蘇姜豬血清HSL、MDH活性變化規律的研究

陶 勇，任善茂，倪黎綱，張君勝，周春寶，趙旭庭，經榮斌

(1.江蘇農牧科技職業學院，江蘇 泰州 225300；2.揚州大學動物科學與技術學院，江蘇 揚州 225009)

?

蘇姜豬血清HSL、MDH活性變化規律的研究

陶 勇1，任善茂1，倪黎綱1，張君勝1，周春寶1，趙旭庭1，經榮斌2

(1.江蘇農牧科技職業學院，江蘇 泰州 225300；2.揚州大學動物科學與技術學院，江蘇 揚州 225009)

【目的】探討蘇姜豬激素敏感酯酶(HSL)和蘋果酸脫氫酶(MDH)的變化規律。【方法】本試驗采用酶聯免疫法測定了70頭不同月齡、公母各半、健康無病的蘇姜豬血清HSL和MDH活性。【結果】①蘇姜豬血清HSL活力在不同月齡之間、同一月齡不同性別之間的差異均較大，2月齡達到高峰(9.05 U/mL)，繼而開始下降，4月齡達到最低值(7.08 U/mL)，然后再次回升。②蘇姜豬血清MDH活性在2月底達到最低值(518.17 mU/mL)，然后逐漸上升。6月齡MDH活力與其他月齡間差異均極顯著(P<0.01)，5月齡與3月齡間差異極顯著(P<0.01)。相同月齡不同性別之間血清MDH活性變化差異較大，但總體變化趨勢一致。試驗結果需要在今后的生產及試驗過程中加以驗證。【結論】血清HSL活性先上升，在2月齡時達到高峰，然后開始下降，4月齡達到最低值后再次回升。血清MDH活性總體呈現出逐漸升高的趨勢。

蘇姜豬；激素敏感酯酶；蘋果酸脫氫酶；變化規律

【研究意義】激素敏感酯酶(Hormone-sensitive lipase，HSL)是細胞中脂肪分解的限速酶，在能量平衡調控過程中起著重要的作用，能夠降解甘油三酯、膽固醇酯、其他脂質及水溶性底物，產生甘油和脂肪酸[1-2]。蘋果酸脫氫酶(Malate dehydrogenase，MDH)是生物糖代謝的關鍵酶之一，在細胞多種生理活動中起著非常重要的作用，能夠催化蘋果酸與草酰乙酸之間的可逆轉換[3]。【前人研究進展】Kazala等對牛的研究結果表明，HSL水平與肌內脂肪含量和大理石紋存在相關，并建議將其作為早期選種的一個指標[4]。王倩等研究發現，在生長期隨著體重的增加，野豬與杜洛克雜交F1代豬HSL活性均顯著地高于萊蕪黑豬的活性(P<0.05，90 kg除外)，且在35 kg時，野杜F1代豬和萊蕪黑豬差異極顯著(P<0.01)[5]。Stelmanska等研究結果證明，在豬脂肪組織中MDH從35 kg體重時開始下降，到屠宰時活性降到最低點[6]。楊海玲等研究結果表明，萊蕪黑豬肌肉組織中的MDH與肌內脂肪呈極顯著正相關(P<0.01)[7]。以上研究表明，HSL和MDH在動物體內脂質、能量代謝中發揮著關鍵作用，但關于這兩種脂肪代謝酶在蘇姜豬組織中的發育性變化的研究卻鮮有報道。【本研究切入點】鑒于此，本試驗研究了蘇姜豬血清中HSL、MDH 2種酶活性隨著年齡的變化規律。【擬解決的關鍵問題】為改善蘇姜豬肌肉風味、提高營養品質、開展持續選育及生產管理提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗豬選擇

試驗用蘇姜豬由江蘇蘇姜種豬有限公司提供，分別選擇初生、1月齡、2月齡、3月齡、4月齡、5月齡、6月齡，發育良好、健康無病的蘇姜豬各10頭，公母各半。所有試驗豬進行常規飼養管理，每天喂料2次，自由飲水。

1.2 測定項目與方法

在相應日齡上午，每頭試驗豬空腹采集5 mL血液，制備血清，-20 ℃保存備用。血清激素敏感酯酶、蘋果酸脫氫酶活性由上海常斤生物科技有限公司采用酶聯免疫法檢測。

1.3 統計分析方法

所有數據采用SPSS13.0進行統計分析，多重比較采用Duncan氏法，分析結果以平均值±標準誤表示。

2 結果與分析

2.1 蘇姜豬血清HSL活性變化規律

不同月齡蘇姜豬HSL活力不同(表1)，其中4月齡活力最低，2月齡活力最高。蘇姜豬血清HSL活力2月齡出現高峰，然后開始下降，4月齡達到最低值后再次回升。統計分析表明，3月齡間與4、5月齡間HSL活力差異均極顯著(P<0.01)，4月齡與初生、1月齡間差異極顯著(P<0.01)，4月齡與2、6月齡間差異顯著(P<0.05)，2月齡與5、6月齡間差異顯著(P<0.05)，3月齡與6月齡間差異顯著(P<0.05)，其余各月齡間差異均不顯著(P>0.05)。

相同月齡蘇姜豬公母間血清HSL活性變化差異較大，但在3月齡之后變化趨勢基本一致，在4月齡達到最低值(表2)。蘇姜豬公母豬血清HSL活性除了4月齡之間差異不顯著外，其余各月齡間差異均達到了顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)水平。

表1 不同月齡蘇姜豬HSL、MDH活力

表2 相同月齡不同性別蘇姜豬血清HSL、MDH活力

2.2 蘇姜豬MDH活性變化規律

不同月齡蘇姜豬血清MDH活力不同，其中2月齡活力最低，6月齡活力最高(表1)。蘇姜豬血清MDH活力在2月底達到最低值，然后緩慢上升。統計分析表明，6月齡MDH活力與其他月齡間差異均極顯著(P<0.01)，5月齡與3月齡間差異極顯著(P<0.01)，其余各月齡間差異均不顯著(P>0.05)。

相同月齡蘇姜豬公母間血清MDH活性變化差異較大，但在2月齡之后的總體變化趨勢是一致的(表2)。蘇姜豬血清MDH活性在初生、2月齡、4月齡、5月齡公母間差異均達到了極顯著(P<0.01)水平，其余月齡間差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 蘇姜豬HSL活性變化規律

脂肪是有機體的重要的能量貯備物質，機體許多生理功能的正常發揮離不開脂肪的協同作用，但是如果機體攝入過多的脂肪，就會導致與肥胖有關疾病的產生。激素敏感酯酶(Hormone-sensitive lipase，HSL)，又稱作甘油三酯脂肪酶，是脂肪分解過程中的限速酶，能夠水解甘油三酯成甘油和脂肪酸以滿足機體的需要，其活性的高低對動物脂肪的沉積具有重要的影響[8]。蘇姜豬雖然含有姜曲海豬、楓涇豬等地方豬血統，但它是一個經過長期繼代選育而成的瘦肉型新豬種[9]，因而可以推測蘇姜豬具有較強的脂肪分解能力。本試驗中，蘇姜豬在3月齡左右時血清HSL活性達到最高值，然后緩慢降低，在4月齡時達到最低值(7.08 U/mL)，這是否預示著蘇姜豬在早期能夠有效地水解甘油三酯，釋放出脂肪酸滿足機體新陳代謝的需要。另外，蘇姜豬母豬血清HSL活性在1月齡時還有一個高峰值(9.68 U/mL)，這可能與樣本量較少有關系，需要進一步進行試驗驗證。

3.2 蘇姜豬MDH活力變化規律

蘋果酸脫氫酶(Malate dehydrogenase，MDH)是生物體三羧酶循環中的一個重要的氧化還原酶，廣泛存在于動植物、細菌等生物體中，其活性提高表示細胞內有氧氧化能力的提高。馬蘭等[10]研究表明，藏羚羊骨骼肌中MDH 活性顯著高于藏綿羊和綿羊，說明藏羚羊盡管生活在高寒缺氧地區，但是其骨骼肌細胞仍然能得到豐富的氧供應，有氧代謝比例高，并非處于缺氧狀態。本試驗中，蘇姜豬血清MDH活性在整個測試階段呈現逐漸上升的趨勢，說明蘇姜豬機體內有氧代謝的能力隨著日齡增加而逐漸增強，能夠滿足日益增加的生長需要。而蘇姜母豬在初生至2月齡間，血清MDH活性有個下降過程(最低值483.10 mU/mL)，這是否預示著蘇姜豬母仔豬在早期生長速度比公仔豬慢，這需要在生產中進行驗證。

4 結 論

綜上所述，蘇姜豬血清HSL、MDH活性隨著月齡的增長而表現出一定的規律。血清HSL活性先上升，在2月齡時達到高峰，然后開始下降，4月齡達到最低值后再次回升。血清MDH活性總體呈現出逐漸升高的趨勢。這些規律可能與蘇姜豬含有姜曲海豬、楓涇豬等地方豬血統相關，需要在今后的生產及試驗過程中加以驗證。

[1]王詠波，陳璐璐. 激素敏感性脂肪酶研究新進展[J]. 中華糖尿病雜志，2005，13(2)：154-156.

[2]強巴央宗，商 鵬，楊 濤，等. 藏豬激素敏感脂肪酶(HSL)基因遺傳多樣性分析[J]. 西南農業學報，2012，25(5)：1904-1906.

[3]汪新穎，王 波，侯松濤，等. 蘋果酸脫氫酶的結構與功能[J]. 生物學雜志，2009，26(4)：69-72.

[4]Kazala E C, Jennifer L P, Fred J L, et al. Hormone-sensitive lipase activity in relation to fat content of muscle in Wagyu hybrid cattle[J]. Livestock Production Sci, 2003, 79: 87-96.

[5]王 倩，尹遜河，王元虎，等. 長白山野豬與杜洛克豬雜交1代豬肌內脂肪代謝酶HSL和MDH活性的發育性變化規律及其對肌內脂肪沉積影響的影響[J]. 中國畜牧獸醫，2013，40(2)：121-124.

[6]Stelmanska E, Korczynska J, Swierczynski J. Tissue-specific effect of reseeding after short and long term caloric restriction on malice enzyme gene expression in rat tissues[J]. Department of Biochemistry, 2004, 51(3): 805-814.

[7]楊海玲，曾勇慶，魏述東，等. 萊蕪豬脂肪代謝酶活性的發育性變化及其對肌內脂肪沉積的影響[J]. 畜牧獸醫學報, 2005, 36(11): 1150-1154.

[8]羅建學，蘭玉倩，楊桂秀，等. 激素敏感脂肪酶基因研究進展[J]. 生物技術世界，2015(3)：189-190.

[9]倪黎綱，趙旭庭，朱淑斌，等. 蘇姜豬雜交配合力測定與分析[J]. 西南農業學報，2015，28(5)：2255-2258.

[10]馬 蘭，楊應忠，格日力. 藏羚羊骨骼肌肌紅蛋白含量及乳酸脫酶、蘋果酸脫氫酶活力的研究[J]. 中國應用生理學雜志，2012，28(2)：118-121.

(責任編輯 陳 虹)

Study on Change Rules of HSL and MDH Activity in Serum of Sujiang Pig

TAO Yong1, REN Shan-mao1, NI Li-gang1, ZHANG Jun-sheng1, ZHOU Chun-bao1, ZHAO Xu-ting1, JING Rong-bin2

(1.Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Jiangsu Taizhou 225300, China;2.College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Jiangsu Yangzhou 225009, China)

【Objective】The present study was conducted to explore the change rules of HSL and MDH. 【Method】70 heads of different month and health Sujiang pigs were selected，and the activities of HSL and MDH in serum were analyzed with ELISA. 【Result】(i) The difference of HSL activity in serum of Sujiang pigs between different months, different sexes in same age, were bigger, which reached the peak (9.05 U/mL) at the second month and then began to decline, reached the lowest value (7.08 U/mL) at the fourth month and then went up again. (ii) The activity of MDH in serum of Sujiang pig declined the lowest value (518.17 mU/mL) at the second month, and then gradually increased. The differences of MDH activities between the sixth month and other months were very significant (P<0.01), and that was also very significant between the fifth month and the third month (P<0.01). The difference of MDH activity was larger between different sexes at the same month, but the overall change trend was consistent.【Conclusion】Therefore, the activity of serum HSL firstly increased, reached the peak at the 2ndmonth, then began to decline, and finally recovered again after reaching the lowest value at the 4thmonth. The activity of serum MDH showed a gradually upward trend.

Sujiang pig; Hormone-sensitive lipase; Malate dehydrogenase; Change rule

1001-4829(2017)7-1672-03

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.036

2016-07-10

江蘇省農業三新工程項目(SXGC[2015]303)；江蘇農牧科技職業學院重點資助課題(NSFZD1401)

陶 勇(1975-)，男，博士，副教授，主要研究方向為地方豬品種遺傳資源的保護、開發與利用，E-mail：tyrsm1975tt@126.com。

S828

A