的表達，進而促進腫瘤間質的血管生成。HIF-1是由 HIF-1α 和 HIF-1β亞單位形成的異源性的二聚體，HIF-1α亞基是其活性單位， 與內環境中的低氧有關，也被稱為缺氧狀態時“缺氧基因表達的總開關”， HIF-1α可以對下游多個基因進行有效的調控，并與缺氧相關的反應結構域結合，誘發細胞的低氧反應，啟動靶基因的轉錄〔8,9〕。HIF-1α 可以促進間質血管的生成步驟：①血管發生階段：HIF-1α能通過合成一氧化氮引起血管擴張及增加血管壁的通透性；②進展階段：HIF-1α通過上調基質金屬蛋白酶進而誘導血管內皮細胞的增殖和遷移，形成出芽狀的新生血管；③形成階段：在 VEGF等血管生成因子的作用下，血管內皮細胞相互吻合成具有功能的血管腔，進而形成血管網；④塑形和改建階段：通過血小板生長因子等使血管平滑肌或其他細胞遷移包繞新生血管，同時形成基質，完善血管壁的功能〔10,11〕。而CD147在腫瘤形成中也具有促進作用，CD147包括細胞外N端2個C2型免疫球蛋白區、24個氨基酸殘基組成的跨膜區和C端39個氨基酸殘基組成的胞內區，相對分子量為58 kD，能和其他跨膜蛋白進行有效結合后形成復合物〔12,13〕。而CD147的胞內段在不同種屬中的保守程度非常高，其作為信號轉導的調節作用較強〔14〕。也有研究認為表皮生長因子受體中酪氨酸蛋白激酶啟動后可以誘導 CD147的表達〔15,16〕。 CD147表達的改變在RNA和蛋白質兩種水平上影響VEGF的產生，在體內實驗中，過表達CD147能刺激腫瘤血管生成和腫瘤生長，用反義RNA抑制 CD147表達，則二者都被抑制〔17〕。HIF-1α、CD147對間質血管生成的作用主要是通過誘導VEGF表達實現的。

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〔2017-03-16修回〕

(編輯 苑云杰)

2014年度廣西急診與醫學求援人才課題資歷項目(No.GXJZ201422)；2016年度廣西醫藥衛生自籌經費計劃課題項目(No.Z2016037)

嚴 峻(1978-)，男，博士，副主任醫師，主要從事神經外科研究。

李深譽(1984-)，男，碩士，主治醫師，主要從事神經外科研究。

R739

A

1005-9202(2017)11-2747-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.065