云南84個(gè)玉米雜交種的SSR遺傳多樣性分析

胡德分，胡曉莉,2*，楊紹林，李 陽，吳 彬，趙自仙**，楊 久

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.隴川縣農(nóng)業(yè)局，云南 隴川 678700；3.開遠(yuǎn)市植檢植保站，云南 開遠(yuǎn) 661600；4.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所，云南 昆明 650205)

?

云南84個(gè)玉米雜交種的SSR遺傳多樣性分析

胡德分1，胡曉莉1,2*，楊紹林1，李 陽1，吳 彬3，趙自仙1**，楊 久4**

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.隴川縣農(nóng)業(yè)局，云南 隴川 678700；3.開遠(yuǎn)市植檢植保站，云南 開遠(yuǎn) 661600；4.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所，云南 昆明 650205)

【目的】通過對云南84個(gè)玉米雜交種的遺傳多樣性進(jìn)行分析，為云南玉米育種提供參考依據(jù)，提高育種效率。【方法】利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)和UPMGA方法對試驗(yàn)材料進(jìn)行分析?！窘Y(jié)果】篩選出均勻分布在玉米10條染色體上的61對SSR標(biāo)記引物對供試材料進(jìn)行SSR標(biāo)記，共檢測到622個(gè)等位基因變異，每對引物2～22個(gè)等位變異位點(diǎn)，平均為10.23個(gè)；每對引物的多態(tài)信息量(PIC)在 0.324～0.920，平均為0.779，相似系數(shù)在0.662～0.918；以0.745為界，將84份供試雜交種劃分為5大類群，以0.753為界，將類群Ⅰ劃分為4個(gè)亞群，84.5 %的雜交種均聚在類群Ⅰ?！窘Y(jié)論】試驗(yàn)表明云南玉米雜交種遺傳基礎(chǔ)較狹窄，雜交種間具有同質(zhì)化趨勢。

云南；玉米雜交種；SSR；遺傳多樣性

【研究意義】玉米屬于禾本科(Gramineae)玉蜀黍族(May,deae)，是典型的異花授粉作物，表現(xiàn)極端的近交衰退和雜種優(yōu)勢[1]。20世紀(jì)雜交種的出現(xiàn)是中國玉米生產(chǎn)的一次革命，是中國玉米產(chǎn)量大幅提升的關(guān)鍵因素。云南是全國15個(gè)玉米主產(chǎn)區(qū)之一，位于中國玉米帶的西南端[2]。地處低緯高原，海拔相差大，地勢錯(cuò)綜復(fù)雜，有高原、丘陵、盆地、山地及河谷，具有多樣的生態(tài)系統(tǒng)和豐富的小氣候帶。云南是國內(nèi)玉米地方種質(zhì)資源最豐富的省份，據(jù)2007年姚啟倫統(tǒng)計(jì)，云南地方種質(zhì)資源共1896份[3]。云南種植的玉米籽粒類型有硬粒型、半馬齒型、馬齒型、甜質(zhì)型、糯質(zhì)型、爆裂型和甜粉型7種[4]。2008年云南省玉米播種面積113.33萬hm2，首次超過水稻，成為云南省種植面積最大的糧食作物[5]；2013年云南玉米播種面積為150.51千hm2，在全國排列第9位，年總產(chǎn)量734.2萬t，在全國排列第10位，在西南6省(市、自治區(qū))中僅次于四川而位居第二，云南玉米生產(chǎn)對提高中國的玉米產(chǎn)量起著重要作用。遺傳多樣性(Genetic diversity)是生物多樣性的重要組成部分，又稱為基因多樣性，廣義指地球上生物所攜帶的各種遺傳信息的總和。狹義指種內(nèi)不同群體和個(gè)體間的遺傳多樣性的程度，或稱遺傳變異[6]。作物遺傳多樣性分析的方法，有形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化標(biāo)記等?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】Helentjaris于1986采用RFLP技術(shù)構(gòu)建了玉米第一張遺傳圖譜[7]。劉新芝等利用RAPD分子技術(shù)對17個(gè)玉米品種進(jìn)行類群的劃分，分子技術(shù)逐漸被廣泛用于遺傳多樣性分析。SSR標(biāo)記技術(shù)因具有多態(tài)性高、呈共顯性、對DNA質(zhì)量要求不高和重復(fù)性好、實(shí)驗(yàn)程序簡單等優(yōu)點(diǎn)，在遺傳多樣性研究中很受研究者的青睞，王春梅[8]利用SSR對貴州270份玉米地方種質(zhì)資源進(jìn)行標(biāo)記，采用UMPGA聚類劃分為6大類，與供試材料的地理來源和系譜一致，6大種質(zhì)類群各自與其代表系單獨(dú)成類。此外，對水稻、玉米、番茄等作物的研究表明，SSR標(biāo)記在檢測親緣關(guān)系較近的品種間表現(xiàn)出遺傳差異的效率高于RFLP、RAPD，且分類結(jié)果與系譜有較好的一致性[9-13]。了解并分析云南省玉米雜交種遺傳基礎(chǔ)，對云南省玉米種質(zhì)擴(kuò)增、改良和創(chuàng)新利用具有重要意義。李俊芳[14]研究表明，利用SSR技術(shù)對雜交種進(jìn)行聚類分析可以客觀地評價(jià)當(dāng)?shù)赜衩追N質(zhì)基礎(chǔ)的現(xiàn)狀?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】本研究采用SSR分子標(biāo)記技術(shù)，對云南省的84個(gè)玉米雜交種進(jìn)行遺傳多樣性分析和類群劃分。【擬解決的關(guān)鍵問題】明確云南省玉米雜交種的遺傳基礎(chǔ)，為云南省玉米育種提供參考，提高育種效率。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試材料84份基本情況見表1。其中編號1～58從云南玉米主要種植區(qū)收集(包括云南大面積種植的主推品種)，編號59～84是玉米新組合，由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院趙自仙老師提供。

表1 84份云南玉米雜交種

續(xù)表1 Continued table 1

材料編號No．材料名稱Name材料編號No．材料名稱Name材料編號No．材料名稱Name22正大81950云瑞6號7813正組?105×8323勝玉5號51西遼正交7913正組?11×124路單12號52西遼反交8013正組?108×8325紅單6號53珍禾2號8113正組?35×126同玉1154珍禾898213正組?107×8327鄂玉10號55正興5號8313正組?100×8328云優(yōu)10556珍禾998413正組?18×1

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 DNA的提取 室內(nèi)恒溫箱沙床培養(yǎng)玉米種子，待玉米生長到3葉1心時(shí)，每個(gè)雜交種平均取5株的新鮮葉片混合，參照Saghai-Maroof等[15](1984)提出的CTAB法，提取并純化基因組DNA，純化試劑為聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone，PVP)、β-巰基乙醇。

1.2.2 SSR引物篩選 結(jié)合玉米數(shù)據(jù)庫MaizeGDB已公布的1900對引物和前人的研究經(jīng)驗(yàn)，選擇120對引物，根據(jù)多態(tài)性高、重復(fù)性好、條帶豐富的原則篩選均勻分布于玉米10條染色體上的61對SSR標(biāo)記引物。引物由上海捷瑞生物有限公司合成，引物詳細(xì)信息見表2。

表2 61對SSR引物擴(kuò)增等位基因數(shù)及多態(tài)信息量

續(xù)表2 Continued table 2

SSR引物SSRPrimer圖譜位點(diǎn)Binnumber等位基因變異數(shù)NumberofvariantallelesPICSSR引物SSRprimer圖譜位點(diǎn)Binnumber等位基因變異數(shù)NumberofvariantallelesPICphi1091885．03150．874phi0316．0440．731phi0875．06110．846phi0786．0580．695phi0855．06110．806phi1236．0760．748umc11535．09100．786phi2998526．07100．841umc11436．0060．678phi0896．0870．798phi4237966．01120．718umc15457．00110．852等位基因變異數(shù)NumberofVariantAllelesPIC平均值10．230．779

1.2.3 PCR擴(kuò)增體系及程序 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體積為15 μl，其中模板DNA：1 μl；10×PCR buffer：1.5 μl；25 mM Mg2+：0.9 μl；10 mM dNTPs：0.3 μl；0.01mM Primer：0.6 μl；5 U/μlTaq酶：0.225 μl；ddH2O：9.875 μl，反應(yīng)成分均購于上海生工有限公司。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋旱谝徊?4 ℃預(yù)變性4 min；第二步94 ℃變性1 min，47～60 ℃引物與模板靶位點(diǎn)結(jié)合45 s，72 ℃延伸1 min，32個(gè)循環(huán)；第三步72 ℃延伸10 min；第四步4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測 配制8 %的非變性聚丙烯酰胺凝膠，產(chǎn)物與6×loading buffer混合，于50 W恒功率條件下，電泳1 h 30 min，分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。低速水平搖床上銀染顯色，其染色步驟為：ddH2O漂洗2次，30 s；0.2 %硝酸銀+10 %無水乙醇+1 %冰乙酸，固定染色10 min；ddH2O漂洗2次，30 s；1.5 %氫氧化鈉+2.5 %甲醛，顯色，直到條帶清晰停止；ddH2O漂洗1次，10 s；10 %冰乙酸固定10 min，ddH2O漂洗1次，照相。

1.2.5 SSR數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 每個(gè)條帶代表一個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)的一個(gè)等位基因，在相同遷移位置上，有帶記為“1”，無帶記為“0”，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。參照 Smith[16]所提出的公式計(jì)算 SSR 標(biāo)記位點(diǎn)的多態(tài)性信息量(Polymorphic Information Content，PIC=1-∑Pi2計(jì)算，Pi為i位點(diǎn)的基因頻率。SSR為共顯性標(biāo)記，以Jaccard系數(shù)計(jì)算雜交種間的遺傳相似系數(shù)(Genetic Similarity，GS)，即GS(jk)=a/(a+b+c)，其中a指的是j和k共有的位點(diǎn)數(shù)；b代表j有而k無的位點(diǎn)數(shù)；c指的是k有而j無的位點(diǎn)數(shù)[17]。利用 NTSYS-2.10 e和Excel 2013軟件，根據(jù)雜交種間SSR遺傳相似系數(shù)(GS)矩陣，按UPGMA(Unweighted Pair-group Method with Arithmetic Average )法進(jìn)行遺傳距離聚類分析，構(gòu)建UPGMA樹狀圖[18]。

2 結(jié)果與分析

2.1 基因組DNA的檢測

配制1 %的瓊脂糖檢測基因組DNA的質(zhì)量，檢測結(jié)果見圖1。挑選DNA檢測條帶亮、無拖尾的用于后續(xù)試驗(yàn)。

2.2 SSR標(biāo)記結(jié)果

對擴(kuò)增條帶(圖2)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，如表2所示，61對SSR引物對云南的84份玉米雜交種進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，共檢測到624個(gè)等位位點(diǎn)的變異，每對引物檢測到2～22個(gè)等位變異位點(diǎn)，平均為10.23個(gè)。每對引物的多態(tài)信息量(PIC)在 0.324～0.920，平均為0.779。引物phi374118的PIC值最小，為0.324；引物phi102228的PIC值最大，為0.920。84份玉米雜交種的相似系數(shù)在0.662～0.918，其中北玉16與安單3號遺傳距離最大，二者相似系數(shù)為0.662；西遼正交與西遼反交最為相似，相似系數(shù)達(dá)到了0.918。

2.3 聚類結(jié)果

采用NTSYS-2.10e軟件對云南省84份玉米雜交種聚類分析。聚類分析結(jié)果見表3，聚類樹狀圖見圖3。以相似系數(shù)0.745為界，84份玉米雜交種可劃分為5大類，類群Ⅰ包括71份材料，占供試材料的84.5 %，以 0.753為界，將Ⅰ類群又劃分為4個(gè)亞群，亞群Ⅰ-1有67個(gè)供試材料，占供試材料的79.8 %，占Ⅰ類群的94.4 %。云南省種植面積比較大的品種中，五谷1790、云瑞8號、云瑞6號、奧玉3202、云瑞999、珍禾2號、勝玉5號、紅單6號、正大819、長城799、會單4號、興黃單892、云瑞88、靖豐8號、勝玉2號、云優(yōu)105、安單3號、云瑞6號、保玉7號、正大615、珍禾99、足單707、中單808、迪卡2號等都集中在第Ⅰ類群，其中又以Ⅰ-1亞群最多，特別是目前云南種植面積最大、最有影響力的3個(gè)品種(會單4號、興黃單892、路單8號)，也在類群Ⅰ，表明它們的遺傳關(guān)系較近。

此外，26個(gè)玉米新組合有20個(gè)集中在Ⅰ-1亞群，占新組合總數(shù)的76.9 %。楚白單4號、鹽墨23聚在第Ⅳ類群；北玉20、北玉16號、海禾1號、海禾2號聚在第Ⅴ類群。大面積種植品種中，只有第Ⅳ、第Ⅴ類群的6個(gè)品種與第Ⅰ類群的遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)?？梢?，云南省現(xiàn)階段生產(chǎn)上種植的玉米雜交種和新育成的組合均具有較強(qiáng)的同質(zhì)化趨勢，云南玉米品種的遺傳基礎(chǔ)比較脆弱。

圖1 1 %瓊脂糖凝膠檢測DNAFig.1 DNA detected by 1 % agarose gel

3 討 論

采用SSR技術(shù)從分子水平分析玉米遺傳多樣性避免了環(huán)境因素對試驗(yàn)結(jié)果的影響，使試驗(yàn)結(jié)果更具可靠性。SSR 標(biāo)記檢測到的是一個(gè)單一的多等位變異基因位點(diǎn)，符合孟德爾遺傳規(guī)律[19]。因此，某對 SSR 引物可能是某個(gè)等位基因位點(diǎn)的特異標(biāo)記，根據(jù)特異性標(biāo)記可分析出種質(zhì)的遺傳多樣性。Smith和Russel等研究表明，分析親緣關(guān)系較近的品種間的遺傳差異，SSR標(biāo)記表現(xiàn)出遺傳差異的效率高于RAPD、RFLP[3]。本試驗(yàn)采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳通過銀染顯色檢測，該方法與變性聚丙烯酰胺凝膠相比，分辨率雖有所下降，但降低了試驗(yàn)成本與危險(xiǎn)性，且分辨率高于瓊脂糖凝膠，8 %的非變性聚丙烯酰胺凝膠能滿足玉米遺傳多樣性的分析研究。

第1幅圖從左往右為Marker，1～43，Marker，第25孔廢掉；第2幅圖從左往右為Marker，43～84，MarkerThe first fig from left to right is Marker, 1-43, Marker, and 25th is useless. The second fig from left to right is Marker, 43-84, Marker圖2 引物phi056電泳結(jié)果Fig.2 The electrophoresis of primer 056

類群Groups亞群Sub?groups材料名稱ThenameofmaterialsⅠⅠ?158：云單14號；48：安單3號；43：保玉7號；50：云瑞6號；83：13正組?100×83；80：13正組?108×83；82：13正組?107×83；79：13正組?11×1；64：13正組?101×83；70：13正組?46×36；62：13正組?104×83；78：13正組?105×83；72：13正組?89×83；74：13正組?93×83；61：13正組?97×83；31：路單8號；63：13正組?55×36；60：13正組?45×36；73：13正組?106×83；71：13正組?64×36；75：13正組?44×36；66：13正組?62×36；65：13正組?63×36；69：13正組?102×83；59：13正組?43×36；39：奧玉3202；56：珍禾99；47：云瑞999；54：珍禾89；53：珍禾2號；52：西遼反交；51：西遼正交；55：正興5號；46：家佳榮2號；27：鄂玉10號；26：同玉11；23：勝玉5號；28：云優(yōu)105；25：紅單6號；22：正大819；5：康農(nóng)玉901；44：YR12；45：云瑞8號；19：足單707；2：正紅311；30：楚玉1號；29：云瑞88；12：桂單0810；40：長城799；37：興黃單892；35：會單4號；6：中單808；7：迪卡2號；20：臨奧9號；3：天玉168；32：路單6號；1：資玉二號Ⅰ?213：昌隆98；14：雅玉88；16：靖豐8號；49：勝玉2號；17：丁單1號；38：五谷1790Ⅰ?34：雅玉78；21：正大615；18：金卡879；8：山州2011；9：雅玉719；10：田豐8號；24：路單12號Ⅰ?411：雅玉889Ⅱ57：13鑒57Ⅲ67：13正組?16×1；68：13正組?15×1；81：13正組?35×1；84：13正組?18×1Ⅳ15：楚白單4號；33：鹽墨23；76：13正組?278×262；77：13正組?277×262Ⅴ34：北玉20；41：海禾1號；42：海禾2號；36：北玉16號

圖3 84個(gè)玉米雜交種的UPGMA聚類結(jié)果Fig.3 UPGMA clustering dendrogram of 84 maize hybrids

對于云南玉米種質(zhì)多樣性的研究，主要集中在地方品種[3]、骨干自交系[20]及糯玉米[21]方面，有關(guān)云南玉米雜交種遺傳基礎(chǔ)的研究未見報(bào)道。分析云南省玉米雜交種的遺傳基礎(chǔ)，一定程度上能反應(yīng)出目前云南省玉米種質(zhì)的利用情況。本研究用61對SSR引物對84份玉米雜交種進(jìn)行分析得出，每對引物的PIC值平均為0.779，平均等位變異基因數(shù)為10.223，相似系數(shù)在0.662～0.918，等位變異數(shù)和PIC平均值遠(yuǎn)高于葛建镕等[22]對吉林省主推的44個(gè)玉米品種遺傳多樣性的研究結(jié)果(4.91個(gè)，0.689)，也高于姚啟倫等[23]對15個(gè)云南玉米群體平均等位變異數(shù)(6.3)和PIC平均值(0.77)，表明本研究篩選的SSR引物多態(tài)性好，供試的84份雜交種遺傳多樣性比吉林省的44個(gè)主推玉米品種和云南省的15個(gè)玉米群體豐富。

結(jié)合雜交種的系譜分析可知，雅玉719、雅玉889、雅玉88、雅玉78的母本相同，為7854，4個(gè)品種均聚在類群Ⅰ-2、Ⅰ-3；路單8號、會單4號的父本均為掖107，聚在類群Ⅰ-1；云瑞6號、云瑞8號、云瑞88的父本也相同，為YML107，3個(gè)品種聚在類群Ⅰ-1；北玉20、海禾1號、海禾2號、北玉16號均聚在類群Ⅴ；同父異母的多個(gè)新組合也聚在同一類群；西遼正交和西遼反交均聚在類群Ⅰ-1，且遺傳關(guān)系最近。說明用SSR分析方法，其衍生系品種及同父異母、同母異父的品種或組合均聚在同一類群，表明本研究的SSR分析結(jié)果與系譜高度一致，結(jié)果可靠。

然而，84個(gè)供試材料中，84.5 %的雜交種(其中包括云南種植面積最大的3個(gè)品種會單4號、興黃單892、路單8號)均聚在類群Ⅰ，推廣品種中只有楚白單4號、鹽墨23、北玉20、北玉16號、海禾1號、海禾2號6個(gè)品種被劃分在其它類群，說明云南種植玉米雜交種的遺傳基礎(chǔ)比較狹窄，同質(zhì)性較嚴(yán)重。

4 結(jié) 論

利用SSR分子標(biāo)記對玉米種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性分析，結(jié)果與系譜基本一致。研究結(jié)果表明，云南省廣泛種植的玉米雜交種和新育成的組合具有豐富的多態(tài)性，但相互的遺傳距離偏低，具有較強(qiáng)的同質(zhì)化趨勢，遺傳基礎(chǔ)比較脆弱，影響著云南省玉米產(chǎn)量的持續(xù)穩(wěn)定及提高。加強(qiáng)外來玉米種質(zhì)的引進(jìn)、利用，充分挖掘地方種質(zhì)資源，進(jìn)行種質(zhì)擴(kuò)增、改良和創(chuàng)新，創(chuàng)建新的玉米雜種優(yōu)勢模式，是今后云南省玉米育種的重要方向。

[1]曾三省.中國玉米雜交種的種質(zhì)基礎(chǔ)[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),1990,23 (4):1-9.

[2]高建凱.中國15個(gè)主產(chǎn)省區(qū)玉米生產(chǎn)技術(shù)效率研究[J].西部論壇,2013,23(6):69-75.

[3]姚啟倫.西南部分玉米地方種質(zhì)資源的遺傳多樣性分析[D].成都:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2007:23-25.

[4]伍少云,孫 榮,奉有壁.云南省玉米地方種質(zhì)資源類型及其品種的地理和生態(tài)分布[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2004, 17(Z1):1-6.

[5]尹 梅,洪麗芳,付利波,等.營養(yǎng)調(diào)控措施對云南玉米生產(chǎn)的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,24(4):1381-1385.

[6]朱有勇.農(nóng)業(yè)生物多樣性與作物病蟲害控制[M].北京:科學(xué)出版社,2013:20-26.

[7]T. Helentjaris, M. Slocum, S. Wright, et al. Construction of genetic linkage maps in maize and tomato using restriction fragment length polymorphisms[J]. Theoretical and Applied Genetics, 1986, 72(6): 761-769.

[8]王春梅,任 洪,王 竹,等.貴州玉米種質(zhì)資源遺傳多樣性及核心種質(zhì)庫構(gòu)建[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2016,29(5):1018-1022.

[9]杜金友,黎 裕,王天宇,等.SSR和AFLP分析玉米遺傳多樣性的研究[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào),2003,18(1):59-63.

[10]袁力行,傅駿驊,Warburton M,等.利用RFLP、SSR、AFLP和RAPD標(biāo)記分析玉米自交系遺傳多樣性的比較研究[J].遺傳學(xué)報(bào),2000,27(8):725-733.

[11]李 莉,楊劍波, D. J. Mackill, 等.RAPD和SSR標(biāo)記對不同樣點(diǎn)(產(chǎn)地)水稻品種分析的比較[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2000，28(2):129-131.

[12]Meng F J, Xu X Y, Huang F L, et al. Analysis of genetic diversity in cultivated and wild tomato varieties in Chinese market by RAPD and SSR[J]. Agricultural Sciences in China, 2010, 9(10): 1430-1437.

[13]伍 豪，劉百龍，王威豪,等.廣西生產(chǎn)上主要應(yīng)用的三系雜交稻不育系遺傳多樣性分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2015,46(4):550-554.

[14]李俊芳,孫世賢,王守才.國家玉米主產(chǎn)區(qū)預(yù)試品種的SSR分析Ⅱ.預(yù)試品種的遺傳多樣性[J].玉米科學(xué),2007,15(1):16-20.

[15]Saghai-Maroof M A, Soliman K M, Jorgensen R A. Ribosomal DNA spacer-length polymorphisms in barely: mendelian inheritance, chromosomal location, and population dynamics[J]. Proceedings of National Academy of Science of USA, 1984, 81(24): 8014-8018.

[16]Smith J S C, Chin E C L, Chin H, et al. An evaluation of the utility of SSR loci as molecular markers in maize(ZeamaysL.): comparison with data from RFLPs and pedigree[J]. Theoretical and Applied Genetics, 1997, 95(1-2): 163-173.

[17]段運(yùn)平,陳衛(wèi)國,李明順,等.利用SSR標(biāo)記分析27個(gè)玉米群體的遺傳關(guān)系[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,39(6):1102-1114.

[18]胡俏強(qiáng),張曉林,陳舜權(quán),等.92份甜玉米自交系的SSR遺傳多樣性分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013,29(5):967-973.

[19]張 莉.利用SSR標(biāo)記分析玉米群體豫綜5號的遺傳多樣性[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:11-13.

[20]張建華,張金渝,楊曉洪,等.利用SSR標(biāo)記研究云南玉米骨干自交系的親緣關(guān)系[J].玉米科學(xué),2007,15(3):30-35.

[21]劉永建.利用SSR標(biāo)記研究西南糯玉米種質(zhì)資源的遺傳多樣性[D].成都:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2002:1-4.

[22]葛建殫,劉曉鑫,易紅梅,等.吉林省42份主推玉米雜交種的遺傳分析[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù),2008,28(5):37-42.

[23]姚啟倫,楊克誠,潘光堂,等.云南和貴州玉米地方品種遺傳多樣性的比較分析[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,30(4):408-414.

(責(zé)任編輯 王家銀)

Genetic Diversity of 84 Maize Hybrids Based on SSR Markers in Yunnan

HU De-fen1, HU Xiao-li1,2*, YANG Shao-lin1, LI Yang1, WU Bin3, ZHAO Zi-xian1**, YANG Jiu4**

(1.College of Agronomy and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, Yunnan Kunming 650201, China; 2.Agricultural Bureau of Longchuan County, Yunnan Longchun 678700, China; 3.Kaiyuan Plant Quarantine and Protection Station, Yunnan Kaiyuan 661600, China; 4.Institute of Food Crops, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Yunnan Kunming 650205, China)

【Objective】The objective of this study is to provide the reference, and to improve efficiency for Yunnan maize breeding through the analysis of genetic diversities of 84 maize hybrids in Yunnan. 【Method】The test materials were analyzed by SSR markers and UPMGA method. 【Result】61 pairs of primers which are uniformly distributed on 10 maize chromosomes were screened, totally 622 allelic variations were detected from the experimental materials by 8 % non-denaturing polyacrylamide gel and silver staining. Each primer pair amplified 2-22 variant alleles, with an average of 10.23. The polymorphism information content (PIC) values varied from 0.324 to 0.920, with an average of 0.779, and the genetic similarities were from 0.662 to 0.918. 84 hybrids were classified into five groups according to their genetic similarity by bounded coefficient of 0.745, and the group one could be subdivided into 4 sub-groups by bounded coefficient of 0.753 using UPMGA method, among which hybrids belonged to group one occupying 84.5 %. 【Conclusion】The results show that the genetic basis of Yunnan maize hybrids is relatively narrow, and there is homogeneity trend exist among hybrids.

Yunnan; Maize hybrids; SSR; Genetic diversity

1001-4829(2017)7-1488-07

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.004

2015-12-06

云南省技術(shù)創(chuàng)新人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2011CI061)；云南農(nóng)業(yè)大學(xué)百名人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2012PY03)；云南農(nóng)業(yè)大學(xué)博士啟動基金項(xiàng)目(A2002276)

胡德分(1991-)，女，云南鹽津人，碩士，主要從事玉米種質(zhì)創(chuàng)新及利用研究，E-mail:18213589618@163.com。*為共同第一作者， E-mail: 1031742835@qq.com,**為通訊作者：趙自仙，E-mail:zhaozix@126.com，楊 久，E-mail: yaas2003@163.com。

S513

A