EAST—6特異性T淋巴細胞在結核性胸膜炎診斷中的研究

譚俊鋒

[摘要] 目的 分析EAST-6特異性T淋巴細胞在結核性胸膜炎診斷中的臨床價值。 方法 選取2014年8月～2016年7月我院收治的28例胸腔積液患者為研究對象，按照患者的皮膚結核菌素實驗結果，將其分為結核性胸膜炎組（16例）和腫瘤性胸膜炎組（12例），采用酶聯免疫斑點測定法（Elispot）對兩組患者胸腔積液及外周血中T淋巴細胞內早期分泌抗原靶蛋白6（EAST-6）進行檢測，并分析EAST-6對診斷結核性胸膜炎的應用價值。 結果 通過檢測發現，結核性胸膜炎組患者的胸腔積液及外周血中T淋巴細胞內EAST-6的陽性檢出率分別為87.5%及81.25%，均明顯高于腫瘤性胸膜炎組的8.33%及8.33%，差異有統計學意義（P<0.05）；胸腔積液中T淋巴細胞內EAST-6臨床診斷的特異度和敏感度分別為84.61%和93.33%，外周血中T淋巴細胞內EAST-6的臨床診斷的特異度和敏感度分別為78.57%和92.86%，EAST-6診斷結核性胸膜炎的特異度和敏感度較高。 結論 EAST-6特異性T淋巴細胞在結核性胸膜炎診斷中具有較高的特異性，為臨床診斷結核性胸膜炎提供參考依據。

[關鍵詞] EAST-6；結核性胸膜炎；診斷；臨床價值

[中圖分類號] R521.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）07-207-04

Study on EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy

TAN Junfeng

Department of Respiratory，Foshan Gaoming District People's Hospital， Foshan 528500，China

[Abstract] Objective To analyze the clinical value of EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy. Methods 28 patients with pleural effusion who were admitted to or hospital from August 2014 to July 2016 were selected as the research object.They were allocated to the tuberculous pleurisy group with 16 cases and the cancerous pleurisy group with 12 cases according to results of tuberculin skin tests.Enzyme linked immunospot assay （ELISPOT） were used to detect early secreting antigenic target-6（EAST-6） in T lymphocytes of pleural effusion and peripheral blood and to analyze the applicative value of EAST-6 in the diagnosis of tuberculous pleurisy. Results By testing，it is found that the positive rates of EAST-6 in T lymphocytes of pleural effusion and peripheral blood of patients with tuberculous pleurisy were respectively 87.5% and 81.25%，both significantly higher than those of the cancerous pleurisy group 8.33% and 8.33% （P<0.05）.The specificity and sensitivity of clinical diagnosis of EAST-6 in T lymphocytes of pleural effusion were respectively 84.61% and 93.33% while those of the peripheral blood were respectively 78.57% and 92.86%.In addition，specificity and sensitivity of EAST-6 in diagnosis of tuberculous pleurisy were higher. Conclusion EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy HAS high specificity and it can provide the reference for the clinical diagnosis of tuberculous pleurisy.

[Key words] Early secreting antigenic target-6；Tuberculous pleurisy；Diagnosis；Clinical value

結核性胸膜炎是由結核桿菌引起的胸膜炎癥，已成為臨床較為常見的結核病[1]，但由于目前缺乏對該病診斷的特異性指標，因此結核性胸膜炎的早期診斷和鑒別仍成為臨床研究的重點課題[2]。有研究報道，EAST-6為結核分枝桿菌感染早期分泌的蛋白，具有高度的特異性[3]，本院通過采用酶聯免疫斑點測定法對結核性胸膜炎患者胸水及外周血中T淋巴細胞內EAST-6進行檢測，取得較好的效果，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院于2014年8月～2016年7月期間收治的胸腔積液患者28例；對所有患者行超聲引導下胸膜活檢聯合胸水結核分歧桿菌培養[4]，并按照檢測結果將患者分為結核性胸膜炎組和腫瘤性胸膜炎組，病例數分別為16例和12例。結核性胸膜炎組男10例、女6例；年齡38～72歲，平均（44.6±5.3）歲；腫瘤性胸膜炎組男7例、女4例；年齡38～72歲，平均（44.7±5.1）歲；淋巴瘤伴胸膜轉移患者2例，肺癌伴胸行膜轉移患者5例，卵巢癌伴胸膜轉移1例，乳腺癌伴胸膜轉移3例，胃癌伴胸膜炎轉移1例。兩組患者年齡、性別比較差異無統計學意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2 研究方法

于清晨采集所有患者胸腔積液100mL，其中40mL用于常規生化指標檢驗，另60mL經每分鐘1800轉離心處理10min后，取底層沉渣進行涂片，經常規處理后，將涂片置于-38℃的冰箱中密封備用。另外于清晨采集所有患者外周靜脈血10mL，其中3mL用于生化指標檢測，另7mL經離心處理，分離外周血T淋巴細胞，并取2mL血清作為檢測樣本。對所有患者的胸腔積液及外周血進行常規生化指標檢測，采用酶聯免疫斑點測定法（Elispot）對兩組患者胸腔積液及外周血中T淋巴細胞內早期分泌抗原靶蛋白6（EAST-6）進行檢測，并分析EAST-6對診斷結核性胸膜炎的應用價值。

1.3 統計學處理

采用SPSS18.5軟件進行統計分析，計量資料采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組胸腔積液T淋巴細胞內EAST-6的陽性檢測比較

結核組和腫瘤組患者胸腔積液中T淋巴細胞內早期分泌抗原靶蛋白6（EAST-6）檢測出的陽性例數分別為14例和1例，陽性檢測率分別為87.5%、8.33%，經統計學分析，兩組差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 外周血T淋巴細胞內EAST-6的陽性檢測比較

結核組患者的外周血中T淋巴細胞內EAST-6的陽性例數為13例，檢出的陽性率為81.25%，而腫瘤組患者的外周血中T淋巴細胞內EAST-6的陽性例數為1例，檢出的陽性率為8.33%，經統計學分析，兩組差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 EAST-6的臨床診斷價值比較

胸腔積液中T淋巴細胞內EAST-6臨床診斷的特異度和敏感度分別為84.61%、93.33%，陽性預測值和陰性預測值分別為87.50%、91.67%，陽性似然比和陰性似然比分別為6.06、0.08，約登指數為0.77。而外周血中T淋巴細胞內EAST-6的臨床診斷特異度為78.57%，敏感度為92.86%，陽性預測值為81.25%，陰性預測值為91.67%，陽性似然比和陰性似然比分別為4.33和0.09，約登指數為0.77，經統計學分析差異無統計學意義（P>0.05），見表3，結果提示胸腔積液與外周血中T淋巴細胞內EAST-6在診斷結核性胸膜炎中的特異度和敏感度均較高。

2.4 兩組患者生化檢驗結果比較

對結核組和腫瘤組患者生化指標進行檢測，發現兩組患者在LDH及CEA等指標方面的差異有統計學意義（P<0.05），見表4。

3 討論

近年來，結核性胸膜炎已成為胸腔積液中較為常見的病因[5]，它是由結核菌及其代謝產物進入正處于高度過敏狀態的機體胸膜腔中所引起的胸膜炎癥[6-7]。當機體處于高度變態反應狀態，結核菌及其代謝產物侵入胸膜，則引起滲出性胸膜炎[8]。結核性胸膜炎病變早期表現為胸膜充血，血管通透

性改變，中性粒細胞浸潤，隨著病情進展，以淋巴細胞浸潤為主，胸膜表面有纖維素性滲出，繼而出現漿液滲出[9]。結核性胸膜炎感染的途徑有三個：肺內結核病變通過胸膜直接蔓延；結核分枝桿菌經肺門、縱隔淋巴結、淋巴管到達胸膜；通過血行播散到胸膜[10]。目前，臨床對于結核性胸膜炎的早期診斷主要通過胸膜活檢、胸腔積液檢驗、胸部CT檢查等檢查方法[11]，而胸膜活檢病理驗證和胸腔積液檢驗出結核分枝桿菌作為臨床診斷結核性胸膜炎的金標準因存在創傷性大、檢測陽性率低等缺點為結核性胸膜炎的早期診斷及治療帶來困難[12]。結核分枝桿菌是引起結核病的病原菌，當機體被該病菌感染后，機體會出現該病菌的抗原，而宿主免疫功能狀態不會對結核菌抗原的臨床檢驗造成干擾，因此，可將結核菌抗原作為結核分枝桿菌存在的依據[13]。

EAST-6即早期分泌抗原靶蛋白6，是結核分枝桿菌在感染早期分泌出的一種抗原，常存在于感染細胞的吞噬小體內，或者以游離的形式存在于培養基中[14]。有研究報道，早期分泌抗原靶蛋白6在感染的T淋巴細胞內生長時的表達較其在普通培養基生長時表達的水平明顯較高[15]，正因如此，檢測T淋巴細胞內早期分泌抗原靶蛋白6較檢測細胞外早期分泌抗原靶蛋白6的特異度會更高。本院通過對28例胸腔積液患者胸水中及外周血中T淋巴細胞內早期分泌抗原靶蛋白6進行研究發現，EAST-6特異性T淋巴細胞在結核性胸膜炎診斷中具有較高的特異度和敏感度。

研究發現，與腫瘤組患者比較，結核組患者胸腔積液中T淋巴細胞內EAST-6檢測的陽性病例數14例及陽性率87.0%均明顯較高；同時研究還發現結核組患者外周血中T淋巴細胞內EAST-6檢測的陽性例數為13例，陽性率為81.25%，明顯高于腫瘤組水平。結果提示，EAST-6在結核性胸膜炎中的表達較高。但在試驗中還發現，在胸腔積液和外周血中T淋巴細胞內EAST-6檢測陰性結果分別有2例和3例，可能是由于抗原陽性細胞數較少而導致的。

研究表明，胸腔積液與外周血中T淋巴細胞內EAST-6在診斷結核性胸膜炎中的特異度和敏感度均較高，特異度分別為84.61%和78.57%，敏感度分別為93.33%和92.86%。研究結果提示，EAST-6在結核性胸膜炎診斷中具有較高的臨床價值。

綜上所述，EAST-6特異性T淋巴細胞在結核性胸膜炎診斷中具有較高的特異性，對于臨床鑒別和診斷結核性胸膜炎提供參考依據。因此，EAST-6作為一項診斷結核性胸膜炎的新型技術具有較好的臨床應用價值[16]。由于本次研究的樣本量較少，研究結果可能與其他學者報道的不一致。在今后的工作中，本院會加大樣本量的搜集，進行深入探討。

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（收稿日期：2017-01-03）