尿CD80在兒童微小病變腎病與局灶節(jié)段腎小球硬化中的研究

饒興愉　胡超華　羅開源

[摘要]目的 探析尿CD80檢驗在兒童微小病變腎病（MCD）與局灶節(jié)段腎小球硬化（FSGS）中的臨床應用價值。方法 選擇2014年10月～2016年12月我院所收治的30例MCD患兒為本次研究的MCD組，選同期我院收治的30例FSGS患兒為本次研究的FSGS組，另選同期來我院體檢的30例健康兒童為本次研究的對照組。對三組患兒尿CD80檢驗結果進行對比。結果 在尿CD80水平上，觀察組顯著高于對照組（P<0.05），并且MCD發(fā)作期與緩解期患兒在尿CD80上差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而MCD初治患兒及FSGS患兒比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結論 尿CD80在微小病變腎病與局灶節(jié)段腎小球硬化患兒體內(nèi)的含量有較大差異，因此可作為兩種疾病的鑒別方式。

[關鍵詞]尿CD80；微小病變腎病；局灶節(jié)段腎小球硬化

[中圖分類號] R726.92 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）07（b）-0079-03

[Abstract]Objective To analyze the clinical application value of urine CD80 test in the minimal change disease （MCD） and focal segmental glomerulosclerosis （FSGS） in children.Methods 30 children with MCD in our hospital from October 2014 to December 2016 were selected for this study，30 children with FSGS were selected for the study，30 healthy children were selected for the study in the same period.The results of CD80 test in three groups were compared.Results In the urine CD80 level，the observation group was significantly higher than that of the control group （P<0.05） there was statistically significant difference between the children with stage of onset and remittent of MCD；and there was no statistically significant difference between the stage of attack and catabatic period children （P>0.05）.Conclusion The content of urine CD80 in the children with tiny nephropathy and reversible focal renal glomerulus sclerosis can be used as the identification of two diseases.

[Key words]Urinary CD80；Minimal change disease；Focal segmental glomerulosclerosis

兒童微小病變腎病（minimal change disease，MCD）及局灶節(jié)段腎小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis，F(xiàn)SGS）為兒童期原發(fā)腎病綜合征兩種常見的病理類型[1]。多數(shù)MCD患兒對激素治療敏感，預后較好，但同時存在10%～20%的患兒呈現(xiàn)激素耐藥，而FSGS多呈現(xiàn)激素耐藥，且預后較差，常進展至終末期腎病（end-stage renal disease，ESRD）[2]。兩種疾病臨床表現(xiàn)較為相似，但其治療與預后有極大不同。有鑒于此，應當及時明確病理類型并選擇恰當?shù)闹委煼桨福愿纳圃摬〉念A后[3]。本次研究選擇我院近年所收治患兒為對象，通過對其尿CD80進行檢測，以觀察其在兩種疾病鑒別中的應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2014年10月～2016年12月我院所收治的30例MCD患兒為本次研究的MCD組，選同期收治的30例FSGS患兒為本次研究的FSGS組，另選同期來我院體檢的30例健康兒童為本次研究的對照組，病理分型及臨床標準符合中華醫(yī)學會兒科學分會腎臟病學組制定標準。對照組：男16例，女14例；年齡2～8歲，平均年齡（5.2±1.3）歲。MCD組：男15例，女15例；年齡2～9歲，平均年齡（5.3±1.2）歲。FSGS組：男16例，女14例；年齡2～9歲，平均年齡（5.4±1.1）歲。三組患兒在一般資料上差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2納入及排除標準

1.2.1納入標準 所有MCD組和FSGS組患兒皆經(jīng)腎穿刺病理（光鏡、免疫病理、電鏡）明確診斷；均為同一時期入院；患兒家長均對本次研究知情且自愿簽署同意書；均經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準認可。

1.2.2排除標準 存在肝腎功能不全者；合并血液類或其他全身性疾病者；檢測期間患兒或家屬不給予配合者。

1.3方法

用ELISA方法測定MCD組發(fā)作期及緩解期患兒尿CD80；測定FSGS組患兒尿CD80，在MCD組初治患兒和FSGS組患兒使用免疫抑制劑或是激素治療前，對其進行標本采集。分析MCD組和FSGS組患兒尿CD80的不同。同時測定30例門診體檢的對照組兒童尿CD80（留取晨新鮮中段尿標本，-80℃冰箱儲存，不超過1個月）。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

在尿CD80水平上，MCD組顯著高于對照組與FSGS組，差異有統(tǒng)計學意義（F=19.987，P=0.000）；MCD組初治患兒及FSGS組患兒尿CD80檢測結果比較，差異無統(tǒng)計學意義（t=0.771，P=0.585）；MCD組發(fā)作期及緩解期患兒尿CD80檢測結果比較，差異有統(tǒng)計學意義（t=18.221，P=0.000）（表1）。

3討論

MCD是目前導致兒童原發(fā)性腎病綜合征的首要原因，F(xiàn)SGS是第二位的原因。MCD和FSGS治療效果不同，預后不同，目前主要通過有創(chuàng)性的腎穿檢查來鑒別這兩種病理類型，但該項技術屬有創(chuàng)性檢查，部分家長及患兒擔憂其副作用而拒絕行該項檢查，從而給臨床中該類病的及時診療帶來了不小的困難，且該項技術存在一定的漏診率[4]。因此，目前急需一種無創(chuàng)性的診斷方法來及時區(qū)別兩種病理類型，進而指導該病的診斷及治療，起到降低慢性腎功能不全及終末腎衰竭發(fā)生率的作用[5]。經(jīng)文獻檢索，國內(nèi)尚無CD80在兒童腎病綜合征中的研究報道。本研究通過測定尿CD80含量來鑒別MCD及FSGS，測定尿CD80作為生物標志物區(qū)分兩種病理類型的敏感性及準確度，進而對該項試驗應用于臨床的可行性進行分析，以提供簡便、無創(chuàng)、重復性好的方法來及時協(xié)助判斷腎病綜合征的病理類型，節(jié)約治療成本，減輕患者痛苦。

本實驗通過ELISA方法檢測MCD及FSGS患兒及正常對照兒童的尿液CD80含量，探討應用尿CD80鑒別MCD和FSGS臨床應用的可行性，由本次研究可知，在尿CD80水平上，MCD組及FSGS組均著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；且MCD組較FSGS組有明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。據(jù)相關研究統(tǒng)計[5]，MCD的發(fā)病率占原發(fā)性腎病綜合征的1/4，而且近幾年的發(fā)病率有所上升。在諸多腎病綜合征，F(xiàn)SGS屬于臨床上比較常見的一種。據(jù)相關統(tǒng)計報道[6]，由FSGS發(fā)展而成的終末期腎病該約占全部終末期腎病的3.5%。在臨床上，F(xiàn)SGS最為突出的表現(xiàn)便是蛋白尿以及足細胞損傷。其中，足細胞屬于上皮細胞的一種，位于腎小球囊腔與基底膜之間，呈高度分化狀態(tài)，在維持腎小球過濾方面發(fā)揮著不可替代的作用。現(xiàn)階段的臨床醫(yī)學普遍認為足細胞損傷是促成FSGS發(fā)生與發(fā)展的中心環(huán)節(jié)及始動因素，而蛋白尿則在其中起到了推波助瀾的關鍵作用[7]。MCD患兒在臨床上最為常見的表現(xiàn)同樣是大量的蛋白尿，其腎活檢的臨床病理特點為：腎小球足細胞的足突呈融合趨勢、免疫熒光檢測呈陰性、有輕微光鏡病變等。在本次研究中MCD發(fā)作期及緩解期患兒在尿CD80上有明顯差異（P<0.05），而MCD初治患兒及FSGS患兒無明顯差異（P>0.05）。由此可知，F(xiàn)SGS以及MCD在臨床表現(xiàn)以及活檢結果上具有部分相似性，并且病理活檢技術屬有創(chuàng)性檢查，部分家長及患兒擔憂其副作用而拒絕行該項檢查，這對于兩種疾病診斷與治療而言是極為不利的。在臨床上，由于腎活檢所取腎組織的局限性，一些初次腎活檢診斷為MCD的患者，因持續(xù)不緩解行重復腎活檢病理結果為FSGS。相比于MCD，F(xiàn)SGS患者的腎功能下降更為明顯，這也意味著其預后更差，患者不得不采取替代治療，延誤了最佳治療時機[8]。

目前已有較多學者認為CD80的水平變化可能與MCD相關。本研究通過對三組兒童進行尿CD80檢測，以驗證非創(chuàng)手段在鑒別MCD和FSGS中的效果。CD80也被稱之為B7-1，其分子量為44 kD，為免疫球蛋白的一種，是表達于抗原呈遞細胞（APCs）、B細胞及自然殺傷細胞（NKC）表面的跨膜蛋白。該物質(zhì)作為共刺激因子的一種，在人體的免疫系統(tǒng)中發(fā)揮不可忽視的作用。國內(nèi)有研究已經(jīng)證實將小鼠暴露于磷酸脂多糖環(huán)境下，CD80也可表達于腎臟足細胞和近曲小管[9]。并且有研究指出[10]，通過實施免疫熒光染色檢查，得知尿液中的CD80確實來自于足細胞，這也充分證明了CD80表達于腎小球足細胞觀點的準確性。實際上，足細胞由于自身位置的特殊性，使得其成為腎小球濾過的重要支持物質(zhì)。其足突上的肌動蛋白具有較強的流動性，通過與足突間的裂孔隔膜進行聯(lián)合，構成了蛋白尿濾過的最后一道屏障，這種流動性蛋白對于維持腎小球濾過功能至關重要，因此足細胞的損傷亦會在一定程度上導致蛋白尿的發(fā)生。當足細胞表面的CD80表達上調(diào)時，足細胞的足突肌動蛋白骨架將會重新組合排列，如此便會對足細胞的正常結構造成破壞，從而導致腎小球濾過膜通透性增加，引起大量蛋白尿，而這一點在MCD和FSGS中的表現(xiàn)則是尿CD80含量不同，并且具有一定差異性。

綜上所述，通過尿CD80對MCD診斷及MCD和FSGS的鑒別診斷實驗，提供簡便、無創(chuàng)、可重復性好的方法來及時協(xié)助判斷腎病綜合征的病理類型，節(jié)約治療成本，減輕患者痛苦，具有較好的社會效益和經(jīng)濟效益，值得推廣。

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（收稿日期：2017-05-04 本文編輯：任 念）