微小RNA-146a在新生隱球菌、格特隱球菌誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞炎性反應(yīng)中的機(jī)制研究

王 妍， 高 睿， 陳 宏， 陳 歡， 金 怡，廖寧馨， 陳江漢

微小RNA-146a在新生隱球菌、格特隱球菌誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞炎性反應(yīng)中的機(jī)制研究

王 妍1， 高 睿1， 陳 宏1， 陳 歡2， 金 怡1，廖寧馨1， 陳江漢1

目的 觀察并分析微小RNA-146a （miR-146a）在新生隱球菌（標(biāo)準(zhǔn)株WM148）、格特隱球菌（標(biāo)準(zhǔn)株R265）刺激人單核巨噬細(xì)胞系（THP-1細(xì)胞）中表達(dá)的差異，探討miR-146a在隱球菌所致隱球菌腦膜炎中的調(diào)控作用及機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)的人單核巨噬細(xì)胞系THP-1細(xì)胞分成新生隱球菌誘導(dǎo)組、格特隱球菌誘導(dǎo)組，按滅活菌數(shù)∶THP-1=5∶1的比例與THP-1細(xì)胞共孵育0、3、6、9和12 h后離心收集上清液和細(xì)胞沉淀。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測各組細(xì)胞miR-146a的表達(dá)情況，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測各組上清液中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）的釋放量。結(jié)果 新生隱球菌誘導(dǎo)組細(xì)胞中miR-146a表達(dá)量與0 h相比明顯升高（P＜0.01），且在3 h達(dá)到峰值，隨后呈下降趨勢；上清液中TNF-α 的表達(dá)量在誘導(dǎo)后12 h達(dá)到最高值，IL-6的表達(dá)各時(shí)間點(diǎn)沒有明顯變化。格特隱球菌誘導(dǎo)后，miR-146a的表達(dá)逐漸升高，12 h達(dá)到最高值，但3 h、6 h 點(diǎn)變化與0 h比較差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；上清液中TNF-α的表達(dá)12 h到達(dá)峰值；IL-6的表達(dá)逐漸增加，12 h達(dá)到最高值，變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 新生隱球菌、格特隱球菌刺激THP-1細(xì)胞炎性反應(yīng)后，miR-146a表達(dá)隨時(shí)間延長呈現(xiàn)不同的規(guī)律，TNF-α、IL-6的動態(tài)變化表現(xiàn)不同的特點(diǎn)。研究表明新生隱球菌、格特隱球菌誘導(dǎo)THP-1炎性反應(yīng)可能存在不同的調(diào)控機(jī)制。

微小RNA-146a； 新生隱球菌； 格特隱球菌； THP-1細(xì)胞； 炎性反應(yīng)

中樞神經(jīng)系統(tǒng)的真菌感染，以隱球菌侵襲最為常見，致病性隱球菌多為新生隱球菌和格特隱球菌。……